MCI GEL CRS10W和MCI GEL CRS15W色譜柱固定相是粒徑為3μm、孔徑為100Å的硅膠涂敷在新型光學活性體N,N-Dioctyl-L(D)-alanime表面,MCI GEL CRS10W和MCI GEL CRS15W色譜柱流動相為硫酸銅水溶液。
MCI GEL CRS10W和MCI GEL CRS15W色譜柱的區(qū)別如下:CRS10W色譜柱中, D構型化合物先于L構型被洗脫出來, CRS15W色譜柱中,L構型化合物先于D構型化合物被洗脫出來。
MCI GEL CRS10W和MCI GEL CRS15W色譜柱不但能分離α-氨基酸,也能分離α-羥基羧酸。
綠百草科技是三菱化學的**代理。綠百草科技現(xiàn)貨提供MCI GEL CRS10W和MCI GEL CRS15W色譜柱
MCI GEL CRS10W和MCI GEL CRS15W色譜柱使用注意事項:
1、配體固定相和銅離子流動相之間達到平衡需要幾個小時。在進樣之前或者改變硫酸銅洗脫液的濃度時,建議平衡柱子2-3小時。
2、對于酸性氨基酸,高濃度的硫酸銅洗脫液可以得到更好的分離效果。
3、對弱保留的親水性氨基酸,降低流速(0.2-0.5ml/min)可增加保留。
4、當樣品溶液中氨基酸的濃度高于流動相中硫酸銅的濃度時,連續(xù)進樣可能會降低峰面積。
5、注意不要同時使用水溶性有機溶劑(乙腈、甲醇等)和非水溶性有機溶劑(正己烷、氯仿等)做流動相,這會對柱子造成不可修復的損傷。要特別注意該柱正反相模式不可更換。
6、不要使用酸或堿溶液調節(jié)流動相的pH值。不要使用緩沖液,因為緩沖液會形成沉淀,堵塞柱子。
7、對于強保留的親水性氨基酸,流動相中添加乙腈或者甲醇可以快速洗脫。有機溶劑的濃度要低于15v/v%。
8、DOPA和其它非極性氨基酸會吸附到柱填料上,污染柱子。
9、污染后的柱子再生很困難。
Examples of chromatographic conditions and data
|
|
Amino acids
|
CuSO4 aq.soln(mM)
|
Flow rate(ml/min)
|
Retention time L-Isomers(min)
|
Separation factor(α)
|
Separation rate(Rs)
|
|
1
|
OmHCl
|
0.1
|
0.2
|
6.8
|
1.26
|
<1
|
|
2
|
LysHCl
|
0.1
|
0.2
|
7.7
|
1.45
|
<1
|
|
3
|
Ala
|
0.1
|
0.5
|
11.0
|
1.39
|
1.4
|
|
4
|
HlsHCl
|
0.1
|
0.5
|
10.5
|
1.63
|
1.7
|
|
5
|
Ser
|
0.1
|
0.5
|
10.1
|
1.25
|
1.0
|
|
6
|
Thr
|
0.1
|
0.5
|
11.3
|
1.29
|
1.3
|
|
7
|
Cit
|
0.5
|
0.5
|
10.4
|
1.75
|
2.3
|
|
8
|
Hyp
|
1.0
|
0.2
|
23.8
|
1.23
|
1.1
|
|
9
|
Pro
|
1.0
|
1.0
|
7.3
|
2.13
|
4.5
|
|
10
|
Val
|
1.0
|
1.0
|
8.9
|
2.04
|
5.0
|
|
11
|
Nval
|
1.0
|
1.0
|
11.5
|
2.07
|
4.7
|
|
12
|
Asp
|
2.0
|
0.5
|
13.2
|
1.18
|
0.8
|
|
13
|
Glu
|
2.0
|
1.0
|
16.2
|
1.54
|
2.3
|
|
14
|
Ileu(DL)
|
2.0
|
0.5
|
30.4
|
2.14
|
6.5
|
|
15
|
Ileu(allo)
|
2.0
|
0.5
|
21.9
|
1.97
|
6.0
|
|
16
|
Leu
|
2.0
|
1.0
|
14.6
|
1.97
|
4.6
|
|
17
|
Nleu
|
2.0
|
1.0
|
24.1
|
2.16
|
6.5
|
|
18
|
Met
|
2.0
|
1.0
|
10.3
|
1.64
|
2.6
|
|
19
|
Tyr
|
2.0
|
1.0
|
22.5
|
1.85
|
5.3
|
|
20
|
Eth
|
2.0
|
1.0
|
26.4
|
1.69
|
0.5
|
|
21
|
Phe
|
2.0
|
1.0
|
37.8
|
1.84
|
6.3
|
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