淀粉中順丁烯二酸的高效液相色譜方法
近日，臺(tái)灣“毒淀粉”事件愈演愈烈，廣大民眾陷入“毒食”恐慌。所謂“毒淀粉”，主要是指在淀粉中添加了順丁烯二酸酐。順丁烯二酸酐(Maleic anhydride)簡(jiǎn)稱馬來(lái)酸酐或失水蘋(píng)果酸酐，遇水即水解成順丁烯二酸(又稱馬來(lái)酸)。加入淀粉后可增加食物的彈性、黏性及外觀光亮度，但會(huì)對(duì)人體腎臟造成極大損傷。目前，我國(guó)國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)GB 2760－2011未將順丁烯二酸酐列為食品添加劑。
迪馬“毒淀粉”中順丁烯二酸（酐）檢測(cè)解決方案
2012年，浙江省質(zhì)量技術(shù)監(jiān)督檢測(cè)研究院采用迪馬科技Platisil ODS C18液相色譜柱開(kāi)發(fā)了基于高效液相色譜(HPLC)測(cè)定淀粉及其制品中順丁烯二酸和順丁烯二酸酐總含量的方法。該方法的靈敏度高、準(zhǔn)確度好、前處理操作簡(jiǎn)單，適用于淀粉及其制品中順丁烯二酸和順丁烯二酸酐總含量的批量檢測(cè)。
樣品前處理
稱取2.50 g樣品(**至0.01 g)于50 mL比色管中(淀粉制品用粉粹機(jī)磨碎后稱取)，加入25 mL體積分?jǐn)?shù)5%的乙醇水溶液，渦旋2 min，超聲提取10 min后用提取液定容至50 mL，搖勻，12000 r/min離心5 min后，過(guò)膜上機(jī)測(cè)定。
色譜條件
色譜柱：Platisil ODS C18，250 mm × 4.6 mm，5 μm (Cat.#：99503)
流動(dòng)相：甲醇-1‰磷酸溶液(2∶98)
流速：1.0 mL/min
柱溫：30 ℃
進(jìn)樣量：15 μL
檢測(cè)器：UV 214 nm
色譜柱的選擇
參考標(biāo)準(zhǔn)GB 25544－2010及有關(guān)馬來(lái)酸的文獻(xiàn)報(bào)道，為減少目標(biāo)物出峰時(shí)間附近物質(zhì)的干擾，延長(zhǎng)其色譜保留時(shí)間，本方法采用Platisil ODS C18色譜柱，與普通ODS C18柱相比，該色譜柱可以純水為流動(dòng)相。
順丁烯二酸標(biāo)準(zhǔn)品色譜圖
含順丁烯二酸陰性樣品加標(biāo)的譜圖
海能儀器對(duì)“毒淀粉”中順丁烯二酸（酐）推出的檢測(cè)解決方案
由于順丁烯二酸在水中良好的溶解性（788g/L）,其前處理基質(zhì)組分也不復(fù)雜，所以，其前處理提取方式較為簡(jiǎn)單，另順丁烯二酸在紫外檢測(cè)器中具備相應(yīng)良好響應(yīng)（其定量限可達(dá)250ug/mL），總體說(shuō)明：此方法前處理操作簡(jiǎn)單，靈敏度高，穩(wěn)定性好，適用于淀粉及其制品中順丁烯二酸（酐）含量的測(cè)定。
實(shí)驗(yàn)部分
主要儀器與試劑：
儀器：海能LC7000高效液相色譜儀
配置：LC7011二元高壓泵
LC7020紫外/可見(jiàn)檢測(cè)器
LC7031 柱溫箱
7725i手動(dòng)進(jìn)樣器
Hanon-Clarity色譜工作站
試劑：順丁烯二酸標(biāo)準(zhǔn)品（濃度99.5%以上）、乙腈（色譜純）、超純水、磷酸（分析純）
色譜條件
色譜柱： C18，250 mm × 4.6 mm，5 μm
流動(dòng)相：乙腈-0.1%磷酸溶液(3∶97)
流速：1.0 mL/min
柱溫：30 ℃
進(jìn)樣量：15 μL
波長(zhǎng)： 215 nm
標(biāo)樣制備：
稱取0.05g順丁烯二酸標(biāo)準(zhǔn)品（**到0.1mg），用超純水定容在25mL容量瓶中，得到2mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)液
樣品前處理
稱取5 g樣品(**到0.01 g)于50 mL比色管中(樣品磨碎后稱取)，加入40 mL的超純水，超聲提取12 min后用超純水定容至50 mL，放入冰箱至-5攝氏度環(huán)境中靜置5min,放入離心機(jī)離心5 min后，用0.45um水濾膜過(guò)濾后進(jìn)樣測(cè)試。
圖例
以下是使用海能LC7000高效液相色譜系統(tǒng)在淀粉中加入順丁烯二酸標(biāo)準(zhǔn)品測(cè)試的結(jié)果，譜圖中的主峰為順丁烯二酸，與其他的雜質(zhì)分離度良好，響應(yīng)值高，完全適合在實(shí)驗(yàn)室中做批量測(cè)試應(yīng)用。
上海伍豐順丁烯二酸完整檢測(cè)方法
伍豐建立了一種快速檢測(cè)淀粉中順丁烯二酸的高效液相色譜方法。確定的實(shí)驗(yàn)條件為:利用1 0%的乙醇提取樣品,采用Shim-packVP-ODS柱(4.6 mm×1 50 mm,5μm),柱溫3 0℃,檢測(cè)波長(zhǎng)2 20 nm,采用十六烷基**基溴化銨磷酸緩沖液與8 0%乙腈的混合物(體積比為8 0∶2 0)為流動(dòng)相,流速1.0 mL/min。在確定的實(shí)驗(yàn)條件下,順丁烯二酸在5～100 mg/L范圍內(nèi)線性關(guān)系良好,相關(guān)系數(shù)r=0.9999,平均回收率為9 8.56%,RSD=1.70%。本方法靈敏度高,結(jié)果準(zhǔn)確、可靠,可以用于淀粉中順丁烯二酸的含量檢測(cè)。