1.柱溫變化柱恒溫，必要時需配置恒溫箱

　　2.等度與梯度間未能充分平衡至少用10倍柱體積的流動相平衡柱

　　3.緩沖液容量不夠用>25mmol/L的緩沖液

　　4.柱污染每天沖洗柱

　　5.柱內(nèi)條件變化穩(wěn)定進(jìn)樣條件,調(diào)節(jié)流動相

　　6.柱快達(dá)到壽命采用保護柱

　　(二)保留時間縮短

　　1.流速增加檢查泵,重新設(shè)定流速烤

　　2.樣品超載降低樣品量

　　3.鍵合相流失流動相PH值保持在3~7.5檢查柱的方向

　　4.流動相組成變化防止流動相蒸發(fā)或沉淀

　　5.溫度增加柱恒溫

　　(三)保留時間延長

　　1.流速下降管路泄漏,更換泵密封圈,排除泵內(nèi)氣泡

　　2.硅膠柱上活性點變化用流動相改性劑,如加三乙胺,或采用堿至鈍化柱

　　3.鍵合相流失同前(二)3

　　4.流動相組成變化同前(二)4

　　5.溫度降低同前(二)5

　　(四)出現(xiàn)肩峰或分叉

　　1.樣品體積過大用流動相配樣,總的樣品體積小于峰的15%

　　2.樣品溶劑過強采用較弱的樣品溶劑

　　3.柱塌陷或形成短路通道更換色譜柱,采用較弱腐蝕性條件

　　4.柱內(nèi)燒結(jié)不銹鋼失效更換燒結(jié)不銹鋼,加在線過濾器,過濾樣品

　　5.進(jìn)樣器損壞更換進(jìn)樣器轉(zhuǎn)子

　　(五)鬼峰

　　1.進(jìn)樣閥殘余峰每次用后用強溶劑清洗閥,改進(jìn)閥和樣品的清洗

　　2.樣品中未知物處理樣品

　　3.柱未平衡重新平衡柱,用流動相作樣品溶劑(尤其是離子對色譜)

　　4.三氟乙酸(TFA)氧化(肽譜)每天新配,用抗氧化劑

　　5.水污染(反相)通過變化平衡時間檢查水質(zhì)量，用HPLC級的水

　　(六)基線噪聲bC泂

　　1.氣泡(尖銳峰)流動相脫氣,加柱后背壓

　　2.污染(隨機噪聲)清洗柱,凈化樣品,用HPLC級試劑

　　3.檢測器燈連續(xù)噪聲更換氘燈

　　4.電干擾(偶然噪聲)采用穩(wěn)壓電源,檢查干擾的來源(如水浴等)

　　5.檢測器中有氣泡流動相脫氣,加柱后背壓

　　(七)峰拖尾

　　1.柱超載降低樣品量,增加柱直徑采用較高容量的固定相

　　2.峰干擾清潔樣品,調(diào)整流動相

　　3.硅羥基作用加三乙胺,用堿致鈍化柱增加緩沖液或鹽的濃度降低流動相PH值,鈍化樣品

　　4.同前(四)4同前(四)4

　　5.同前(四)3同前(四)3

　　6.死體積或柱外體積過大連接點降至低,對所有連接點作合適調(diào)整,盡可能采用細(xì)內(nèi)徑的連接管

　　7.柱效下降用較低腐蝕條件,更換柱,采用保護柱

　　(八)峰展寬同前(四)1

　　1.進(jìn)樣體積過大

　　2.在進(jìn)樣閥中造成峰擴展進(jìn)樣前后排出氣泡以降低擴散

　　3.數(shù)據(jù)系統(tǒng)采樣速率太慢設(shè)定速率應(yīng)是每峰大于10點

　　4.檢測器時間常數(shù)過大設(shè)定時間常數(shù)為感興趣峰半寬的10%

　　5.流動相粘度過高增加柱溫,采用低粘度流動相

　　6.檢測池體積過大用小體積池,卸下熱交換器

　　7.保留時間過長等度洗脫時增加溶劑含量也可用梯度洗脫

　　8.柱外體積過大將連接管徑和連接管長度降至小

　　9.樣品過載進(jìn)小濃度小體積樣品

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