那么下面上海金鵬分析儀器有限公司為大家簡單介紹一下關(guān)于電泳帶型分析：
DNA電泳需要進(jìn)行帶型分析，在實(shí)驗(yàn)過程中常會(huì)發(fā)現(xiàn)所得的帶型出現(xiàn)在這樣那樣的問題。在此，我們對(duì)DNA帶型做了相應(yīng)的分析。
|
帶型
|
原因分析
|
解決辦法
|
|
弱帶或無帶
|
上樣的DNA量不夠
|
增加DNA的上樣量，聚丙烯酰胺凝膠電泳比瓊脂糖電泳靈敏度稍高
|
|
DNA降解
|
避免DNA的核酸酶污染
|
|
電泳時(shí)間過長，DNA跑出
|
減短電泳時(shí)間，降低電壓，增強(qiáng)凝膠濃度
|
|
EB染色的DNA，紫外光源不合適
|
應(yīng)用短波長（254nm），增強(qiáng)紫外燈靈敏度
|
|
DNA帶缺失
|
小DNA帶走出凝膠
|
減短電泳時(shí)間，降低電壓，增強(qiáng)凝膠濃度
|
|
分子大小相近的DNA帶不易分辨
|
增加電泳時(shí)間，核準(zhǔn)正確的凝膠濃度
|
|
DNA 變性
|
電泳前請(qǐng)勿高溫加熱DNA鏈，以20mM NaCl Buffer稀釋DNA
|
|
巨大DNA鏈，凝膠電泳不合適
|
在脈沖凝膠電泳上分析
|
|
DNA帶模糊
|
DNA降解
|
避免核酸酶污染
|
|
DNA上樣量過多
|
減少凝膠中DNA上樣量
|
|
所用電泳條件不合適
|
電泳時(shí)電壓不應(yīng)超過20V/cm，溫度＜30℃,巨大DNA鏈，溫度應(yīng)＜15℃，核查所用電泳緩沖液是否有足夠的緩沖能力
|
|
DNA樣含鹽過高
|
電泳前通過乙醇沉淀去除過多的鹽
|
|
有蛋白污染
|
電泳前酚抽提去除蛋白
|
|
DNA變性
|
電泳前勿加熱，用20mM NaCl緩沖液稀釋DNA
|
|
不規(guī)則DNA帶遷移
|
對(duì)于λ/Hind III片段COS位點(diǎn)復(fù)性
|
電泳前加熱DNA 65℃加熱5-10分鐘，然后在冰上冷卻5分鐘
|
|
電泳條件不合適
|
電泳電壓不超過20V/cm，溫度＜30℃，電泳緩沖液有足夠的緩沖能力
|
|
DNA變性
|
以20mM NaCl Buffer稀釋DNA，電泳前勿加熱
|
以上就是上海金鵬分析儀器有限公司為大家整理總結(jié)關(guān)于電泳帶型分析。
我們上海金鵬分析儀器有限公司是專業(yè)生產(chǎn)超微量核酸蛋白測定儀、化學(xué)發(fā)光成像系統(tǒng)、凝膠成像分析系統(tǒng)、紫外分析儀、核酸蛋白檢測儀、紫外檢測儀、蛋白質(zhì)分離純化系統(tǒng)、光化學(xué)反應(yīng)儀、旋渦混合器、恒流泵、自動(dòng)部分收集器等十幾個(gè)系列產(chǎn)品的廠家，歡迎大家前來訂購