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技術文章

凝膠成像系統的基本選購原則
“只選對的，不選貴的”市場上各、各型號的成像儀林林種種，但是從成像原理上可以分成兩大類，分別是拍照成像和掃描成像。拍照成像簡單說就是樣品和相機的相對位置不動，可以進行單次成像或多次成像；掃描成像則是相機對樣品進行局部成像，然后通過樣品或相機的移動對整個樣品進行成像。拍照成像目前主要采用CCD相機成像，由于可以設置不同的曝光時間，常被用來進行微弱的化學發(fā)光及生物發(fā)光的成像。而掃描成像則由于精度高、重復性好被廣泛用于大型樣品以及多通道成像中。可以說，對于大型樣品或多通道應用，能選擇掃描成像的，盡量不要選擇拍照成像。原理搞清楚了，選擇起來就簡單了。不同的原理導致了不同應用的選擇，所以千萬不要相信什么“全能王”之類的鬼話，沒有任何一款機器可以通吃所有應用領域。
下面就實驗室常見的一些應用簡單的說明選擇的依據：核酸電泳凝膠：一般此類凝膠都采用EB染色、紫外激發(fā)，而且凝膠較小。推薦采用一般的凝膠成像設備即可完成。蛋白電泳凝膠：一般此類凝膠采用考染或銀染，白光透射成像。對于小型凝膠您可以選擇一般的凝膠成像設備，但是對于大型凝膠，特別是雙向電泳凝膠，由于CCD拍照成像會有幾何扭曲，而且透鏡效應也會導致不同區(qū)域的信號強度差異，另外CCD拍照也無法保證不同凝膠的成像參數保持一致，因此掃描成像是選擇。轉印膜：這個稍微有些復雜。一般轉印膜有比色法顯色、同位素、化學發(fā)光和熒光等不同檢測手段。比色法顯色就是產生有顏色的條帶或斑點，一般采用普通的凝膠成像設備即可。同位素可以采用壓膠片曝光的方法，但是費時、費力而且容易過飽和。比較通用的方法是由FujiFilm在1981年發(fā)明的磷屏成像技術，獲得信號潛影的磷屏通過激光掃描就可以獲取同位素的信號。而化學發(fā)光是目前常用的蛋白印跡的檢測手段，無疑，冷CCD拍照成像對這種微弱的光信號是合適的。熒光是所有這些檢測手段中令人贊嘆的和有前景的。這不僅僅是因為熒光染料具有寬的動態(tài)范圍，而且還在于它能夠為我們多通路的檢測途徑（同樣適用于凝膠）。當然，您可以使用單一熒光檢測，這時您對凝膠成像設備的要求就包括了新的激光光源和相應的濾光片。
如果您是一個主義者，或者您需要對鄰近或重疊的目標分子進行成像，那么多通道熒光檢測是您的不二之選。這時掃描成像是選擇，這樣選擇不僅僅是因為掃描成像能夠帶來更高的靈敏度和分辨率，更重要的是，不同通道之間沒有幾何扭曲，擬合性好。微孔板及其他特殊需求：對于拍照成像而言，由于幾何扭曲的問題，對微孔板成像就變得比較復雜了，一般必須一個專用的校正裝置才可完成。當然，如果采用掃描成像一般不需要任何額外附件。很多實驗室現在都對小動物成像非常感興趣，然而對小動物進行真的不是一件簡單的事，一方面小動物需要進行麻醉和固定；另一方面還需要對信號位置進行三維定位。因此，能同時功能、代謝和解剖圖像的PET/CT是進行這類成像的有力的工具。