原創(chuàng) 標(biāo)樂中國       標(biāo)樂試樣秀 

冠狀動(dòng)脈支架是一種金屬支架，它具有良好的塑性和幾何穩(wěn)定性，可在閉合狀態(tài)下經(jīng)心導(dǎo)管送至病變部位，再用氣囊擴(kuò)張等方法使之展開，起到支撐血管壁的作用。冠狀動(dòng)脈支架可以將已經(jīng)狹窄或閉塞的血管撐開，恢復(fù)冠狀動(dòng)脈的血流，從而改善心肌供血。

冠狀支架的發(fā)明人是 Charles Dotter，他在 1969 年研制出**個(gè)支架。Charles Dotter 繼續(xù)改進(jìn)他的設(shè)計(jì)并在 1983 年與 Andrew Craig 一起發(fā)明了一種可以擴(kuò)展的支架，這種支架使用鎳鈦合金制造，目前這種材料也經(jīng)常用來制作支架。

雖然支架的使用已經(jīng)變得越來越普遍，但更好地理解人體與支架之間的相互作用仍然是一個(gè)重要的臨床課題。不同的支架設(shè)計(jì)、材料、表面涂層和輔助****的研究需要對裝有支架的血管進(jìn)行詳盡的組織學(xué)和**組織化學(xué)分析，特別是在支架原位的細(xì)胞組織與金屬的界面處。

正確的制備技術(shù)將增強(qiáng)對臨床支架的細(xì)胞反應(yīng)的理解，特別是在組織支架界面。此外，它還可以對擴(kuò)展特性進(jìn)行周密的評估。這樣的觀察甚至可能促使支架設(shè)計(jì)的改進(jìn)及發(fā)展。

支架

制備方案

1、切除安裝有支架的動(dòng)脈，用鹽水沖洗并浸入鹽水中固定兩小時(shí)。

2、取薄切片之前先將安裝有支架的動(dòng)脈進(jìn)行鑲嵌。選擇一種收縮率*小、并且在取薄切片的過程中不會(huì)使鑲嵌材料發(fā)生軟化的低粘度環(huán)氧樹脂，例如 EpoThin2，是一個(gè)非常好的選擇。

使用時(shí)按照產(chǎn)品的說明稱量出一定比例的樹脂和固化劑并將其均勻混合，攪拌操作時(shí)的動(dòng)作應(yīng)當(dāng)和緩以避免產(chǎn)生過多的氣泡。將試樣放入模具內(nèi)并將試樣與環(huán)氧樹脂進(jìn)行真空浸透。*后，澆入足夠量的環(huán)氧樹脂，使其完全覆蓋住試樣。

3、在用精密切割機(jī)進(jìn)行切割前，先用 600#（P1200）和 1000#(P2500) CarbiMet® SiC 砂紙，在 EcoMet 30 或者 AutoMet 研磨拋光機(jī)或類似的設(shè)備上將鑲嵌好的試樣端面磨光。

4、用接觸粘合劑將磨光表面粘接在載玻片上。用 Perspex (一種介電有機(jī)玻璃) 做的承物片對鑲嵌截面可提供比普通載玻片更大的粘合力。不過，用 600#（P1200）CarbiMet® SiC 砂紙對普通載玻片進(jìn)行預(yù)磨光也能改善其粘合性能。

5、選擇一種能使切割損耗 (即由于切割片本身的厚度在切割過程中對試樣材料產(chǎn)生的磨耗) *小的切割片進(jìn)行切割。

注：使用薄切割片時(shí)選用的法蘭盤（切割片的支撐）應(yīng)當(dāng)能提供*大的支撐，以避免切割時(shí)發(fā)生彎曲或扭動(dòng)。粘接了立方氮化硼的 IsoCut® 型薄切割片能夠在每 15 mm 的支架上切割出28至30個(gè)截面。

6、將經(jīng)過鑲嵌的試樣裝在 Isomet High Speed 精密切割機(jī)的夾鉗上。將顯微測微計(jì)進(jìn)行校準(zhǔn)，從試樣載玻片一端截取 50-100μm 厚的截面。

7、重復(fù)步驟 3 和 4，制備下一個(gè)截面的表面。重復(fù)這一過程并將陸續(xù)得到的截面分別粘接在載玻片上。

8、用一系列的 CarbiMet® SiC 砂紙將每個(gè)截面磨光至厚度為 10–20μm。使用砂紙研磨是因?yàn)?SiC 磨料顆粒固定在紙基上不至于嵌入試樣中的細(xì)胞組織部分。磨光先從 320# (P400) 砂紙開始，接著使用 360# (P600)、400# (P800)、600# (P1200)、1000#(P2500) 砂紙。磨光時(shí)要仔細(xì)，避免使材料去除過快和不均勻。在轉(zhuǎn)入下一道砂紙以前要檢查是否已經(jīng)獲得均勻的劃痕。

9、用 3μm 的 UltraPrep? 金剛石研磨薄膜進(jìn)行拋光，然后就可以進(jìn)行顯微觀察。

安裝了支架的動(dòng)脈薄截面顯微組織，

顯示出了細(xì)胞組織與支架的界面

自動(dòng)化制備設(shè)備/特殊夾具
   如果打算用手工方法對薄截面試樣進(jìn)行磨光和拋光，操作者應(yīng)具有相當(dāng)豐富的經(jīng)驗(yàn)，所需的時(shí)間也較長。用手工方法磨薄截面試樣也容易將試樣磨偏，使截面一側(cè)的厚度小于另一側(cè)。

   表面和厚度不均勻的截面試樣不能為組織化學(xué)分析提供*佳的條件。為了制備用于組織學(xué)和**組織化學(xué)染色的試樣，試樣應(yīng)當(dāng)磨光至 5μm 并且厚度均勻。

為了將以上提到的問題減至*小，當(dāng)試樣需要用手工方法制備時(shí)，可以使用具有固定截止環(huán)的定量磨削夾具。例如，組織學(xué)精密磨光夾具 (產(chǎn)品編號 60-8100) 具有用碳化物做的截止環(huán)，可以避免使試樣磨光過度并使試樣獲得均勻的所需厚度。夾具適用的載玻片尺寸為 28 x 48mm。

    大多數(shù)半自動(dòng)研磨拋光機(jī)再加上巖相學(xué)/組織學(xué)用的薄截面載玻片夾持器并使用單點(diǎn)力加載方式，就可以使磨光過程自動(dòng)化。使用低溫蠟帶將包含薄截面試樣的載玻片粘結(jié)在夾具上。然后將每一個(gè)載玻片夾持器放入單點(diǎn)力夾具中。對每塊試樣施加的載荷為 15-25N，力值取決于樣品大小及所需的材料去除速率。至多每隔 2 分鐘對試樣的制備效果進(jìn)行評估直到達(dá)到*佳制備效果為止。