豬皮膚成纖維細胞 
	
	
		
			
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						產品名稱
					 
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						豬皮膚成纖維細胞
					 
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						產品規(guī)格
					 
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						5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
					 
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						組織來源
					 
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						皮膚組織
					 
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						生長特性
					 
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						貼壁培養(yǎng)
					 
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						細胞形態(tài)
					 
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						長梭形細胞
					 
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						分類
					 
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						豬原代細胞
					 
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						貨號
					 
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						A01X2282
					 
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						用途
					 
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						僅供科研實驗
					 
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	細胞特性: 
 
	1)組織來源于實驗動物的正常皮膚組織。
	2)細胞鑒定:纖維連接蛋白(Fibronectin)或波形蛋白(Vimentin)熒光染色為陽性。
	3)經鑒定細胞純度高于90%。
	4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
	5)細胞生長方式:長梭形細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
	推薦培養(yǎng)基
	我們推薦使用 DELF 原代 成纖維 細胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
	細胞簡介: 
	成纖維細胞屬于由中胚層分化而來的間質細胞。由于這些細胞非常容易培養(yǎng),它們已經被廣泛用于細胞和分子生物學研究中。一般而言,成纖維細胞能夠分泌 I型和III型膠原等細胞外基質,并且研究表明不同器官中的成纖維細胞有顯著的不同。傷口修復時,真皮成纖維細胞由可增殖,可遷移的表型變?yōu)橛惺湛s性的,可重塑基質的表型,同時,它們會分泌大量的透明質酸來應對修復時的炎癥反應。
	
 
培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內,影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結締組織盡可能去除,然后將肝組織反復剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用??管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

	⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉,使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
	⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
原代細胞步驟: 
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織,剔除包膜及壞死組織,無菌PBS清洗3-5次;切成約1mm3組織塊;
2. 加入2mmol 的 EDTA,搖勻后放置冰上約 30-60min;
3. 離心,并加入膠原酶消化(含蛋白酶);
4. 消化期間,置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次,消化時間根據腫瘤組織來定,約1-2h;
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時,用 40μm 的細胞濾網過濾細胞,收集;
6. 用培養(yǎng)基重懸,置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。

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group (nonhistone chromosomal) protein isoform IC; High Mobility Group AT hook
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High mobility group protein HMGIC; High mobility group protein I, isoform C;
HMGA 2; HMGI C; HMGIC; LIPO; Non histone chromosomal architectural protein HMGI
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