培養(yǎng)方法與步驟：
①動(dòng)物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個(gè)乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時(shí)間不能過(guò)長(zhǎng)、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺(tái)內(nèi)進(jìn)行無(wú)菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開(kāi)背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開(kāi)腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過(guò)毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門(mén)區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個(gè)25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時(shí)，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來(lái)），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個(gè)小時(shí)內(nèi)即可貼壁，并開(kāi)始生長(zhǎng)。如果無(wú)污染且細(xì)胞生長(zhǎng)良好，可見(jiàn)培養(yǎng)液顏色由原來(lái)的橘紅色變成黃色，此時(shí)可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長(zhǎng)成致密單層細(xì)胞，這時(shí)可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
小鼠肺巨噬細(xì)胞
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產(chǎn)品名稱(chēng)
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小鼠肺巨噬細(xì)胞
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產(chǎn)品規(guī)格
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5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
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組織來(lái)源
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肺組織
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生長(zhǎng)特性
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貼壁培養(yǎng)
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細(xì)胞形態(tài)
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圓形
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分類(lèi)
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小鼠原代細(xì)胞
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貨號(hào)
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A01X1770
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用途
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僅供科研實(shí)驗(yàn)
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細(xì)胞特性：
1）組織來(lái)源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物小鼠的正常肺組織。
2)細(xì)胞鑒定：CD68或MAC387熒光染色為陽(yáng)性。
3)經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細(xì)胞生長(zhǎng)方式：圓形，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 原代 巨噬 細(xì)胞培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
肺巨噬細(xì)胞由單核細(xì)胞分化而來(lái)，廣泛分布在肺間質(zhì)內(nèi)，在細(xì)支氣管以下的管道周?chē)头闻莞魞?nèi)較多。肺巨噬細(xì)胞的吞噬、和分泌作用都十分活躍，有重要防御功能。
吸入空氣中的塵粒、等異物進(jìn)入肺泡和肺間質(zhì)，多被巨噬細(xì)胞吞噬，故細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)常見(jiàn)塵粒、等物進(jìn)入肺泡和肺間質(zhì)，多被巨噬細(xì)胞吞噬，故細(xì)胞胞質(zhì)內(nèi)常見(jiàn)塵粒、次級(jí)溶酶體及吞噬體等。
肺巨噬細(xì)胞還可吞噬衰老的紅細(xì)胞，在心力衰竭患者出現(xiàn)肺瘀血時(shí)，大量紅細(xì)胞從溢出，被巨噬細(xì)胞吞噬。吞噬異物的巨噬細(xì)胞，有的從肺泡腔經(jīng)呼吸道粘液流動(dòng)和纖毛運(yùn)動(dòng)而被咳出，有的進(jìn)入肺管隨進(jìn)入肺結(jié)內(nèi)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
組織可溶性總核蛋白制備試劑盒
MCF2變換序列樣蛋白2抗體
MCF2L2
19號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框77抗體
C19orf77
植物酶（glutaminase）活性比色法定量檢測(cè)試劑盒
人低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白5(LRP-5)elisa分析檢測(cè)試劑盒
大鼠封閉蛋白4(CLDN4)elisa分析檢測(cè)試劑盒
二糖酶測(cè)試盒 測(cè)蔗糖酶Sucrase 50管/24樣 比色法
程序性細(xì)胞死亡2樣抗體
PDCD2L
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白114抗體
CCDC114
磷酸化轉(zhuǎn)錄因子3抗體 Anti-phospho-TCF3/E47/E2A(Thr355)
多腺苷二磷酸多聚酶4抗體/多聚ADP-核糖聚合酶4 Anti-PARP4
腺苷酸硫酸激酶1抗體 Anti-PAPSS1
5-羥色胺受體2C抗體 Anti-5HTR2C
FITC標(biāo)記的兔抗羊IgG H&L
Rabbit Anti-Goat IgG
H&L / FITC
eIF4E結(jié)合蛋白2抗體
eI4EBP2
鋅指蛋白471抗體 Anti-ZNF471
嗜中性粒細(xì)胞胞漿因子1抗體 Anti-NCF1/p47 phox
mTOR相關(guān)調(diào)控蛋白抗體 Anti-Raptor
溴化丙胺太林相關(guān)蛋白2抗體 Anti-STOML2/SLP2
大鼠Ⅴ型膠原(Col Ⅴ)elisa分析檢測(cè)試劑盒
小鼠肺巨噬細(xì)胞Mouse IgG / AF647
mRNA cap甲基轉(zhuǎn)移酶抗體
Cytochrome p450
19A1; Estrogen synthetase; ARO 1; ARO; ARO1; CPV; CYPXIX; Cytochrome P450
family 19 subfamily A polypeptide 1; MGC104309; P 450AROM; P450AROM;
CP19A_HUMAN; Cytochrome P-450AROM; CPV1; CYAR; CYP19; Cyp19a1; Cytochrome P450,
family 19, subfamily A, polypeptide 1; Cytochrome P450, subfamily XIX
(aromatization of androgens); Flavoprotein linked monooxygenase; Microsomal
monooxygenase; OTTHUMP; OTTHUMP; P 450AROM.
小鼠肺巨噬細(xì)胞
大鼠腎周細(xì)胞
馬-達(dá)二氏犬腎細(xì)胞系；MDCK(NBL-2)
WPMY-1人正常前列腺基質(zhì)永生化細(xì)胞
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無(wú)菌條件下的冰上對(duì)新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無(wú)菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時(shí)間根據(jù)腫瘤組織來(lái)定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時(shí)，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過(guò)濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
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