實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料,可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層,這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料,由于細胞間結(jié)合緊密,為了使組織中的細胞充分分散,形成細胞懸液,可采用機械分散法(物理裂解)和消化分離法。其中,機械分散法的特點是簡便、快速,但對組織機械損傷大,而且細胞分散效果差,適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊(或糊狀),應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動,使團塊膨松,由塊狀變成絮狀,此時再采用機械法,用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩,使細胞團塊得以較充分的分散,制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液,接種培養(yǎng)后,細胞容易貼壁生長。
小鼠表皮干細胞
細胞簡介:

角質(zhì)形成細胞在基底層有一亞群,即表皮干細胞,它通過對稱或不對稱分裂產(chǎn)生短暫擴增細胞,短暫擴增細胞經(jīng)過幾代擴增后便成為終末分化的表皮角質(zhì)細胞。表皮是一個可以持續(xù)自我更新的組織,因此表皮干細胞具有足夠的增殖潛力,表皮干細胞不僅在體內(nèi)平衡和創(chuàng)傷修復中其關(guān)鍵作用,而且是腫瘤發(fā)生和基因的主要靶標。
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組織來源
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產(chǎn)品規(guī)格
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貨號
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用途
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皮膚組織
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5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
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A01X1903
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僅供科研研究實驗
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細胞特性:
1)組織來源于實驗動物的正常皮膚組織。
2)細胞鑒定:p63與細胞角蛋白-14(CK-14)熒光染色為陽性。
3)經(jīng)鑒定細胞純度高于90%。
4)不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5)細胞生長方式:鋪路石狀細胞,不規(guī)則細胞,貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 DELF原代 角質(zhì)形成 細胞培養(yǎng)體系 作為該細胞的培養(yǎng)基。
公司正在出售的產(chǎn)品:

兔基質(zhì)金屬蛋白酶1(MMP-1)elisa分析檢測試劑盒
人elisa分析檢測試劑盒
組織尿激酶(UROKINASE)活性熒光定量檢測試劑盒
小鼠半乳糖凝集素-3(Gal-3)elisa分析檢測試劑盒
大鼠骨特異性堿性磷酸酶B(ALP-B)elisa分析檢測試劑盒
組織a-(a-AMYLASE)活性CNPG3比色法定量檢測試劑盒
人單核細胞趨化蛋白3(MCP-3/CCL7)elisa檢測試劑盒
大鼠兒茶酚抑素(CST)elisa檢測試劑盒
血磷濃度測試盒
GSDML蛋白抗體 GSDMB
G蛋白偶聯(lián)受體31抗體 GPR31
腦表皮生長???子跨膜蛋白DNER抗體 DNER
擬南芥ACA11抗體 ACA11
二酰基甘油激酶5/DGK-ε抗體 DGKE
防御素β-114/β-defensin
114抗體 DEFB114
羊抗人球蛋白A human IgA
乙?;竸恿Φ鞍?span>3抗體 Dynamin 3 (acetyl K604)
SFXN2蛋白抗體 SFXN2
S期激酶相關(guān)蛋白1抗體 SKP1
源盒蛋白HOXC9抗體 HOXC9
脫羧酶蛋白體36抗體 CXorf36
膠質(zhì)細胞谷氨酸運載蛋白1抗體 EAAT1
精神發(fā)育遲滯相關(guān)蛋白抗體 FTSJ1
6號染色體開放閱讀框201抗體 C6orf201
AF750標記的白細胞共抗原CD45抗體 CD45, Alexa
Flour 750 conjugated
大鼠Ⅱ型前膠原氨基端原肽(PⅡNT)elisa檢測試劑盒
小鼠表皮干細胞大鼠銅藍蛋白(CP)elisa檢測試劑盒
植物酸性蔗糖轉(zhuǎn)化酶(acid invertase)活性比色法定量檢測試劑盒
IFNA F; Interferon
alpha F; interferon, alpha 21; LeIF F; MGC126687; MGC126689; IFN21_HUMAN.
小鼠表皮干細胞
大鼠視網(wǎng)膜微血管內(nèi)皮細胞
大鼠乳腺癌細胞;SHZ-88
VCAP人前列腺癌細胞
(2)小鼠:可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次,或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min,然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈;
(3)取出心臟組織:用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔,取出心臟組織,置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中;
(4)組織:在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二,充分洗滌里邊的血液,/3次,每次5min;
(5)破碎組織:使用眼科鉗或者剪刀,將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊;(備注:如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min,
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中(備注:破碎組織塊可能還含有液體,可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下,把液體);種植完成后,可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時,然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜(也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜);
(7)培養(yǎng)基培養(yǎng):將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基,然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱(37℃,5% CO2)培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況,一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率;