大鼠主動(dòng)脈弓平滑肌細(xì)胞
細(xì)胞簡(jiǎn)介：
血管發(fā)生和發(fā)展的一個(gè)主要因素是由于血管平滑肌細(xì)胞（ smooth
muscle cells, SMCs）轉(zhuǎn)變成為了具有繁殖能力的表型。近期的研究表明平滑肌細(xì)胞能表達(dá)鈣離子通道，ICAM-1和VCAM-1。其中ICAM-1和VCAM-1的表達(dá)可能是造成血管壁炎癥反應(yīng)，并進(jìn)一步造成血管的原因
。因此，對(duì)血管平滑肌細(xì)胞的體外培養(yǎng)和研究可用來發(fā)現(xiàn)和確定新的血管的靶向方法。
|
組織來源
|
產(chǎn)品規(guī)格
|
貨號(hào)
|
用途
|
|
主動(dòng)脈組織
|
5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
|
A01X1544
|
僅供科研研究實(shí)驗(yàn)
|
細(xì)胞特性：
1） 組織來源于實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的正常主動(dòng)脈組織。
2） 細(xì)胞鑒定：平滑肌肌動(dòng)蛋白（α-SMA）熒光染色為陽性。
3） 經(jīng)鑒定細(xì)胞純度高于90%。
4） 不含有 HIV-1、 HBV、HCV、支原體、、酵母和。
5） 細(xì)胞生長(zhǎng)方式：長(zhǎng)梭形，不規(guī)則細(xì)胞，貼壁培養(yǎng)。
推薦培養(yǎng)基
我們推薦使用 Delf 原代平滑肌 細(xì)胞 培養(yǎng)體系 作為體外培養(yǎng)的培養(yǎng)基。
實(shí)驗(yàn)具體步驟：
（1）動(dòng)物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡(jiǎn)單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉(zhuǎn)移至無菌操作臺(tái)使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細(xì)胞從組織塊中爬出來，同時(shí)能夠消除部分結(jié)締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經(jīng)過的心臟破碎組織塊經(jīng)過離心后，可以用細(xì)頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個(gè)無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時(shí)，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細(xì)胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個(gè)細(xì)胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達(dá)到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細(xì)胞傳代：當(dāng)單個(gè)細(xì)胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進(jìn)行傳代，此時(shí)可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細(xì)胞，消化時(shí)間根據(jù)正常細(xì)胞消化時(shí)間即可，當(dāng)然可以在消化過程中不斷管擦爬出細(xì)胞的皺縮情況，一旦達(dá)到消化完成（皺縮細(xì)胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個(gè)細(xì)胞時(shí)候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會(huì)再貼壁成功啦。
根據(jù)細(xì)胞數(shù)量種植到對(duì)應(yīng)的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細(xì)胞在傳代至代、第五代、第十代時(shí)候可以將部分細(xì)胞進(jìn)行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細(xì)胞術(shù)等。
實(shí)驗(yàn)方法:
一、懸浮細(xì)胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經(jīng)離心后由于各種細(xì)胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細(xì)胞。
二、實(shí)體組織材料的分離方法
對(duì)于實(shí)體組織材料，由于細(xì)胞間結(jié)合緊密，為了使組織中的細(xì)胞充分分散，形成細(xì)胞懸液，可采用機(jī)械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機(jī)械分散法的特點(diǎn)是簡(jiǎn)便、快速，但對(duì)組織機(jī)械損傷大，而且細(xì)胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團(tuán)塊（或糊狀），應(yīng)用酶的生化作用和非酶的化學(xué)作用進(jìn)一步使細(xì)胞間的橋連結(jié)構(gòu)松動(dòng)，使團(tuán)塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時(shí)再采用機(jī)械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細(xì)胞團(tuán)塊得以較充分的分散，制成少量細(xì)胞群團(tuán)和大量單個(gè)細(xì)胞的細(xì)胞懸液，接種培養(yǎng)后，細(xì)胞容易貼壁生長(zhǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
HSP-27ELISAKit
大鼠白介素28A(IL-28A)elisa分析檢測(cè)試劑盒
IL-28A ELISA kit
人肌酸激酶工酶MB(CK-MB)elisa分析檢測(cè)試劑盒
CK-MBELISAKit
食物膠原蛋白（collagen）比色法定量檢測(cè)試劑盒
核蛋白提取試劑盒100T
大鼠磷酸化核因子-κB(p-NF-κB)elisa檢測(cè)試劑盒
非突觸體腦組織線粒體分離試劑盒
魚黃體**素(LH)elisa分析檢測(cè)試劑盒
LH ELISA Kit
人補(bǔ)體蛋白4(C4)elisa分析檢測(cè)試劑盒
C4ELISAKit
小鼠骨骼肌慢肌肌鈣蛋白T(TNNT1)elisa檢測(cè)試劑盒
大鼠白介素1α(IL-1α)elisa檢測(cè)試劑盒
人C－反應(yīng)蛋白標(biāo)準(zhǔn)溶液
人αN已酰氨基葡糖苷酶(αNAG)elisa分析檢測(cè)試劑盒
核因子κB抑制蛋白樣蛋白2抗體
NFKBIL2
生長(zhǎng)抑制和分化相關(guān)蛋白抗體
GIDRP88
微管蛋白抗體（組化用抗體）Tubulin β Anti-Tubulin-Beta
核苷酸還原酶M2B抗體 Anti-p53R2/RRM2B
成骨相關(guān)轉(zhuǎn)錄因子抗體 Anti-Osterix
鋅指轉(zhuǎn)錄因子Slug抗體 Anti-SNAI2/SLUG
Cy7標(biāo)記的兔抗大鼠IgG H&L
大鼠主動(dòng)脈弓平滑肌細(xì)胞小鼠抗心磷脂抗體IgA(ACA-IgA)elisa檢測(cè)試劑盒
植物總酚測(cè)試盒
Interferon alpha 6L;
Interferon alpha C; interferon, alpha 10; LeIF C; MGC119878; IFN10_HUMAN.
大鼠主動(dòng)脈弓平滑肌細(xì)胞
人心臟微血管內(nèi)皮細(xì)胞
NCI-H23人非小細(xì)胞肺癌細(xì)胞
MOVAS小鼠主動(dòng)脈血管平滑肌細(xì)胞
- 溫馨提示：為規(guī)避購(gòu)買風(fēng)險(xiǎn)，建議您在購(gòu)買前務(wù)必確認(rèn)供應(yīng)商資質(zhì)與產(chǎn)品質(zhì)量。
- 免責(zé)申明：以上內(nèi)容為注冊(cè)會(huì)員自行發(fā)布，若信息的真實(shí)性、合法性存在爭(zhēng)議，平臺(tái)將會(huì)監(jiān)督協(xié)助處理，歡迎舉報(bào)