兔視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞
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產(chǎn)品名稱
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兔視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞
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產(chǎn)品規(guī)格
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5×105cells/T25細(xì)胞培養(yǎng)瓶
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組織來源
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視網(wǎng)膜
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生長特性
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貼壁
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細(xì)胞形態(tài)
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成纖維細(xì)胞樣
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分類
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兔原代細(xì)胞
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貨號
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A01X2238
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用途
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僅供科研實(shí)驗(yàn)
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培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基：含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率：每2-3天換液一次
生長特性：貼壁
細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣
傳代特性：可傳3代左右
消化液：0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件：氣相：空氣，95%；CO2，5%
兔視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞體外培養(yǎng)周期有限；建議使用配套的生長培養(yǎng)基及正確的操作方法來培養(yǎng)，以此保證該細(xì)胞的佳培養(yǎng)狀態(tài)。
細(xì)胞簡介：
兔視網(wǎng)膜血管周細(xì)胞分離自視網(wǎng)膜微血管組織；周細(xì)胞（pericyte）又稱Rouget細(xì)胞和壁細(xì)胞，是一種包圍全身和靜脈中內(nèi)皮細(xì)胞的細(xì)胞，可以收縮。周細(xì)胞嵌入內(nèi)皮細(xì)胞的基膜中，通過物理接觸和旁分泌信號與內(nèi)皮細(xì)胞進(jìn)行細(xì)胞通訊，監(jiān)視和穩(wěn)定內(nèi)皮細(xì)胞的成熟過程。此外，周細(xì)胞還具有調(diào)控血流量、細(xì)胞碎屑和吞噬以及血腦屏障滲透性的作用，其多功能性是目前研究的熱點(diǎn)之一，所以對血管周細(xì)胞的生物學(xué)特征、標(biāo)記物、細(xì)胞功能等的研究都為相關(guān)研究提供基礎(chǔ)資料。周細(xì)胞產(chǎn)生手指狀的外延以調(diào)控的血流量。周細(xì)胞和內(nèi)皮細(xì)胞之間共同擁有一個基膜，基膜上有多種細(xì)胞連接，包括多種整合素、神經(jīng)鈣黏素、纖連蛋白以及接合素。它還參與直徑的雙向調(diào)控；受損時，周細(xì)胞還可增殖，分化為內(nèi)皮細(xì)胞和成纖維細(xì)胞。
方法簡介：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔視網(wǎng)膜血管周細(xì)胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化法及不銹鋼網(wǎng)篩過濾法制備而來，細(xì)胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測：
實(shí)驗(yàn)室分離的兔視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞經(jīng)α-SMA熒光鑒定，純度可達(dá)90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
培養(yǎng)方法與步驟：
①動物處理：用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡，然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒（浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi)，影響培養(yǎng)）后迅速置于的培養(yǎng)皿中，帶入超凈工作臺內(nèi)進(jìn)行無菌操作取材。
②取材：將乳鼠俯臥位，用乙醇進(jìn)行一次背部，再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚，剖開腹部，取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中，除去其他連帶組織，用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次，每次1~2 ml，洗去血污，將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離：用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除，然后將肝組織反復(fù)剪碎，直至剪成0.5~1 mm3的小塊后，加入PBS 1~2ml，另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次，棄廢液。
④接種：用吸管加2滴小牛血清，小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液，然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地（組織塊之間相距約0.5 cm左右）排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。
⑤培養(yǎng)：將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn)，使瓶底向上，加入1~2 ml培養(yǎng)液，擰緊瓶蓋，做好標(biāo)記，置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時，待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后，再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶（盡量注意不要使組織塊漂浮起來），另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊，將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài)，繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察：細(xì)胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁，并開始生長。如果無污染且細(xì)胞生長良好，可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色，此時可補(bǔ)加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細(xì)胞，這時可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
原代細(xì)胞步驟：
1. 在無菌條件下的冰上對新鮮離體的腫瘤組織，剔除包膜及壞死組織，無菌PBS清洗3-5次；切成約1mm3組織塊；
2. 加入2mmol 的 EDTA，搖勻后放置冰上約 30-60min；
3. 離心，并加入膠原酶消化（含蛋白酶）；
4. 消化期間，置于37°培養(yǎng)箱。每15min搖晃一次，消化時間根據(jù)腫瘤組織來定，約1-2h；
5. 待大部分組織塊消化成透明狀時，用 40μm 的細(xì)胞濾網(wǎng)過濾細(xì)胞，收集；
6. 用培養(yǎng)基重懸，置于培養(yǎng)箱培養(yǎng)。
公司正在出售的產(chǎn)品：
T4ELISAKit
大鼠Ⅰ型前膠原羧基端肽(PⅠCP)elisa分析檢測試劑盒
PⅠCP ELISA Kit
人鈣蛋白酶2(M/II)大亞基(CAPN2)(CAPN2)elisa分析檢測試劑盒
HumanCAPN2ELISAkit
小鼠膠原酶I(Collagenase I)elisa檢測試劑盒
大鼠促腎上腺皮質(zhì)素釋放受體1(CRHR1)elisa檢測試劑盒
植物脊髓過氧化酶（MPO）活性高質(zhì)敏感（DTNB）比色法定量檢測試劑盒
人丙二醛(MDA)elisa分析檢測試劑盒
異檸檬酸脫氫酶gamma亞基抗體
IDH3G
白血病相關(guān)蛋白AHI1抗體
AHI1
小鼠β甘露糖苷酶(β Manase)elisa檢測試劑盒
谷氨酸（Glu）含量測試盒
石蠟切片組織IL蛋白表達(dá)NBT顯色光學(xué)顯微鏡檢測試劑盒
脲酶 EC3.5.1.5 10KU/瓶
磷酸化酶激酶γ1
PHKG1
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白37抗體
CCDC37
腫瘤蛋白D54蛋白抗體 Anti-TPD54/TPD52L2
嘌呤受體P2X7抗體 Anti-P2RX7
原鈣粘蛋白介導(dǎo)的PCDHαC2受體抗體 Anti-PCDHAC2
絲氨酸合并蛋白3抗體（腫瘤差異表達(dá)蛋白） Anti-SERINC3
Cy5標(biāo)記的驢抗豚鼠IgG H&L
兔視網(wǎng)膜微血管周細(xì)胞Donkey Anti-Guinea Pig IgG H&L / Cy5
TRAF4相關(guān)因子1抗體
2310009M24Rik; LRP;
Lung Resistance Related Protein; Lung resistance-related protein; Major Vault
Protein; MVP; MVP_HUMAN; VAULT 1; VAULT1.
兔輸卵管上皮細(xì)胞
兔主動脈弓平滑肌細(xì)胞
TT人甲狀腺癌細(xì)胞
HEK-293（人胚腎細(xì)胞）
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