大鼠視網(wǎng)膜前體細胞
細胞簡介：
大鼠視網(wǎng)膜前體細胞分離自視網(wǎng)膜組織；視網(wǎng)膜居于眼球壁的內層，是一層透明的薄膜。視網(wǎng)膜由色素上皮層和視網(wǎng)膜感覺層組成，兩層間在病理情況下可分開，稱為視網(wǎng)膜脫離。色素上皮層與脈絡膜緊密相連，由色素上皮細胞組成，它們具有支持和營養(yǎng)光感受器細胞、遮光、散熱以及再生和修復等作用。組織學上視網(wǎng)膜分為10層，由外向內分別為：色素上皮層、視錐、視桿細胞層、外界膜、外顆粒層、外叢狀層、內顆粒層、內叢狀層、神經節(jié)細胞層、神經纖維層、內界膜。視網(wǎng)膜內層為襯于血管膜內面的一層薄膜，有感光作用；后部鼻側有一視神經。視網(wǎng)膜上的感覺層是由三個神經元組成。神經元是視細胞層，專司感光，它包括錐細胞和桿細胞。視桿細胞主要在離中心凹較遠的視網(wǎng)膜上，而視錐細胞則在中心凹處多。層叫雙節(jié)細胞，約有10到數(shù)百個視細胞通過雙節(jié)細胞與一個神經節(jié)細胞相聯(lián)系，負責聯(lián)絡作用。第三層叫節(jié)細胞層，專管傳導。視網(wǎng)膜是一層菲薄的但又非常復雜的結構，它貼于眼球的后壁部，傳遞來自視網(wǎng)膜感受器沖動的神經纖維跨越視網(wǎng)膜表面，經由視神經到達出口。視網(wǎng)膜的分辨力是不均勻的，在黃斑區(qū)，其分辨能力強。
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組織來源
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產品規(guī)格
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貨號
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用途
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視網(wǎng)膜組織
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5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
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A01X1752
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僅供科研研究實驗
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培養(yǎng)信息：
培養(yǎng)基 含B-27 Supplement、EGF、bFGF、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每2-3天換液一次
生長特性 半貼半懸浮
細胞形態(tài) 圓形
傳代特性 可傳1-2代
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相：空氣，95%；CO2，5%
方法簡介：
公司實驗室分離的大鼠視網(wǎng)膜前體細胞采用胰蛋白酶消化法結合培養(yǎng)基培養(yǎng)篩選制備而來，細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質量檢測：
公司實驗室分離的大鼠視網(wǎng)膜前體細胞經Nestin熒光鑒定，純度可達90%以上，且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
實驗具體步驟：
（1）動物福利：小鼠麻醉犧牲/處死，或者斷頸處死；
（2）小鼠：可以將小鼠腹部使用75%乙醇擦拭3次，或者簡單粗暴的使用75%乙醇在燒杯中浸泡3min，然后轉移至無菌操作臺使用無菌吸水紙/棉花將酒精擦拭干凈；
（3）取出心臟組織：用眼科剪在鑷子的配合下打開腹腔，取出心臟組織，置于含有2X雙抗冰冷PBS的培養(yǎng)皿中；
（4）組織：在含有2X雙抗PBS中將心臟一分為二，充分洗滌里邊的血液，/3次，每次5min；
（5）破碎組織：使用眼科鉗或者剪刀，將心臟組織剪碎至1-3 mm3大小組織塊；（備注：如果可以使用0.08% 胰蛋白酶和0.3 mg/ml膠原酶Ⅰ于37℃聯(lián)合消化組織3-5 min，
利于后期細胞從組織塊中爬出來，同時能夠消除部分結締組織等）
（6）種植組織塊：將上述組織使用2X雙抗冰冷PBS洗滌3次，每次5min，然后使用完全培養(yǎng)基（含有1X雙抗）洗滌一次。經過的心臟破碎組織塊經過離心后，可以用細頭
鑷子將組織塊種植于培養(yǎng)皿中（備注：破碎組織塊可能還含有液體，可以在一個無菌培養(yǎng)皿底沾幾下，把液體）；種植完成后，可以將培養(yǎng)皿正置3-5小時，然后更換培養(yǎng)皿的
蓋子正置放置過夜（也可以使用封口膜密閉培養(yǎng)皿在4℃正置過夜）；
（7）培養(yǎng)基培養(yǎng)：將組織塊中輕柔緩慢的加入完全培養(yǎng)基，然后在恒溫潮濕細胞培養(yǎng)箱（37℃，5% CO2）培養(yǎng)48h后觀察單個細胞從組織塊中爬出情況，一般3-5 day能夠達到傳代的爬出效率；
（8）貼壁細胞傳代：當單個細胞從組織塊爬出面積在組織塊3-5倍，進行傳代，此時可以使用0.25% or 1/3 0.25% 胰蛋白酶消化組織塊爬出的細胞，消化時間根據(jù)正常細胞消化時間??可，當然可以在消化過程中不斷管擦爬出細胞的皺縮情況，一旦達到消化完成（皺縮細胞≥70%）即可使用完全培養(yǎng)基終止消化。在吹打單個細胞時候，一定要輕柔/緩慢，不能吹打到組織塊，如果組織塊掉下來，大概率是不會再貼壁成功啦。
根據(jù)細胞數(shù)量種植到對應的培養(yǎng)皿/瓶中；
（9）鑒定：細胞在傳代至代、第五代、第十代時候可以將部分細胞進行鑒定，鑒定辦法包括：RNA-seq、western blot、qRT-PCR、RT-PCR、IF、流式細胞術等。
實驗方法:
一、懸浮細胞的分離方法
組織材料若來自血液、羊水、胸水或腹水的懸液材料，可采用低速離心。經離心后由于各種細胞的比重不同可在分層液中形成不同層，這樣可根據(jù)需要收獲目的細胞。
二、實體組織材料的分離方法
對于實體組織材料，由于細胞間結合緊密，為了使組織中的細胞充分分散，形成細胞懸液，可采用機械分散法（物理裂解）和消化分離法。其中，機械分散法的特點是簡便、快速，但對組織機械損傷大，而且細胞分散效果差，適用于處理纖維成分少的軟組織。消化分離法是指把組織剪切成較小團塊（或糊狀），應用酶的生化作用和非酶的化學作用進一步使細胞間的橋連結構松動，使團塊膨松，由塊狀變成絮狀，此時再采用機械法，用吸管吹打分散或電磁攪拌或在搖珠瓶中振蕩，使細胞團塊得以較充分的分散，制成少量細胞群團和大量單個細胞的細胞懸液，接種培養(yǎng)后，細胞容易貼壁生長。
公司正在出售的產品：
細胞BAD蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
小尾寒羊阿黑皮素原(POMC)elisa分析檢測試劑盒
大鼠粒細胞集落刺激因子(GCSF)elisa檢測試劑盒
組織短鏈烯脂酰水合酶（ENOYL COA HYDRATASE）活性比色法定量檢測試劑盒
鳥類催乳素(PRL/LTH)elisa檢測試劑盒
信號識別顆?？贵w Anti-Signal recognition particle
Rad51抗體 Anti-Rad51
NCK銜接蛋白2抗體 Anti-NCK2/Nck beta
鋅結合乙醇脫氫酶結構域蛋白2抗體 Anti-ZADH2
細胞周期蛋白依賴性激酶5激活因子1抗體 CDK5R1/p35
線粒體核糖體蛋白L42抗體 MRPL42
β淀粉樣肽1-42(C端)/β-Amyloid 1-42 (CT)抗體 beta-Amyloid 1-42 (CT)
艾滋病病毒抗體 HIV gp41
Bcl-2源結構域樣蛋白1抗體 BECN1L1
CD164抗體 CD164
激酶B單克隆抗體 NTRK2/TrkB
磷酸二酯酶4D抗體 PDE4D
腫瘤/睪丸抗原家族104成員2抗體 POTEE
周期素D結合蛋白1抗體 CCNDBP1
高爾基體蛋白A亞基4抗體 Golgin subfamily A member 4
谷胱甘肽S轉移酶A4抗體 GSTA4
LINS蛋白抗體 LINS
MFSD11蛋白抗體 MFSD11
熱休克轉錄因子HSFY1抗體 HSFY1
軟骨細胞蛋白39抗體 CHI3L2
人白介素-7（IL-7）elisa檢測試劑盒
大鼠視網(wǎng)膜前體細胞血液蘋果酸脫氫酶（MDH）活性比色法定量檢測試劑盒
小鼠蘭尼定受體1(RYR1)elisa檢測試劑盒
LAMA 1; LAMA; LAMA1;
LAMB1; Laminin A chain; Laminin alpha 1; Laminin alpha 1 chain; Laminin B1
chain; Laminin subunit beta 1.
大鼠視網(wǎng)膜神經節(jié)細胞
小鼠胸腺上皮細胞
HCC827人非小細胞肺癌細胞
bEnd.3小鼠腦微血管內皮細胞株
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