培養(yǎng)方法與步驟:
①動物處理:用頸椎脫白法處死使新生乳鼠斷髓迅速死亡,然后將整個乳鼠浸入盛有75%酒精的燒杯中2~3秒(浸泡時間不能過長、以免酒精從口浸入體內(nèi),影響培養(yǎng))后迅速置于的培養(yǎng)皿中,帶入超凈工作臺內(nèi)進行無菌操作取材。
②取材:將乳鼠俯臥位,用乙醇進行一次背部,再用的解剖剪剪開背部肋下緣脊柱兩側(cè)的皮膚,剖開腹部,取出肝臟放入另一培養(yǎng)皿中,除去其他連帶組織,用消過毒的吸管小心吸取PBS溶液漂洗肝組織3次,每次1~2 ml,洗去血污,將廢液棄于廢液杯中。
③組織分離:用眼科剪和鑷子將肝門區(qū)所附的血管結(jié)締組織盡可能去除,然后將肝組織反復(fù)剪碎,直至剪成0.5~1 mm3的小塊后,加入PBS 1~2ml,另取1只吸管前端反復(fù)吹打清洗組織塊兒3次,棄廢液。
④接種:用吸管加2滴小牛血清,小心地用彎頭吸管前端將組織塊輕輕吹打均勻制成懸液,然后仍用吸管前端吸取組織懸液、將其均勻地(組織塊之間相距約0.5 cm左右)排種在培養(yǎng)瓶底壁上; 每個25ml的培養(yǎng)瓶中可接種20塊左右。

⑤培養(yǎng):將培養(yǎng)瓶慢慢翻轉(zhuǎn),使瓶底向上,加入1~2 ml培養(yǎng)液,擰緊瓶蓋,做好標(biāo)記,置 37 ℃恒溫箱中培養(yǎng)1~2小時,待組織塊略干燥能牢固貼于瓶壁上后,再緩慢翻轉(zhuǎn)培養(yǎng)瓶(盡量注意不要使組織塊漂浮起來),另加入培養(yǎng)液2 ml左右使其能覆蓋組織塊,將瓶蓋調(diào)整在略微松弛狀態(tài),繼續(xù)置37 ℃恒溫箱靜放培養(yǎng)。
⑥觀察:細胞接種后一般幾個小時內(nèi)即可貼壁,并開始生長。如果無污染且細胞生長良好,可見培養(yǎng)液顏色由原來的橘紅色變成黃色,此時可補加或更換培養(yǎng)液。10~15天后可長成致密單層細胞,這時可進行傳代培養(yǎng)。
大鼠軟骨細胞
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產(chǎn)品名稱
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大鼠軟骨細胞
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產(chǎn)品規(guī)格
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5×105cells/T25細胞培養(yǎng)瓶
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組織來源
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軟骨組織
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生長特性
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貼壁
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細胞形態(tài)
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梭形、多角形
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分類
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大鼠原代細胞
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貨號
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A01X1648
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用途
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僅供科研實驗
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培養(yǎng)信息:
培養(yǎng)基 含FBS、生長添加劑、Penicillin、Streptomycin等
換液頻率 每3-4天換液一次
生長特性 貼壁
細胞形態(tài) 梭形、多角形
傳代特性 可傳5代左右;3代以內(nèi)狀態(tài)佳
消化液 0.25%胰蛋白酶
培養(yǎng)條件 氣相:空氣,95%;CO2,5%
細胞簡介:
大鼠軟骨細胞分離自軟骨組織;軟骨組織由軟骨細胞、基質(zhì)及纖維構(gòu)成。軟骨組織再生能力強,這些增生的幼稚細胞形似纖維母細胞,以后逐漸變?yōu)檐浌悄讣毎?,并形成軟骨基質(zhì),細胞被埋在軟骨陷窩內(nèi)而變?yōu)殪o止的軟骨細胞。根據(jù)軟骨組織內(nèi)所含纖維成分的不同,可將軟骨分為透明軟骨、彈性軟骨和纖維軟骨三種,其中以透明軟骨的分布較廣,結(jié)構(gòu)也較典型。軟骨細胞(chondrocyte)位于軟骨陷窩內(nèi)。幼稚的軟骨細胞位于軟骨組織的表層,單個分布,體積較小,呈橢圓形,長軸與軟骨表面平行,越向深層的軟骨細胞體積之間增大呈圓形,細胞核圓形或卵圓形,染色淺,細胞質(zhì)弱嗜堿性,常見數(shù)量不一的脂滴。成熟的軟骨細胞多2-8個成群分布于軟骨陷窩內(nèi),這些軟骨細胞由同一個母細胞分裂增殖而成,稱為同源細胞群。電鏡下,軟骨細胞有突起和皺褶,細胞質(zhì)內(nèi)有大量的粗面內(nèi)質(zhì)網(wǎng)和發(fā)達的高爾基復(fù)合體及少量的線粒體。在組織切片中,軟骨細胞收縮為不規(guī)則形,在軟骨囊和細胞之間出現(xiàn)較大的腔隙。體外培養(yǎng)的軟骨細胞對于研究其生理功能、作用以及各種致病因素作用下的病理生理改變具重要意義。
方法簡介:
公司實驗室分離的大鼠軟骨細胞采用膠原酶-中性蛋白酶聯(lián)合消化制備而來,細胞總量約為5×10?cells/瓶。
質(zhì)量檢測:
公司實驗室分離的大鼠軟骨細胞經(jīng)Ⅱ型膠原蛋白熒光鑒定,純度可達90%以上,且不含有HIV-1、HBV、HCV、支原體、、酵母和等。
公司正在出售的產(chǎn)品:
細胞APC蛋白表達比色法定量檢測試劑盒
小鼠游離脂肪酸(FFA)elisa檢測試劑盒
大鼠抗IVIgG抗體elisa檢測試劑盒
組蛋白脫乙?;?span>9(HDAC9)活性比色法定量檢測試劑盒
人脂肪細胞脂肪酸結(jié)合蛋白(aFABP)elisa檢測試劑盒
豚鼠卵清蛋白特異性IgG(OVA sIgG)elisa檢測試劑盒
N-甲酰蛋氨酰氨肽酶(N-formylmethionyl
aminopeptidase)
食物總抗氧化能力(TAC)比色法(DDPH)定量檢測試劑盒
前列腺酸性磷酸酶PACP測試盒 50管/25樣 比色法
細胞色素P450 8B1抗體 CYP8B1
細胞周期相關(guān)激酶抗體 CCRK
ZFY19抗體 ZFY19
β-酮脂酰合成酶/β-ketoacyl synthase抗體 OXSM
ATP5E蛋白抗體 ATP5E
BF594標(biāo)記的乳腺癌膜蛋白11/前梯度源蛋白3抗體 BCMP11, AbBy Fluor 594 conjugated
跨膜蛋白SEMA4F抗體 SEMA4F
酪酪肽抗體 PYY
脂肪細胞型脂肪酸結(jié)合蛋白單克隆抗體 FABP4
腫瘤壞死因子配體超家族成員10C DcR1
肝腸鈣粘連蛋白重組兔單克隆抗體 CDH17/LI-cadherin
高遷移率族蛋白20A抗體 HMG20A
KIAA1161蛋白抗體 KIAA1161
LSM10相關(guān)蛋白抗體 LSM10
醛固酮類還原酶家族7成員A2抗體 AKR7A2
溶質(zhì)載體家族蛋白2成員A13抗體 SLC2A13
人γ-氨基丁酸(GABA)elisa檢測試劑盒
大鼠軟骨細胞純化線粒體NADH氧化酶活性定量檢測試劑盒
小鼠抗核膜糖蛋白210抗體(gp210)elisa分析檢測試劑盒
adipsin;
Adipsin/complement factor D; adn; C3 convertase activator; CFAD_HUMAN; CFD;
Complement factor D; complement factor D preproprotein; D component of
complement; DF; FactorD; PFD; Properdin factor D.
大鼠腮腺細胞
小鼠胰腺腺泡上皮細胞
EA.hy926人臍靜脈細胞融合細胞
B16-F1 小鼠黑色素瘤細胞