商品屬性：

產(chǎn)品名稱(chēng)	LLC/GFP 小鼠肺癌細(xì)胞帶綠色熒光	英文名稱(chēng)	LLC/GFP
產(chǎn)品貨號(hào)	AXB9731	培養(yǎng)條件	氣相：95%空氣+5%二氧化碳；
生長(zhǎng)特性	半貼壁生長(zhǎng)	細(xì)胞形態(tài)	上皮細(xì)胞樣
產(chǎn)品種屬	小鼠	凍存條件	無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存
組織來(lái)源	肺	用途	僅供科研研究實(shí)驗(yàn)

商品詳情：

細(xì)胞別稱(chēng)；LLC-GFP-puro；小鼠Lewis肺癌細(xì)胞-GFP-puro；小鼠肺癌細(xì)胞株-綠色熒光蛋白標(biāo)記

種屬來(lái)源；小鼠

組織來(lái)源；肺

生長(zhǎng)特性；半貼壁生長(zhǎng)

細(xì)胞形態(tài)；上皮細(xì)胞樣

細(xì)胞代數(shù)；p3-p8

背景介紹；LLC-GFP細(xì)胞穩(wěn)定表達(dá)螢光蛋白。該細(xì)胞株性狀穩(wěn)定，培養(yǎng)時(shí)不需要添加維持?？捎米魑灩獾鞍谆钚詸z測(cè)中的陽(yáng)性對(duì)照，也可用于活體動(dòng)物成像實(shí)驗(yàn)。該細(xì)胞通過(guò)慢病毒轉(zhuǎn)染的方式攜帶GFP基因。LLC細(xì)胞是小鼠Lewis肺癌細(xì)胞。

生物等級(jí)；1

細(xì)胞規(guī)格；1x106cells/T25培養(yǎng)瓶或者1mL凍存管包裝

支原體檢測(cè)；無(wú)

保藏機(jī)構(gòu)；ATCC; CRL-1642 BCRC; 60050 BCRJ; 0145 ECACC; 90020104

培養(yǎng)基；90% DMEM+10% FBS+PS+1.0ug/ml puro

培養(yǎng)條件；氣相：95%空氣+5%二氧化碳；溫度：37℃

凍存條件；無(wú)血清凍存液，液氮儲(chǔ)存

細(xì)胞培養(yǎng)操作：

1) 復(fù)蘇細(xì)胞：以下細(xì)胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說(shuō)明書(shū)為主。
將含有1mL細(xì)胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補(bǔ)加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細(xì)胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補(bǔ)加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細(xì)胞傳代：如果細(xì)胞密度達(dá) 80%-90%，即可進(jìn)行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤(rùn)洗細(xì)胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細(xì)胞消化情況，若細(xì)胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺(tái)，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細(xì)胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)，可進(jìn)行細(xì)胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細(xì)胞及細(xì)胞培養(yǎng)液，裝入無(wú)菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進(jìn)行細(xì)胞計(jì)數(shù)。
b、根據(jù)細(xì)胞數(shù)量加入無(wú)血清細(xì)胞凍存液，使細(xì)胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細(xì)胞懸液，注意凍存管做好標(biāo)識(shí)。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲(chǔ)存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細(xì)胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當(dāng)顯微鏡下細(xì)胞形態(tài)和生長(zhǎng)密度達(dá)到90%時(shí)，進(jìn)行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進(jìn)行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細(xì)胞有無(wú)超過(guò)80%的量，發(fā)生收縮變圓、細(xì)胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細(xì)胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過(guò)度。
（5）細(xì)胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細(xì)胞，吹打細(xì)胞使其均勻分散。
（7）吸棄細(xì)胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進(jìn)行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)確定換液或傳代時(shí)間。
（9）細(xì)胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

9號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框59抗體       C9orf59

環(huán)指蛋白88抗體  Anti-TRIM5α/RNF88       孕受體抗體  Anti-PR (progesterone receptor)

NSMCE1蛋白抗體       NSMCE1

磷酸化非受體型蛋白酪氨酸磷酸酶7抗體       phospho-PTPN7 (Ser93)

乙型肝炎X蛋白HBX抗體  Anti-X protein/HB-X (middle)       神經(jīng)元衍生孤兒受體1抗體  Anti-NOR1

磷酸化6磷酸果糖激酶抗體  Anti-phospho-PFKL (Ser775)       絲氨酸/蘇氨酸激酶25抗體  Anti-STK25/YSK1

DTD1蛋白抗體      DTD1/HARS2

RAS癌基因相關(guān)蛋白RAB17抗體  Anti-Rab17       線粒體促凋亡蛋白抗體  Anti-Smac/DIABLO人果糖二磷酸醛縮酶A(ALDOA)elisa分析檢測(cè)試劑盒       HumanALDOAELISAkit

1號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框220抗體       C1orf220

大鼠VGF神經(jīng)生長(zhǎng)因子誘導(dǎo)蛋白(VGF)elisa分析檢測(cè)試劑盒       VGF ELISA Kit

酵母細(xì)胞周期S早期步（SYNCHRONY）處理試劑盒       大鼠血管緊張素Ⅰ轉(zhuǎn)化酶(ACEⅠ)elisa檢測(cè)試劑盒

土壤α活性EPS-G7酶偶聯(lián)比色法定量檢測(cè)試劑盒       小鼠DNA(胞嘧啶-5)甲基轉(zhuǎn)移酶1(DNMT1)elisa分析檢測(cè)試劑盒

脂肪酶成熟因子1抗體       LMF1

LLC/GFP 小鼠肺癌細(xì)胞帶綠色熒光腦鈉素/利鈉肽抗體       BNP

白細(xì)胞介素36β抗體       IL36 beta