商品屬性：

產(chǎn)品名稱	B16小鼠黑色素瘤細胞	英文名稱	B16:B16
產(chǎn)品貨號	A01X1031	培養(yǎng)條件	氣相：空氣，95%；CO2，5%
生長特性	貼壁細胞	細胞形態(tài)	成纖維細胞樣
產(chǎn)品種屬	小鼠	凍存條件	凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
組織來源	黑素瘤	用途	僅供科研研究實驗

商品詳情：

生長特性 貼壁細胞

細胞形態(tài) 成纖維細胞樣

生長培養(yǎng)基 RPMI-1640＋10% FBS＋1% P/S

凍存條件

凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO

溫度：液氮

培養(yǎng)條件

氣相：空氣，95%；CO2，5%

溫度：37℃

推薦傳代比例 1:3-1:4

推薦換液頻率 2~3次/周

注意事項 B16系列細胞，使用DMEM培養(yǎng)時可能出現(xiàn)黑色su快速積累，細胞不增殖或死亡的情況，該細胞正常擴增凍存請使用RPMI-1640完培，若您需要進行分泌黑色su等后續(xù)相關實驗，可以在擴增凍存細胞后更換為DMEM培養(yǎng)來滿足實驗設計。

背景描述 B16細胞是一株小鼠黑su瘤細胞。

年齡（性別） 不詳

組織來源 黑su瘤

細胞類型 腫瘤細胞

腫瘤類型 黑色su瘤細胞

生物等級 1

保藏機構 JCRB; JCRB0202 KCB; KCB 93030YJ RCB; RCB1283 TKG; TKG 0144

細胞培養(yǎng)操作：

1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。 
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。 
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。

細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。
公司正在出售的產(chǎn)品：

清道夫受體B2抗體 Scavenger Receptor BII    染色質(zhì)修飾蛋白2B抗體 CHMP2B

HAUS8蛋白抗體 HAUS8    INTS5蛋白抗體 INTS5

孕受體單克隆抗體 Progesterone Receptor    著絲粒蛋白36抗體 MSL1v1/CENP36

復制因子A蛋白2 RPA32    鈣激活鉀通道蛋白β2抗體 KCNMB2

細胞核轉(zhuǎn)錄因子X盒結(jié)合蛋白抗體 XBP1    細胞色素P450 19抗體 Aromatase

TRM11蛋白抗體 TRM11   ZC3H12C蛋白抗體 ZC3H12C

ALDH3A2抗體 ALDH3A2    APC標記小鼠CD45.2單克隆抗體 mouse CD45.2/APC

卷曲螺旋結(jié)構域蛋白28A抗體 CCDC28A    連接粘附分子1抗體 JAM1

DHPR受體蛋白共沉淀分析試劑盒    葡萄糖氧化酶（GOD）測試盒

核酸蛋白結(jié)合凝膠遷移電泳分析（EMSA）試劑盒    小鼠二肽基肽酶4(DPP4)elisa檢測試劑盒

人表皮生長因子(EGF)elisa檢測試劑盒免費代測    12-羥基二十四烯酸（12-HETE）高效液相色譜法定量檢測試劑盒

小鼠抑制素A（INH-A）elisa檢測試劑盒    大鼠硫酸乙酰肝素蛋白多糖2(HSPG2)elisa檢測試劑盒

大鼠D-乳酸elisa檢測試劑盒    小鼠磷脂酰肌醇蛋白聚糖3(GPC-3)elisa檢測試劑盒

B16小鼠黑色素瘤細胞人Ⅲ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)elisa分析檢測試劑盒    通用型血液對氧磷酶1（PON1）有機磷酸酶活性比色法定量檢測試劑盒

半椎蛋白2抗體    HMCN2

ABI基因家族2抗體    ABI3