細胞培養(yǎng)操作：
1) 復蘇細胞：以下細胞培養(yǎng)凍存處理僅供參考，具體操作步驟以隨貨產(chǎn)品說明書為主。
將含有1mL細胞懸液的凍存管在37℃水浴中迅速搖晃解凍，離心管加入4mL培養(yǎng)基混合均勻。在800-1000RPM條件下離心4-5分鐘，棄去上清液，補加1-2mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液加入T25培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)，補加培養(yǎng)基至6ml。24-48h后換液。
2) 細胞傳代：如果細胞密度達 80%-90%，即可進行傳代培養(yǎng)。
a、棄去培養(yǎng)上清，用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
b、加1ml消化液（0.25%Trypsin）于培養(yǎng)瓶中，置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘，然后在顯微鏡下觀察細胞消化情況，若細胞大部分變圓并脫落，迅速拿回操作臺，輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加1ml0.1%大豆胰蛋白酶抑制劑終止消化。
c、輕輕打勻后吸出，在1000RPM條件下離心5分鐘，棄去上清液，加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
d、將細胞懸液按1：3到1:4比例分到新的含6ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
3) 細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時，可進行細胞凍存。下面 T25 瓶為例；
a、收集細胞及細胞培養(yǎng)液，裝入無菌離心管中，1000 rpm條件下離心4 min，棄去上清液，用PBS清洗一遍，棄盡PBS，進行細胞計數(shù)。
b、根據(jù)細胞數(shù)量加入無血清細胞凍存液，使細胞密度5×106~1×107/mL，輕輕混勻，每支凍存管凍存1mL細胞懸液，注意凍存管做好標識。
c、將凍存管放入-80℃冰箱，24 h后轉(zhuǎn)入液氮灌儲存。記錄凍存管位置以便下次拿取。
商品屬性：
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產(chǎn)品名稱
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ACHN人腎細胞腺癌細胞
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英文名稱
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ACHN:ACHN
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產(chǎn)品貨號
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A01X654
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培養(yǎng)條件
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氣相：空氣，95%；CO2，5%
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生長特性
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貼壁細胞
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細胞形態(tài)
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上皮細胞樣
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產(chǎn)品種屬
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人
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凍存條件
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凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
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組織來源
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腎細胞腺癌，胸水轉(zhuǎn)移灶
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用途
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僅供科研研究實驗
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商品詳情：
生長特性 貼壁細胞
細胞形態(tài) 上皮細胞樣
生長培養(yǎng)基 MEM（含NEAA）＋10% FBS＋1% P/S
凍存條件
凍存液：55% 基礎培養(yǎng)基+40%FBS+5%DMSO
溫度：液氮
培養(yǎng)條件
氣相：空氣，95%；CO2，5%
溫度：37℃
推薦傳代比例 1:2-1:4
推薦換液頻率 2~3次/周
背景描述 人干擾su可抑制ACHN細胞生長；ACHN細胞能用于人干擾su、干擾su誘導因子的抗腫瘤活性研究。
年齡（性別） 男；22歲
組織來源 腎細胞腺癌，胸水轉(zhuǎn)移灶
細胞類型 腫瘤細胞
腫瘤類型 腎癌細胞
生物等級 1
倍增時間 ~28-36 hours
致瘤性 Yes, in nude mice (Tumors developed within 21 days at 100% frequency (5/5) in nude mice inoculated subcutaneously with 1×10^7 cells).
保藏機構(gòu) ATCC; CRL-1611 ECACC; 88100508
公司正在出售的產(chǎn)品：
磷酸化Rho相關蛋白激酶2抗體 phospho-ROCK2 (Tyr256) 磷酸化二氫嘧啶酶樣2(CRMP2/DPYL2)抗體 Phospho-CRMP2 (Thr509)
B細胞轉(zhuǎn)錄激活因子抗體 BATF CD81重組兔單克隆抗體 TAPA1/CD81
線粒體二羧酸載體蛋白11抗體 SLC25A11 腺苷酸琥珀酸裂解酶抗體 Adenylosuccinate Lyase
癌基因ETS2抗體 ETS2 白細胞共抗原CD45抗體 CD45
軟骨基質(zhì)相關蛋白UCMA抗體 UCMA 神經(jīng)激肽U抗體 Neuromedin U
MCART2蛋白抗體 MCART2 NAD(P)H 苯醌脫氫酶 2抗體 NQO2
腫瘤轉(zhuǎn)移抑制蛋白1抗體 CD82 轉(zhuǎn)導素β1X連鎖蛋白抗體 TBL1X/SMAP55
谷氨酸受體紅藻氨酸離子2/谷氨酸受體6抗體 GRIK2 核仁磷酸蛋白3抗體 Nucleoplasmin 3
α酮戊二酸脫氫酶（α-KGDH）測試盒 小鼠丙氨酸轉(zhuǎn)氨酶（ALT）elisa檢測試劑盒
線粒體呼吸鏈復合物 Ⅲ 活性測試盒 20管/10樣 生化法 寡核苷酸探針非位素化學發(fā)光法DNA斑點雜交完全試劑盒
小鼠鐵蛋白（Ferritin）elisa檢測試劑盒 大鼠角蛋白18(KRT18)elisa檢測試劑盒
細胞磷酸二酯酶4（PDE4）活性酶連續(xù)循環(huán)光譜法定量檢測試劑盒 人神經(jīng)激肽A（OPG）elisa檢測試劑盒
犬脂肪酸結(jié)合蛋白elisa檢測試劑盒 細胞脊髓過氧化酶（MPO）活性高質(zhì)敏感比色法定量檢測試劑盒
ACHN人腎細胞腺癌細胞小鼠角化細胞因子(KAF)/雙調(diào)蛋白(AR)elisa檢測試劑盒 大鼠雌酮(E1)elisa分析檢測試劑盒
角蛋白相關蛋白20.4抗體 KAP20.4
卷曲螺旋結(jié)構(gòu)域蛋白127抗體 CCDC127
細胞傳代培養(yǎng)操作步驟：
（1）當顯微鏡下細胞形態(tài)和生長密度達到90%時，進行傳代。
（2）吸棄培養(yǎng)液。添加PBS清洗1~2次，搖勻后棄掉。
（3）加入覆蓋瓶底量的胰蛋白酶且含有EDTA。
（4）培養(yǎng)瓶放入37℃培養(yǎng)箱進行消化，3min左右拿出，用顯微鏡觀察細胞有無超過80%的量，發(fā)生收縮變圓、細胞間隙變大。輕輕拍打培養(yǎng)瓶使剩余細胞 脫落，加入2倍量的胰蛋白酶中止消化，并吹打均勻，避免消化過度。
（5）細胞懸液吸至離心管內(nèi)，1000rpm/min離心3~5min。
（6）吸棄上清，加入培養(yǎng)液重懸細胞，吹打細胞使其均勻分散。
（7）吸棄細胞懸液，選擇適合的密度接種到新培養(yǎng)瓶中，補充培養(yǎng)液并搖勻，放置37℃的CO2培養(yǎng)箱進行培養(yǎng)。
（8）根據(jù)細胞生長狀態(tài)確定換液或傳代時間。
（9）細胞凍存。
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