培養(yǎng)步驟:
	對于貼壁細胞,傳代可參考以下方法:
	1. 棄去培養(yǎng)上清,用不含鈣、鎂離子的PBS潤洗細胞1-2次。
	2. 加2ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培養(yǎng)瓶中,置于37℃培養(yǎng)箱中消化1-2分鐘,然后在顯微鏡下觀察Ⅱ型肺泡上皮細胞|細胞消化情況,若細胞大部分變圓并脫落,迅速拿回操作臺,輕敲幾下培養(yǎng)瓶后加少量培養(yǎng)基終止消化。
	3. 按6-8ml/瓶補加培養(yǎng)基,輕輕打勻后吸出,在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻。
	4. 將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
	我司常期代理ATCC Acris  abcam  cst  Biorbyt  santa  Novus  sigma  lifespan  NEB  roche  ABI  R&D millipore   BD  Qiagen Cayman  Jackson Life  GeneTex   Bio-Rad DSHB  tocris   peprotech 等品牌;部分產(chǎn)品現(xiàn)貨,超低比價,產(chǎn)品名稱貨期短,價格優(yōu),售后齊全。本公司僅用于科研實驗。
	
		
			
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						產(chǎn)品名稱
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						規(guī)格
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						貨號
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						鞏膜上皮細胞
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						5×105
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						FS-X019922
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	產(chǎn)品名稱:鞏膜上皮細胞
	產(chǎn)品規(guī)格:5×105
	貨號:BH-X019922
	產(chǎn)品類型:原代細胞
	單位:T25/瓶
	提供細胞鑒定:提供**熒光鑒定報告
	保存培養(yǎng)溫度(℃):37
	運輸溫度(℃):常溫
	細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
	主要功能:
	(1)血管平滑肌細胞的再生能力是原發(fā)血管病變的重要因素。
	(2)表達鈣通道及ICAM-1和VCAM-1,參與血管壁的炎癥反應(yīng)。
	(3)與血管的進展和穩(wěn)定有關(guān)。
	 生理變化:
	(1)主動脈硬化。
	(2)主動脈瘤
	(3)主動脈鈣化。
	基本特性:
	(1)組織來源于正常大鼠大動脈組織。
	(2)鑒定:肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色。
	(3)原代細胞培養(yǎng)末期液氮凍存。
	(4)每凍存管細胞數(shù):>5×105 cells/1ml。
	(5)肌動蛋白,alpha-SMA和Desmin熒光染色驗證。
	(6)不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原體、酵母。
	
		 
	
	
		
	
 
	對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
	方法一:收集細胞,1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
	方法二:可選擇半數(shù)換液方式,棄去半數(shù)培養(yǎng)基后,將剩余細胞懸起,將細胞懸液按1:2到1:3的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
	
細胞培養(yǎng)操作規(guī)程:
	 
	一.培養(yǎng)基及培養(yǎng)凍存條件準備:
	1)準備RPMI-1640培養(yǎng)基(RPMI-1640:GIBCO,貨號21875-091),90%;胎牛血清,10%。
	2)培養(yǎng)條件: 氣相:空氣,95%;二氧化碳,5%。 溫度:37℃,培養(yǎng)箱濕度為70%-80%。
	3)凍存液:90%血清,10%DMSO,現(xiàn)用現(xiàn)配,液氮儲存。
	二.細胞處理:
	1)復(fù)蘇細胞:將含有1mL細胞懸液的凍存管迅速放入37℃水浴中(水面要低于凍存管蓋部)搖晃解凍,移入事先準備好的含有4mL培養(yǎng)基的15ml離心管中混合均勻。在1000RPM條件下離心4分鐘,棄去上清液,加入1mL培養(yǎng)基后吹勻。然后將所有細胞懸液移入含有5ml培養(yǎng)基的培養(yǎng)瓶中培養(yǎng)過夜。天換液并檢查細胞密度。
	2)細胞傳代:如果細胞密度達80%-90%,即可進行傳代培養(yǎng)。
	對于懸浮細胞,傳代可參考以下方法:
	方法一:收集細胞,1000RPM,常溫條件下離心5分鐘,棄去上清液,補加1-2mL培養(yǎng)液后吹勻,將細胞懸液按1:2到1:5的比例分到新的含8ml培養(yǎng)基的新皿中或者瓶中。
	操作要點:
	1)將培養(yǎng)基在37℃水浴鍋預(yù)熱;準備一個15mL無菌的離心管,加入8mL預(yù)熱培養(yǎng)基。
	2)將凍存細胞從液氮罐中取出,快速放入37℃水浴鍋中復(fù)溫(可準備一潔凈的燒杯,裝滿37℃的水,細胞凍存管取出后迅速放入燒杯內(nèi),再逐步轉(zhuǎn)移到水浴鍋中)。輕輕晃動凍存管,使細胞能在1~2min內(nèi)完全解凍,使細胞能盡快通過*易受損的溫度段(-5~0℃)。注意凍存管管口不能沒入水中,BRL(大鼠肝細胞)避免引起污染。
	3)用75%酒精擦拭凍存管后再置于超凈臺內(nèi),將管內(nèi)細胞轉(zhuǎn)移至準備好的離心管內(nèi),輕輕吹打液體,使細胞均勻分散,降低DMSO濃度,吹打時避免產(chǎn)生氣泡。用新鮮培養(yǎng)基洗管壁2次,均轉(zhuǎn)移至離心管內(nèi)。
	4)800rpm離心5min,棄上清,加入新鮮的培養(yǎng)基,吹打制成細胞懸液。
	5)將細胞懸液轉(zhuǎn)移至T25細胞瓶內(nèi),補加適量的培養(yǎng)基,輕輕晃動細胞瓶使細胞分布均勻,放入溫箱內(nèi)培養(yǎng)。
	6)觀察細胞貼壁生長情況,換新鮮培養(yǎng)基以去除死細胞。繼續(xù)培養(yǎng),待細胞長至80~90%匯合時正常傳代。一般剛復(fù)蘇的細胞需經(jīng)過2~3次傳代,細胞活力恢復(fù)后才能進行后續(xù)的實驗。
	Potato Dextrose Agar    
	慶大霉素(50mg/ml)
	Gentamicin    推薦濃度:0.5-50ug/ml
	保存15-30°15750-060
	假單胞顯色培養(yǎng)基    用于假單胞的分離及鑒定1000ml
	Kligler 鐵瓊脂 (CM0033)    Oxoid 
	胰蛋白示瓊脂基礎(chǔ) (CM0233)    Oxoid 
	Dermasel 瓊脂 (CM0539)    Oxoid 
	營養(yǎng)肉湯(NB)    1000(g)
	鞏膜上皮細胞花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)elisa檢測試劑盒英文名稱:ALOX-5 ELISA Kit,英文縮寫:ALOX-5,產(chǎn)品別名:花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)ELISA檢測試劑盒,花生四烯酸5脂加氧酶(ALOX-5)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
	骨成型蛋白4(BMP-4)elisa檢測試劑盒英文名稱:BMP-4 ELISA Kit,英文縮寫:BMP-4,產(chǎn)品別名:骨成型蛋白4(BMP-4)ELISA檢測試劑盒,骨成型蛋白4(BMP-4)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
	過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)elisa檢測試劑盒英文名稱:PPARGC1 ELISA Kit,英文縮寫:PPARGC1,產(chǎn)品別名:過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)ELISA檢測試劑盒,過氧化物酶體增殖激活物受體γ輔激活因子1α(PPARGC1)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
	高爾基蛋白73(GP-73)elisa檢測試劑盒英文名稱:GP-73 ELISA Kit,英文縮寫:GP-73,產(chǎn)品別名:高爾基蛋白73(GP-73)ELISA檢測試劑盒,高爾基蛋白73(GP-73)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
	鈣調(diào)素(CAM)elisa檢測試劑盒英文名稱:CAM ELISA Kit,英文縮寫:CAM,產(chǎn)品別名:鈣調(diào)素(CAM)ELISA檢測試劑盒,鈣調(diào)素(CAM)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
	肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)elisa檢測試劑盒英文名稱:SP-A ELISA Kit,英文縮寫:SP-A,產(chǎn)品別名:肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)ELISA檢測試劑盒,肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白A(SP-A)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
	多巴胺脫羧酶(DDC)elisa檢測試劑盒英文名稱:DDC ELISA Kit,英文縮寫:DDC,產(chǎn)品別名:多巴胺脫羧酶(DDC)ELISA檢測試劑盒,多巴胺脫羧酶(DDC)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
	低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)elisa檢測試劑盒英文名稱:LRP-4 ELISA Kit,英文縮寫:LRP-4,產(chǎn)品別名:低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)ELISA檢測試劑盒,低密度脂蛋白受體相關(guān)蛋白4(LRP-4)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
	膽酸(Cholic acid)elisa檢測試劑盒英文名稱:Cholic acid ELISA Kit,英文縮寫:Cholic acid,產(chǎn)品別名:膽酸(Cholic acid)ELISA檢測試劑盒,膽酸(Cholic acid)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
	促生長釋放(GHRH)elisa檢測試劑盒英文名稱:GHRH ELISA Kit,英文縮寫:GHRH,產(chǎn)品別名:促生長釋放(GHRH)ELISA檢測試劑盒,促生長釋放(GHRH)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
	超敏熱休克蛋白60(HSP-60)elisa檢測試劑盒英文名稱:HSP-60 ELISA Kit,英文縮寫:HSP-60,產(chǎn)品別名:超敏熱休克蛋白60(HSP-60)ELISA檢測試劑盒,超敏熱休克蛋白60(HSP-60)檢測試劑盒產(chǎn)品保存:2~8℃、有效期6個月。
   
    
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