操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設(shè)3個平行孔；設(shè)兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設(shè)一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內(nèi)反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內(nèi)液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內(nèi)，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
服務：所有的檢測試劑盒均免費代測，您只需要將您準備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門收取樣本！全程檢測試劑盒實驗技術(shù)指導，免費代做實驗。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務！
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產(chǎn)品名稱
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緊密連接蛋白5試劑盒
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貨號
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96T/48T
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貨號
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FS-016230
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產(chǎn)品名稱：緊密連接蛋白5試劑盒
貨號：FS-016230
規(guī)格：96T/48T
保存；2-8℃。
檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關(guān)液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。
試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關(guān)，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內(nèi)的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內(nèi)源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內(nèi)用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
注意事項:
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結(jié)晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結(jié)果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內(nèi)，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 如標本中待測物質(zhì)含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結(jié)果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準
phospho-APC1 (Ser688) 英文名稱：磷酸化細胞周期末期促進復合蛋白APC1抗體 規(guī)格： 0.1ml
phospho-ADRB2 (Ser261) 英文名稱：磷酸化腎上素能受體β2抗體 規(guī)格： 0.1ml
Diazepam Binding Inhibitor 英文名稱：乙酰輔酶A結(jié)合蛋白抗體 規(guī)格： 0.2ml
Arg3.1 英文名稱：即刻早期基因ARC抗體 規(guī)格： 0.1ml
BRCA1 英文名稱：乳癌易感基因1抗體 規(guī)格： 0.1ml
beta Defensin 1 英文名稱：防御素β1/Defensin β1抗體 規(guī)格： 0.1ml
Bcl-2 英文名稱：Bcl-2抗體 規(guī)格： 0.1ml
BIN3 英文名稱：細胞骨架銜接蛋白BIN3抗體 規(guī)格： 0.2ml
BOLA1 英文名稱：BOLA1蛋白抗體 規(guī)格： 0.2ml
BIG1 英文名稱：ARF鳥苷酸交換因子BIG1抗體 規(guī)格： 0.2ml
C9orf57 英文名稱：9號染色體開放閱讀框57抗體 規(guī)格： 0.2ml
C1orf163 英文名稱：1號染色體開放閱讀框163抗體 規(guī)格： 0.2ml
緊密連接蛋白5試劑盒通用試劑 六亞甲基二異氰酸酯 Hexamethylene diisocyanate,≥99.0% 822-06-0 25ML
表面活性劑 二硫化四乙基秋蘭姆 Tetraethylthiuram disulfide,≥97.0% 97-77-8 25G
表面活性劑 烯化硫 Trimethylene sulfide 287-27-4 5G
表面活性劑 4,4＇-二吡啶基二硫 4,4′-Dipyridyl disulfide,98% 2645-22-9 1G
表面活性劑 二烯丙基二硫 Diallyl disulfide,≥80% 2179-57-9 5G
表面活性劑 二乙氨基三氟化硫 (Diethylamino)sulfur trifluoride,≥90% 38078-09-0 5ML
通用試劑 雙酚A丙三醇雙甲基... Bisphenol A glycerolate dimethacrylate 1565-94-2 25ML
通用試劑 2-壬炔酸甲酯 Methyl 2-nonynoate,99.0% 111-80-8 25G
表面活性劑 高純硫 Sulfur,≥99.5% 7704-34-9 25G
表面活性劑 氯化硫 Disulfur dichloride,98% 10025-67-9 500ML
通用試劑 巴豆酸甲酯 Methyl crotonate,98% 623-43-8 25ML
通用試劑 甲酸正已酯 Hexyl formate,≥97% 629-33-4 50G
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