操作流程：
（1）待測樣品孔中每孔加入待測樣品100μl，每種樣品設3個平行孔；設兩個陰性對照孔，每孔加未處理組的細胞裂解液100μl；另設一個空白對照孔，加入純細胞裂解液100μl。
（2）酶標板置4℃，包被過夜。
（3）洗板：吸干孔內反應液，用洗滌液過洗一遍（將洗滌液注滿板孔后，即甩去），之后將洗滌液注滿板孔，浸泡1-2分鐘，間歇搖動。甩去孔內液體后在吸水紙上拍干。重復洗滌3-4次。
（4）陰性對照孔每孔加入PBS 50μl，樣品孔及空白孔每孔加入1:500稀釋的兔抗人AIF抗體工作液50μl。
（5）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。
（6）洗板，同（4）。
（7）每孔加1:5000稀釋的HRP-標記的山羊抗兔抗體工作液 100μl。
（8）酶標板置37℃培養(yǎng)箱的濕盒內，孵育60min。
（9）洗板，同（4）。
（10）每孔加TMB顯色液 100μl，輕輕混勻10s，置37℃暗處反應15-20min。
（11）每孔加100μl 2mol/L H2SO4終止反應。
（12）分別測450nm 吸光值W1和630nm吸光值W2，終測得的OD值為兩者之差（W1-W2），以減少由容器上的劃痕或指印等造成的光干擾。
（13）數(shù)據(jù)處理：在得出標本（S）和陰性對照（N）的 OD值后，計算S/N值。S/N≥2.1為陽性判定標準。
服務：所有的檢測試劑盒均免費代測，您只需要將您準備好的樣本郵寄到我司即可！本地也可以上門收取樣本！全程檢測試劑盒實驗技術指導，免費代做實驗。本公司產(chǎn)品僅用于科研實驗。老客戶可享受優(yōu)惠折扣服務！
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產(chǎn)品名稱
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骨橋素試劑盒
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貨號
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96T/48T
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貨號
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FS-016160
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產(chǎn)品名稱：骨橋素試劑盒
貨號：FS-016160
規(guī)格：96T/48T
保存；2-8℃。
檢測目的：用于檢測血漿，血清及相關液體等樣本。例如灌洗液、腦脊液、血清、血漿、尿液、胸腹水、細胞培養(yǎng)上清、組織勻漿等標本.
檢測種屬：大鼠、小鼠、豚鼠、倉鼠、裸鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、馬鈴薯、鹿、羊、雞、鴨、魚、人、等動植物。
實驗流程:
1. 實驗前標準品、試劑及樣本的準備；
2. 加樣（標準品及樣本）100μL，37°C孵育1小時；
3. 吸棄，加檢測溶液A100μL，37°C孵育1小時；
4. 洗板3次；
5. 加檢測溶液B100μL，37°C孵育30分鐘；
6. 洗板5次；
7. 加TMB底物90μL，37°C孵育10-20分鐘；
8. 加終止液50μL，立即450nm讀數(shù)。
試劑和樣本的控制方法：
一、試劑
1.試劑的選擇：國家明確要求要采用批批檢定的形式對ELISA試劑嚴格把關，我司嚴格按照國家標準進行生產(chǎn)，已獲得國家承認的“三證”，每一個產(chǎn)品都有對應的生產(chǎn)批號，只要客戶提前下單，我們就能為您提供新批次的產(chǎn)品，不必擔心會有過期的試劑。我司的試劑，值得您選擇。
2.試劑的準備：先將試劑盒先從冰箱中拿出來，在室溫下放置20-30 min后，再進行測定，使試劑盒在使用前與室溫平衡，這樣做的目的能使反應微孔內的溫度較快地達到所需的溫度，以滿足后面的測定需求。
二、樣本
1.內源性干擾因素：包括類風濕因子、補體、高濃度的非特異球蛋白、異嗜性抗體、某些自身抗體等；
類風濕因子的控制方法：
①用F(ab)2替代完整的IgG；
②標本用聯(lián)有熱變性IgG的固相吸附劑處理；
③檢測抗原時，可用2-巰基乙醇加入到標本稀釋液中使RF降解。
檢測程序：
1. 加樣：每孔各加入標準品或待測樣品 100ul ，將反應板充分混勻后置 37 ℃ 120 分鐘。
2. 洗板：用洗滌液將反應板充分洗滌 4-6 次，向濾紙上印干。
3. 每孔中加入抗體工作液10 0ul 。將反應板充分混勻后置 37 ℃ 6 0 分鐘。
4. 洗板：同前。
5. 每孔加酶標抗體工作液100ul 。將反應板置 37 ℃ 3 0 分鐘。
6. 洗板：同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ，置 37 ℃ 暗處反應15 分鐘。
8. 每孔加入100ul 終止液混勻。
9. 30分鐘內用酶標儀在 45 0 nm 處測 吸光值。
注意事項:
1．試劑盒從冷藏環(huán)境中取出應在室溫平衡15-30分鐘后方可使用，酶標包被板開封后如未用完，板條應裝入密封袋中保存。
2．濃洗滌液可能會有結晶析出，稀釋時可在水浴中加溫助溶，洗滌時不影響結果。
3．各步加樣均應使用加樣器，并經(jīng)常校對其準確性，以避免試驗誤差。一次加樣時間zui好控制在5分鐘內，如標本數(shù)量多，推薦使用排槍加樣。
4． 如標本中待測物質含量過高（樣本OD值大于標準品孔*孔的OD值），請先將樣本稀釋一定倍數(shù)（n倍）后再測定，計算時請zui后乘以稀釋倍數(shù)（×5×n）。
5． 封板膜只限一次性使用，以避免交叉污染。
6．本試劑不同批號組分不得混用。顯色劑B請避光保存。
7．嚴格按照說明書的操作進行，試驗結果判定必須以酶標儀讀數(shù)為準.
8．所有樣品，洗滌液和各種廢棄物都應按傳染物處理。
9. 如與英文說明書有異，以英文說明書為準
PLGF (Placenta growth factor fragment)(human)人胎盤生長因子（多肽抗原） 0.5mg
p- Beta catenin(p-beta Catenin(phosphor-Y142))磷酸化β-連環(huán)蛋白抗原 0.5mg
CDK7/Cyclin H/MAT1周期素依賴性激酶7抗原 0.5mg
DRD4 receptor peptide多巴胺受體-D4抗原 0.5mg
FGF5 peptide纖維母細胞生長因子5抗原 0.5mg
HHV8/ORF K2(Human herpesvirus 8 type P)人類皰疹病毒8抗原 0.5mg
Integrin AlphaE2/CD103整合素αE2抗原 0.2ml
MRP2 (multidrug resistance-associated protein2)多藥耐藥相關蛋白2 0.5mg
PAK7/PAK5/MBT激活激酶PAK7/PAK5抗原 0.5mg
Shadow/SPRN(Shadow of prion protein precursor)新朊蛋白/朊蛋白相關蛋白/沙杜（Shadoo）蛋白抗原 0.5mg
TRAF3/CD40bp (CD40 binding protein)腫瘤壞死因子受體相關蛋白3抗原 0.5mg
ChRM2 (Muscarinic Acetylcholine receptor M2)毒蕈堿型乙酰膽堿受體M2（抗原） 0.5mg
骨橋素試劑盒通用試劑 2-甲胺基-4-甲氧基-... 2-Methoxy-4-methyl-6-(methylamino)-1,3... 5248-39-5 5G
通用試劑 5H-5-甲基-6,7-二氫... 5H-5-Methyl-6,7-dihydrocyclopentapyraz... 23747-48-0 1G
通用試劑 1,4-二氯酞嗪 1,4-Dichlorophthalazine, ≥95.0% 1041953 1G
通用試劑 2-氨基-4-甲氧基-6-... 2-Amino-4-methoxy-6-methyl-1,3,5-triaz... 1668-54-8 5G
通用試劑 2,3,5,6-四甲基吡嗪 2,3,5,6-Tetramethylpyrazine 1124-11-4 25G
通用試劑 2-乙酰基吡嗪 2-Acetylpyrazine,≥99.0 % 22047-25-2 250G
通用試劑 2-乙?；?3-甲基吡嗪 2-Acetyl-3-methylpyrazine 23787-80-6 5G
通用試劑 1-乙酰基-4-(4-羥基... 1-Acetyl-4-(4-hydroxyphenyl)piperazine... 67914-60-7 25G
通用試劑 鹽酸甲苯噻嗪 Xylazine hydrochloride, ≥98.0% 23076-35-9 1G
通用試劑 1-(4,4'-二氟苯甲基... 1-Bis(4-fluorophenyl)methyl piperazine... 27469-60-9 1G
通用試劑 氨基吡嗪 Aminopyrazine,≥99.0% 5049-61-6 5G
通用試劑 1-芐基哌嗪 1-Benzylpiperazine 2759-28-6 25G
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