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技術(shù)文章

細(xì)胞活潑方法
  1.保證所有實(shí)驗(yàn)室材料都無菌

    穿插污染是細(xì)胞培育的大敵。即使是輕微的污染，也或許毀了幾個(gè)星期的效果。因培育箱內(nèi)溫暖濕潤(rùn)，真jun極易成長(zhǎng)，因而有必要注意定時(shí)清潔。此外，在將培育瓶、移液管及其他的相關(guān)物品放入超凈臺(tái)之前，運(yùn)用酒精擦拭干凈，以防止污染。
 
    2.選擇上佳的培育基開發(fā)策略

    在細(xì)胞培育進(jìn)程中，培育基是操控產(chǎn)品質(zhì)量、產(chǎn)量和本錢的重要要素。有必要針對(duì)每種培育物來定制培育基，以優(yōu)化實(shí)驗(yàn)成果。在決定以哪種方法來開發(fā)您的培育基時(shí)，您需要考慮時(shí)間和本錢等要素。
 
    3.在傳代之前不要讓細(xì)胞徹底集合

    集合度是指貼壁細(xì)胞占有培育瓶表面積的份額。徹底集合意味著100%的表面都被貼壁細(xì)胞覆蓋。一定要防止這種狀況，由于它意味著細(xì)胞不能繼續(xù)成長(zhǎng)。不過，燃眉之急是運(yùn)用活潑成長(zhǎng)的細(xì)胞。
 
    4.運(yùn)用對(duì)數(shù)成長(zhǎng)期的細(xì)胞

    細(xì)胞培育進(jìn)程共有3個(gè)階段：停滯期、對(duì)數(shù)期和平臺(tái)期，分別代表了低細(xì)胞成長(zhǎng)、高細(xì)胞成長(zhǎng)和無細(xì)胞成長(zhǎng)。有生機(jī)的細(xì)胞是健康的，快速分裂的，在對(duì)數(shù)期以70-80%的集合度存在。
 
    5.在運(yùn)用前正確解凍細(xì)胞

    盡管解凍看起來是個(gè)簡(jiǎn)略的步驟，但有必要操作得當(dāng)，防止損傷細(xì)胞。長(zhǎng)期暴露在高溫條件下會(huì)使細(xì)胞無法鋪板。因而，凍存管應(yīng)當(dāng)在37°C水浴中放置2分鐘，然后用條件培育基稀釋，以防止DMSO造成直接損傷。
 
    6.小心處理您的培育物

    細(xì)胞培育的脆弱性怎樣強(qiáng)調(diào)也不為過。劇烈搖晃，或接連的溫度波動(dòng)或許會(huì)對(duì)成長(zhǎng)發(fā)生不利的影響。保證培育箱是水平的，溫度均一，且遠(yuǎn)離電動(dòng)儀器。此外，盡量防止一次處理多個(gè)細(xì)胞系，由于它或許會(huì)影響細(xì)胞的基因型和表型。