ELISA實(shí)驗(yàn)中常見(jiàn)的異常類(lèi)型可分為以下幾類(lèi)，結(jié)合顯色特征、數(shù)據(jù)偏差及系統(tǒng)性問(wèn)題進(jìn)行解析：

一、顯色異常

1、?白板現(xiàn)象?

所有孔均無(wú)顯色，可能由試劑過(guò)期、錯(cuò)加/漏加底物或酶標(biāo)污染導(dǎo)致。

2、?顯色弱/靈敏度低?

整板顏色過(guò)淡，原因包括試劑未平衡至室溫、孵育時(shí)間不足或樣本含防腐劑（如疊氮鈉）。

3、?高背景/非特異性顯色?

整板均勻顯色或陰性對(duì)照OD值過(guò)高，多因封閉不充分、洗滌不徹底或抗體濃度過(guò)高。

二、標(biāo)準(zhǔn)曲線異常

1、?線性差（R2<0.99）?

標(biāo)準(zhǔn)品稀釋錯(cuò)誤、孔間污染或孵育溫度不均可能導(dǎo)致線性偏離。

2、跳孔或變異系數(shù)大（CV%>20%）?

加樣誤差、酶標(biāo)板邊緣效應(yīng)或試劑穩(wěn)定性不足是常見(jiàn)原因。

三、樣本檢測(cè)異常

1、?假陽(yáng)性/假陰性?

類(lèi)風(fēng)濕因子（RF）、嗜異性抗體或補(bǔ)體干擾可能導(dǎo)致假陽(yáng)性；樣本反復(fù)凍融或孵育條件不當(dāng)易致假陰性。

2、?樣本OD值超出范圍?

需稀釋后重測(cè)，可能因樣本濃度過(guò)高或標(biāo)準(zhǔn)曲線擬合不當(dāng)。

四、系統(tǒng)性問(wèn)題

1、?試劑失效?

酶標(biāo)記物或底物避光保存不當(dāng)會(huì)導(dǎo)致信號(hào)衰減。

2、?設(shè)備參數(shù)錯(cuò)誤?

酶標(biāo)儀濾光片不匹配或參數(shù)設(shè)置錯(cuò)誤影響OD值準(zhǔn)確性。

以上異常需結(jié)合具體實(shí)驗(yàn)流程排查，優(yōu)化操作細(xì)節(jié)可顯著提升數(shù)據(jù)可靠性。