酶標板類型:
一、按顏色選擇:
?透明板:適用于定量和定性的固相免 疫檢測和結合檢測;
?白色板:適用于自發(fā)光、化學發(fā)光;
?黑色板:適用于熒光免 疫檢測和結合檢測。
二、按底部形狀分類:
?平底:折射率低,適于在酶標儀檢測;
?U底:折射率較高,方便加樣、吸樣、混勻等操作,可以不用放在酶標儀上,直接通過目測觀察顏色變化情況,從而判定有無相應的免 疫反應。
?BBSP酶標板,是一種配在酶標儀上做酶聯(lián)免 疫實驗用的板子,常用的為96孔,主要是為了配合酶標儀所設計。
三、按結合力選擇:
1、低結合力板:經表面疏水鍵被動與蛋白結合,適合作為分子量>20kD的大分子蛋白的固相載體,其蛋白結合能力為200~300ng IgG/cm2。由于該類酶標板所具有的僅與大分子結合的特性,適用于作為未純化抗體或抗原的固相載體,可降低潛在的非特異性 交叉反應。該類板可以惰性蛋白或非離子去污劑作為封閉液。
2、高結合力板:表面經處理后,其蛋白結合能力大大增強,可達300~400ng IgG/cm2,主要結合的蛋白分子量>10kD。使用該類酶標板可提高敏感性,并可相對減少包被蛋白的濃度和用量,不足之處為較易產生非特異性反應。抗原或抗體包被后,以非離子去污劑無法有效地封閉未結合蛋白的部位,需使用蛋白作為封閉劑。
酶標板在下面情況下會失效:
1.通常商品化的酶標板要求密閉4℃保存,長時間暴露或未密閉保存,要么失效,要么結果為非可靠數(shù)據;如果是自己包的板,可能效期更短,保存條件要求更高,至于顯色劑,正常條件下1天內不會失效的。
2.第三板是否完全按照前兩板加所有試劑,如果缺失其中某一步驟,結果也會無色。