蛋白質(zhì)樣品制備:
原始樣品可為細(xì)胞、組織、培養(yǎng)上清、免 疫沉淀或親和純化的蛋白,以下為定性檢測(cè)目的蛋白時(shí)細(xì)胞樣品的處理方法,其余的樣品制備方法參閱相關(guān)文獻(xiàn)。
1.培養(yǎng)細(xì)胞或藥 物處理。
2.棄培養(yǎng)基,用1X PBS漂洗細(xì)胞2次,去盡殘留培養(yǎng)基。
3.加入1X SDS樣品緩沖液,刮落細(xì)胞,轉(zhuǎn)移到Ep管。注意:冰上操作。
4.超聲10~15秒剪切DNA以減低樣品粘性。
5.煮沸樣品5min。
6.離心12000g,5min,取上清。