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分光光度法簡(jiǎn)介
分光光度法簡(jiǎn)介
分光光度法是基于不同分子結(jié)構(gòu)的物質(zhì)對(duì)電磁輻射的選擇性吸收而建立起來的方法,屬于分子吸收光譜分析。當(dāng)光通過溶液時(shí),被測(cè)物質(zhì)分子吸收某一波長(zhǎng)的單色光,被吸收的光強(qiáng)度與光通過的距離成正比。在波長(zhǎng)、溶液和溫度確定的情況下,測(cè)得的摩爾消光系數(shù)是由給定物質(zhì)的特性決定的。
實(shí)際上,分光光度法測(cè)得的摩爾消光系數(shù)也和使用的儀器有關(guān)。因此,在定量分析中,通常并不用已知物質(zhì)的摩爾消光系數(shù),而是用一個(gè)或多個(gè)已知濃度的待測(cè)物質(zhì)作一條校準(zhǔn)或工作曲線。摩爾消光系數(shù)的意義是即每升含有一摩爾核酸磷的溶液在260 nm波長(zhǎng)處的消光值(即光密度,或稱為光吸收)。其大小反映吸光物質(zhì)對(duì)光的吸收能力,也反映了用吸光度法測(cè)定該吸光物質(zhì)的靈敏度。
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