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第2年
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凍存細胞其操作步驟 原代分離細胞培養(yǎng)是指從供體內取出組織后，經機械以及消化分離成單個細胞或單一型細胞群，使之在體外模擬人體生理環(huán)境，在無菌、適當溫度和一定的營養(yǎng)條件下，生存、生長和繁殖。原代培養(yǎng)細胞常有不同的細胞成分，生長緩慢，但是更能代表所來源的組織細胞類型和表達組織的特異性特征。利用原代細胞培養(yǎng)做各種實驗，如藥wu測試、細胞分化及病毒學方面的試驗效果很好。凍存細胞其操作步驟如下：1、選對數增生期細胞(證明無支原體發(fā)布時間：2022-10-11 15:40 點擊次數：306 次
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血清的主要成分及存在的問題 血清的主要成分:血清是由血漿去除纖維蛋白而形成的一種很復雜的混合物，其組成成份雖大部分已知，但還有一部分尚不清楚，且血清組成及含量常隨供血動物的性別、年齡、生理條件和營養(yǎng)條件不同而異。血清中含有各種血漿蛋白、多肽、脂肪、碳水化合物、生長因子、激su、無機物等，這些物質對促進細胞生長或抑制生長活性是達到生理平衡的。對血清的成分和作用的研究雖有很大進展，但仍存在一些問題。主要是：1、血清的成份可能有幾發(fā)布時間：2022-09-28 13:16 點擊次數：261 次
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提高 RT-PCR 反應的靈敏度與特異性方法 提高RT-PCR反應的靈敏度與特異性方法：①確定模板RNA 完整性好，無DNA 污染。② RNA模板中不應含有擴增反應抑制劑。③ 使用適量的模板RNA ，模板量太多會降低特異性，太少會導致擴增不出條帶或條帶太弱。④ 若模板中有二級結構，可通過提高逆轉錄反應溫度來提高擴增效果。發(fā)布時間：2022-09-16 16:58 點擊次數：394 次
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ELISA 實驗中血漿的采集處理 ELISA實驗中血漿的采集處理:1、真空采血針采集2ml新鮮血液，加入無菌試管中；2、按1:9加入抗凝劑（EDTA、草酸鈉、肝素、枸櫞酸鈉），30分鐘內于冰上分離血漿以減少血小板的污染；（也可以直接用抗凝管采集）；3、將采集血液用離心機4℃，2500rpm離心5min，，將離心好的勻漿留上清，棄下面沉淀。4、取上清。分裝凍存?zhèn)溆茫?-8℃下，可放置保存24-48小時；-20℃下，可放置保存1個月；發(fā)布時間：2022-09-02 11:39 點擊次數：916 次
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質粒的提取 (Tiangen質粒提取試劑盒)過程 質粒的提取(Tiangen質粒提取試劑盒)過程：1、挑菌：選取培養(yǎng)板中大小中等的單個菌落，消du牙簽接種到10ml搖菌管中，其中含有卡那-霉素的LB約5ml，37°C，220rpm恒溫搖床中震蕩培養(yǎng)過夜。 2、取上述2.0ml培養(yǎng)液，于常溫下12000rpm離心1分鐘，棄上清，干燥沉淀。3、加入250ul溶液P1(配有去RNA酶，4°C保存)，渦旋振蕩，完全懸浮xi菌，不能留有沉淀，否則會影響裂發(fā)布時間：2022-08-24 13:15 點擊次數：295 次
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操作對ELISA法手工測定的影響小結 操作對ELISA法手工測定的影響小結：1、檢測前先將試劑盒從冰箱取出置室溫平衡20min后使用，試劑用完及時放回冰箱冷藏，以免造成試驗結果假性降低。2、加樣時注意勿觸及包被板底部，以免擦傷包被物使抗體（抗原）脫落而影響實驗結果的準確性。3、洗滌不充分，會使結果假性增高，過分洗滌呈假陰性。4、比色時應保持包被孔底部無異物、無水汽，特別是冬季板從37℃水浴箱取出時，底部留有水汽，應將板底擦干后進行比色發(fā)布時間：2022-08-19 13:54 點擊次數：269 次
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抗體的鑒定 抗體的鑒定：1、抗體的效價鑒定：不管是用于診斷還是用于zhi療,制備抗體的目的都是要求較高效價。不同的抗原制備的抗體,要求的效價不一。鑒定效價的方法很多,包括有試管凝集反應,瓊脂擴散試驗,酶聯(lián)免yi吸附試驗等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價的方法,以資比較。如制備抗抗體的效價,一般就采用瓊脂擴散試驗來鑒定。2、抗體的特異性鑒定：抗體的特異性是指與相應抗原或近似抗原物質的識別能力。抗體發(fā)布時間：2022-08-17 10:43 點擊次數：219 次
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PCR引物合成過程 目前引物合成基本采用固相亞磷酰胺三酯法。DNA合成儀有很多種,主要都是由ABI/PE公司生產，而Bioneer自行研制的磚利384并行高通量DNA合成儀，可實現99%的高合成率。無論采用什么機器合成，合成的原理都相同，主要差別在于合成產率的高低，試劑消耗量的不同和單個循環(huán)用時的多少。亞磷酰胺三酯法合成DNA片段，具有高效、快速的偶聯(lián)以及起始反應物比較穩(wěn)定的特點。亞磷酰胺三酯法是將DNA固定在發(fā)布時間：2022-08-10 16:00 點擊次數：183 次
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引物對反轉錄實驗的影響 引物對反轉錄實驗的影響：1、Oligo(dT)Oligo(dT)引物是約12-18個多聚胸腺嘧啶T組成的重復寡核苷酸序列，能夠特異性地與真核生物mRNA的ploy(A)尾退火，故不適合缺少ploy(A)尾結構的RNA，如原核生物RNA或microRNA，也不適用于已降解的RNA，如FFPE樣品中RNA。真核生物中mRNA僅占總RNA的1%-5%左右，通常在進行從真核生物中構建cDNA文庫，或者克隆發(fā)布時間：2022-08-03 15:22 點擊次數：1146 次
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抗體的制備流程 抗體的制備流程：1.免yi原的制備普通的大分子蛋白，通過分子克隆構建載體并在大腸桿菌中進行誘導表達獲得重組蛋白，純化鑒定后可直接作為免yi 原。小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶聯(lián)載體對該分子進行改造才能使其成為具有免yi 原性的抗原，常見偶聯(lián)載體如BSA、OVA、HAS等。2.免yi 動物常用于制備抗血清的動物有豚鼠、家兔、雞、大小鼠等，大量生產時需要用到狗、綿羊、山羊等。3.免yi 血清的收發(fā)布時間：2022-07-28 10:47 點擊次數：2177 次
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小鼠血清主要優(yōu)勢特點 小鼠血清主要優(yōu)勢特點：1.提供基本營養(yǎng)物質：氨基酸、維生素、無機物、脂類物質、核酸衍生物等，是細胞生長必須的物質。2.提供激su和各種生長因子：胰島素、腎上腺皮質激su（地塞米松）、類固醇激su（雌二醇、睪酮、孕酮）等。生長因子如成纖維細胞生長因子、表皮生長因子、血小板生長因子等。3.提供結合蛋白：結合蛋白作用是攜帶重要地低分子量物質，如白蛋白攜帶維生素、脂肪、以及激su等，轉鐵蛋白攜帶鐵。結合蛋發(fā)布時間：2022-07-05 16:18 點擊次數：547 次
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簡述生化試劑各種級別適用范圍 生化試劑的不同級別：1.熒光級：熒光HPLC級是有梯度的并且是熒光控的，特別適合于用熒光HPLC分析PAH；2.合成純:適用于有機合成和預制的應用；3.特級純:適用于普通實驗室工作，一般情況下符合大部分藥典(BP,USP，etc.)標準；4.藥典級：純度符合Pharmaco-poeia的標準，如（NF，BP，USP，PHEUR，DAB，DAC，JP，PH法郎）；5.分析純：適用于分析、研究和質量質發(fā)布時間：2022-06-24 13:02 點擊次數：727 次
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四種常用?抗凝劑說明 四種常用抗凝劑說明1、EDTA：其機制是通過與水相中的鈣離子形成穩(wěn)定的螯合物而阻止血液凝固，EDTA能影響某些酶的活性，因此檢測血液樣本中指標的酶活時，不推薦使用此抗凝劑。2、肝素：是血液化學成分測定中*好的抗凝劑，其抗凝機制是與抗凝酶Ⅱ一起，在低濃度能抑制因子Ⅸa、Ⅷ和PF3之間的作用，并能加強抗凝血酶Ⅲ滅活絲氨酸蛋白酶，從而阻止凝血酶形成；還有抑制凝血酶的自我催化及抑制因子X的作用。通常用肝素發(fā)布時間：2022-06-17 14:13 點擊次數：1623 次
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培養(yǎng)細胞具體過程 在無菌環(huán)境下從機體取出某種組織細胞，經過一定的處理后接入培養(yǎng)器血中，這一過程稱為取材。如是細胞株的擴大培養(yǎng)則無取材這一過程。機體取出的組織細胞的首ci培養(yǎng)稱為原代培養(yǎng)。培養(yǎng)細胞操作流程：1、將取得的組織細胞接入培養(yǎng)瓶或培養(yǎng)板中的過程稱為培養(yǎng)。如系組織塊培養(yǎng)，則直接將組織塊接入培養(yǎng)器皿底部，幾個小時后組織塊可貼牢在底部，再加入培養(yǎng)基。如系細胞培養(yǎng)，一般應在接入培養(yǎng)器皿之前進行細胞計數，按要求以一定的發(fā)布時間：2022-06-13 15:10 點擊次數：225 次
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小鼠抗IVIgG抗體elisa檢測試劑盒樣本操作 小鼠抗IVIgG抗體elisa檢測試劑盒樣本操作：1.血清：室溫血液自然凝固10-20分鐘，離心20分鐘左右（2000-3000轉/分）。仔細收集上清，保存過程中如出現沉淀，應再次離心。操作過程中避免任何細胞刺激。使用不含熱原和內毒su的試管。2.血漿：應根據標本的要求選擇EDTA或檸檬酸鈉作為抗凝劑，混合10-20分鐘后，離心20分鐘左右 （2000-3000轉/分）去除顆粒。仔細收集上清，保存發(fā)布時間：2022-06-10 11:00 點擊次數：185 次