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樣品制備：

1）. 直接或稀釋使用清亮無(wú)色中性液體樣品，體積可達(dá)2.000ml。

2）. 過(guò)濾混濁溶液。

3）. 除去樣品中的CO 2 （通過(guò)過(guò)濾）。

4 ）. 通過(guò)加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。

5 ）. 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0，孵育約15分鐘。

6 ）. 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品（如有必要調(diào)整PH值至8.0）。

7 ）. 用PVPP（ 聚乙烯吡咯烷酮）或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。

8 ）. 壓碎、攪勻固體或半固體樣品，用水溶解提取。

9 ）. 用Carrez試劑???含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。

10）.含脂肪的樣品用熱水提取。

通用規(guī)則：

1、洗液不夠時(shí)，可用蒸餾水自行配制PH7.4，0.02M的磷酸緩沖液，加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長(zhǎng)期保存。

2、液體全部加完后，可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒，混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。

3、底物有一定的毒性，終止液對(duì)皮膚有腐蝕性，應(yīng)盡量避免接觸。

4、檢測(cè)前，要打開(kāi)酶標(biāo)儀，使之穩(wěn)定10分鐘以上。

5、吸取液體時(shí)，要用量程和需要量接近的槍去吸，減少誤差。

6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí)，避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸，可使槍頭上的液滴和孔壁接觸，液滴會(huì)自然流下去。

7、溫浴時(shí)，要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板，防止水分的蒸發(fā)。

8、洗板時(shí)，每次洗液加入后，應(yīng)靜置1分鐘，使清洗更加徹底。沒(méi)有洗板機(jī)時(shí)，倒去液體后，要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。

9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快，以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。

10、底物是光敏感的，要在臨用前現(xiàn)配。

優(yōu)點(diǎn)如下：

1、快速簡(jiǎn)便：全程約50分鐘，可測(cè)100例左右樣本。

2、取樣量微：本法取手指或耳垂等末梢血20ul～50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD，只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD，只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD，0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。

3、靈敏度高：IC50=0.05g/ml，是鄰苯三酚法的18倍。

4、穩(wěn)定性好：試劑盒2～8℃存放6個(gè)月有效。

5、再現(xiàn)性好：變異系數(shù)CV=1.7%。

6、回收試驗(yàn)： X =103.3%。

7、受外界影響因素小：干擾因素少，重復(fù)性強(qiáng)。

8、測(cè)試面廣：可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等，效果均佳.

褐色諾卡氏菌兔膀胱腫瘤抗原（BTA）elisa定量檢測(cè)試劑盒

北方蜜環(huán)菌猴抗心磷脂抗體IgA（ACA-IgA）elisa定量檢測(cè)試劑盒

枝孢屬猴超氧化物歧化酶1（SOD1）elisa定量檢測(cè)試劑盒

大腸桿菌猴5核苷酸酶（5-NT）elisa定量檢測(cè)試劑盒

產(chǎn)紅青霉猴胰島素樣蛋白5（INSL5）elisa定量檢測(cè)試劑盒

草酸青霉兔破骨激因子1 （OSF）elisa定量檢測(cè)試劑盒

蠟狀芽孢桿菌兔丙酮酸脫氫酶磷酸酶（PDP）elisa定量檢測(cè)試劑盒

丁香葉點(diǎn)霉兔早期生長(zhǎng)應(yīng)答蛋白3（EGR3）elisa定量檢測(cè)試劑盒

微紫青霉猴內(nèi)皮素受體B（ETRB）elisa定量檢測(cè)試劑盒

臺(tái)灣根霉猴過(guò)氧化物酶體增殖物激活受體α（PPAR-α）elisa定量檢測(cè)試劑盒

嗜麥芽黃單胞菌猴纖維蛋白原γ（FGγ）elisa定量檢測(cè)試劑盒

米曲霉猴腎素（REN）elisa定量檢測(cè)試劑盒

球孢白僵菌猴谷胱甘肽S轉(zhuǎn)移酶pi基因（GSTpi）elisa定量檢測(cè)試劑盒

蘇云金芽孢桿菌猴抗磷壁酸抗體（TA）elisa定量檢測(cè)試劑盒

枯草芽孢桿菌兔靶向核糖核酸酶（TR）elisa定量檢測(cè)試劑盒
游離棉酚（FG）含量測(cè)試盒神經(jīng)干抑制相關(guān)蛋白TRIM32抗體鹽小檗 BERBERINE CHLORIDE(P) (AHP Verified)Human

抗體鹽小檗 BERBERINE CHLORIDE(P) (AHP Verified)Human

速激肽受體3抗體甜菜 BETAINE(TRIMETHYLGLYCINE)(P)Human, Mouse

凋亡相關(guān)蛋白5抗體甜菜 BETAINE(TRIMETHYLGLYCINE)(P)Human, Mouse, Rat

微管蛋白γ/Tubulin γ抗體甜菜鹽鹽 BETAINE HCL(P)Human

血管**素受體1抗體甜菜鹽鹽 BETAINE HCL(P)Human

磷化微管相關(guān)蛋白抗體倍他米松 BETAMETHASONE(RG)Human, Mouse, Rat

G蛋白偶聯(lián)受體TAS1R3抗體甜菜 BETAINE(TRIMETHYLGLYCINE)(SH)Human, Mouse

端粒酶反轉(zhuǎn)錄酶抗體甜菜 BETAINE(TRIMETHYLGLYCINE)(SH)Human, Mouse, Rat

eIF4E結(jié)合蛋白抗體Eukaryotic aspartyl protease/FITC  熒光素標(biāo)記天冬氨酸蛋白酶家族蛋白抗體IgG

磷酸化表皮生長(zhǎng)因子受體抗體EV71/FITC  熒光素標(biāo)記腸道病71型/手足口病病抗體IgG
測(cè)定步驟：

1.加樣

1. 除包被外都需45度加樣

2.加樣體積要準(zhǔn)確

3.管底加樣，不能加在管壁上

4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡

2.溫浴

1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后，應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。

2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。

3.為避免蒸發(fā)，板上應(yīng)加蓋，或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。

4.加入底物后，反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃，ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上，以便不時(shí)觀察，待對(duì)照管顯色??當(dāng)時(shí)，即可終止酶反應(yīng)。

3.洗滌

1.洗滌在ELISA過(guò)程中不是反應(yīng)步驟，但卻 是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。

2.目的是洗去反應(yīng)液中沒(méi)有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過(guò)程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。

4.讀板

1.陰性對(duì)照顏色極淺，在定性測(cè)定中一般 可采用目視比色。

2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果，準(zhǔn)確性決定于 ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì)量和軟件的算法。