樣品制備:
1). 直接或稀釋使用清亮無色中性液體樣品,體積可達(dá)2.000ml。
2). 過濾混濁溶液。
3). 除去樣品中的CO 2 (通過過濾)。
4 ). 通過加氫氧化鉀或氫氧化鈉將酸性樣品的PH值調(diào)至8.0。
5 ). 調(diào)整酸性淺色樣品的PH值至8.0,孵育約15分鐘。
6 ). 用空白樣品做對(duì)照測(cè)定有色樣品(如有必要調(diào)整PH值至8.0)。
7 ). 用PVPP( 聚乙烯吡咯烷酮)或聚酰胺處理深色未經(jīng)稀釋或體積更大的樣品。
8 ). 壓碎、攪勻固體或半固體樣品,用水溶解提取。
9 ). 用Carrez試劑將含有蛋白質(zhì)的樣品去蛋白。
10).含脂肪的樣品用熱水提取。
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產(chǎn)品名稱
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乙酰輔酶A測(cè)試盒
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規(guī)格
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50管/48樣、100管/96樣
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貨號(hào)
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BH-S013314
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【友情提示】:本產(chǎn)品僅供科研研究使用,不得用于人體臨床直接檢測(cè)。避免給您帶來不必要的損失,請(qǐng)仔細(xì)閱讀購買說明!
通用規(guī)則:
1、洗液不夠時(shí),可用蒸餾水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸緩沖液,加入0.1%的吐溫20作為洗液。加入1/1000的疊氮鈉后可長期保存。
2、液體全部加完后,可將酶標(biāo)板在桌子上平行輕輕晃動(dòng)30秒,混勻液體。也可以用酶標(biāo)儀的晃動(dòng)功能。
3、底物有一定的毒性,終止液對(duì)皮膚有腐蝕性,應(yīng)盡量避免接觸。
4、檢測(cè)前,要打開酶標(biāo)儀,使之穩(wěn)定10分鐘以上。
5、吸取液體時(shí),要用量程和需要量接近的槍去吸,減少誤差。
6、將液體加到酶標(biāo)孔中時(shí),避免槍頭和孔內(nèi)液體接觸,可使槍頭上的液滴和孔壁接觸,液滴會(huì)自然流下去。
7、溫浴時(shí),要用不干膠或膠帶紙封好酶標(biāo)板,防止水分的蒸發(fā)。
8、洗板時(shí),每次洗液加入后,應(yīng)靜置1分鐘,使清洗更加徹底。沒有洗板機(jī)時(shí),倒去液體后,要將酶標(biāo)板在報(bào)紙或毛紙上用力拍干。
9、用槍吸取液體時(shí)速度不能太快,以免產(chǎn)生氣泡而使吸取量不準(zhǔn)確。
10、底物是光敏感的,要在臨用前現(xiàn)配。
優(yōu)點(diǎn)如下:
1、快速簡便:全程約50分鐘,可測(cè)100例左右樣本。
2、取樣量微:本法取手指或耳垂等末梢血20ul~50ul即可測(cè)紅細(xì)胞中的SOD,只需2ml靜脈血可測(cè)白細(xì)胞中的SOD及血小板中SOD,只需50mg左右組織就可測(cè)組織勻漿、胞漿中的SOD,0.2g組織可測(cè)線粒體及微粒體中的SOD。
3、靈敏度高:IC50=0.05g/ml,是鄰苯三酚法的18倍。
4、穩(wěn)定性好:試劑盒2~8℃存放6個(gè)月有效。
5、再現(xiàn)性好:變異系數(shù)CV=1.7%。
6、回收試驗(yàn): X =103.3%。
7、受外界影響因素小:干擾因素少,重復(fù)性強(qiáng)。
8、測(cè)試面廣:可測(cè)動(dòng)物血液、組織、各種體液、灌流液等、各種培養(yǎng)細(xì)胞、植物組織、各種水產(chǎn)以及化妝品、保健品等,效果均佳.
測(cè)定步驟:
1.加樣
1. 除包被外都需45度加樣
2.加樣體積要準(zhǔn)確
3.管底加樣,不能加在管壁上
4.加樣時(shí)不能產(chǎn)生氣泡
2.溫浴
1.加標(biāo)本后和加結(jié)合物后,應(yīng)立即放入按規(guī)定的反應(yīng)溫度的水浴箱。
2.各ELISA板不應(yīng)疊在一起。
3.為避免蒸發(fā),板上應(yīng)加蓋,或?qū)迤椒旁诘撞繅|有濕紗布的金屬濕盒中。
4.加入底物后,反應(yīng)的時(shí)間和溫度通常不做嚴(yán)格要求。 如室溫高于20℃,ELISA板可避光放在實(shí)驗(yàn)臺(tái)上,以便不時(shí)觀察,待對(duì)照管顯色適當(dāng)時(shí),即可終止酶反應(yīng)。
3.洗滌
1.洗滌在ELISA過程中不是反應(yīng)步驟,但卻是決定實(shí)驗(yàn)成敗的關(guān)鍵。
2.目的是洗去反應(yīng)液中沒有與固相抗原或 抗體結(jié)合的物質(zhì)以及在反應(yīng)過程中非特異性吸附于固相載體的干擾物質(zhì)。
4.讀板
1.陰性對(duì)照顏色極淺,在定性測(cè)定中一般可采用目視比色。
2.如用酶標(biāo)儀測(cè)定結(jié)果,準(zhǔn)確性決定于ELISA板底的平整與透明度、酶標(biāo)儀的質(zhì)量和軟件的算法。
小鼠肺成纖維樣;C57/B6-L擬卵蓋鵝膏菌胰島素(豬)
小鼠肺成纖維樣;2011109L釀酒酵母甲萘醌
小鼠小腸平滑肌;MUS-M1芽孢桿菌哈西奈德
小鼠胚胎;BABL/C-E大腸埃希氏桿菌鹽酸羥甲唑啉
小鼠肺成纖維;WML2葉生布勒擔(dān)子酵母順式那格列奈
小鼠黑色素瘤;B16枯草芽孢桿菌大鼠Ⅲ型膠原(Col Ⅲ)Elisa測(cè)定試劑盒
小鼠腹水瘤;S180-VEnsifer adhaerens半胱酸蛋白酶-10抗體流式組化
小鼠結(jié)締組織L株929克?。籐-929 [L929]枯草芽孢桿菌白介素1-β轉(zhuǎn)化酶樣凋亡蛋白酶6抗體流式組化
小鼠雜交瘤;IG9唐菖蒲伯克霍爾德氏菌FOSL2抗體流式組化
小鼠雜交瘤;IIA8膠孢糖皮質(zhì)誘導(dǎo)腫瘤壞死因子受體抗體流式組化
小鼠雜交瘤;IIF1D2C8F11宛氏擬青霉果膠酶Y-23
小鼠雜交瘤;IE9B2F9F4釀酒酵母鹽酸萬古霉素
小鼠雜交瘤;IIA3枯草芽胞桿菌3-吲哚丙酸鉀
抗人TATA框結(jié)合蛋白交互作用蛋白單抗雜交瘤;1C6/B7釀酒酵母脫氧核糖核酸(鯡魚精)
肌動(dòng)蛋白結(jié)合蛋白1B單抗雜交瘤;actin binding protein, 1B串珠鐮孢*糖原Ⅸ
乙酰輔酶A測(cè)試盒磷化鈣調(diào)節(jié)蛋白-1抗體CAFFEINE(RG)Human, Mouse, Rat
磷化CREB轉(zhuǎn)錄共激活因子TORC2抗體咖啡酰 CAFTARIC ACID(P)(AHP Verified)Human, Mouse, Rat
酪氨酶相關(guān)蛋白2抗體咖啡酰 CAFTARIC ACID(P)(AHP Verified)Human, Mouse
TWIST蛋白抗體CAFFEINE(SH)Human, Mouse, Rat
磷化酪氨羥化酶抗體CAFFEINE(SH)Human, Mouse, Rat
拓普西異構(gòu)酶Ⅰ抗體CAFFEINE(SH)Human, Mouse
小管間質(zhì)炎抗原抗體CAFFEINE(SH)Human, Mouse
跨膜蛋白176A抗體咖啡苯乙酯 CAFFEIC ACID PHENETHYL ESTER(CAPE)(RG)Human, Mouse
跨膜蛋白176A抗體莰烯 CAMPHENE(RG)Human
分裂周期蛋白2亞型1抗體5-HTR4/FITC 熒光素標(biāo)記5-羥色受體4抗體IgG
20號(hào)染色體開放閱讀框74抗體5-LOX/FITC 熒光素標(biāo)記5-脂氧合酶抗體IgG