實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**，并經(jīng)過鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 

5．如果細(xì)胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

培養(yǎng)方法

傳代方法 將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時(shí)，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件 37℃，5%CO2，CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。

存儲條件 凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

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培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 

4．將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測。 

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two : Binds in vitro to vinculin as well as to the SH3 domain of SRC and, when tyrosine phosphorylated, to the SH2 domain of V-CRK. Isoform beta binds to PTK2/FAK1 but weakly to vinculin. Isoform gamma binds to vinculin but only weakly to PTK2/FAK1. Interacts with GIT1, NUDT16L1/SDOS and TGFB1I1. Component of cytoplasmic complexes, which also contain GIT1, ARHGEF6 and PAK1 (By similarity). Interacts with PTK2/FAK1 and PTK2B/PYK2. Binds ASAP2. Interacts with unphosphorylated ITGA4. Interacts with RNF5 and PDCD10. Interacts with NEK3 and this interaction is prolactin-dependent. Interacts with PTK6. Interacts with SORBS1, Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P49023.3

Paxillin是一種分子量為68KDa的局部粘附蛋白，參與腫瘤細(xì)胞的粘附與轉(zhuǎn)移。主要用于各種惡性腫瘤的研究。 Paxillin 蛋白是胞外基質(zhì)細(xì)胞粘附（粘著斑）位點(diǎn)上肌動(dòng)蛋白-膜附著的細(xì)胞骨架蛋白。 Paxillin 在整合蛋白的信號傳導(dǎo)中起著非常重要的作用，整合蛋白介導(dǎo)的細(xì)胞骨架的再組織需要，paxillin 酪氨酸殘基的磷酸化。 Paxillin 被粘著斑激酶 (FAK)在其118位的酪氨酸殘基處磷酸化。已經(jīng)證明，paxillin 118位和31位兩個(gè)酪氨酸的磷酸化對于MM1癌細(xì)胞的遷移是重要的。

英文名稱  Anti-PRDM1/Blimp1

中文名稱  B細(xì)胞誘導(dǎo)成熟蛋白1抗體

別    名  Blimp 1; Blimp-1; B Lymphocyte Induced Maturation Protein 1; Beta interferon gene positive regulatory domain I binding factor; Beta-interferon gene positive regulatory domain I-binding factor; BLIMP-1; BLIMP1; Positive Regulatory Domain I Binding Factor 1; Positive regulatory domain I-binding factor 1; PR Domain Containing 1; PR domain containing 1 with ZNF domain; PR domain containing 1 with ZNF domain isoform 2; PR domain containing protein 1; PR domain zinc finger protein 1; PR domain-containing protein 1; PRDI BF1; PRDI binding factor 1; PRDI-BF1; PRDI-binding factor 1; PRDM 1; Prdm1; PRDM1_HUMAN.

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來源  Rabbit  

克隆類型  polyclonal
原代星形膠質(zhì)細(xì)胞培養(yǎng)體系總蛋白s檢測試劑盒二乙烯三五乙酸  CP乙偶姻 Natural,≥96%（GC), FCC

總蛋白s檢測試劑盒二乙烯三五乙酸  AR,99.0%2,3-丁二酮 98%

血小板**素檢測試劑盒鹽酸二 99%磷酸二氫錳 CP

鈣結(jié)合蛋白檢測試劑盒鹽酸二乙 CP，98%磷酸二氫錳 AR

谷胱甘肽過氧化物酶1檢測試劑盒鹽酸二乙 AR，99%茜素綠 AR

抗突變型瓜氨酸化波形蛋白抗體檢測試劑盒鹽酸乙二 AR,99%2,2'-聯(lián)吡啶-4,4'-二甲酸 96%

血小板衍化生長因子CC檢測試劑盒甲酰 CP,99.0%磷酸二氫錳 AR