實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說(shuō)明：

1．本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng)，懸浮細(xì)胞可使用滴片法； 

2．所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**，并經(jīng)過(guò)鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時(shí)動(dòng)作要輕； 

4．如果需要更多生長(zhǎng)狀態(tài)一致的細(xì)胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過(guò)大，以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率； 

5．如果細(xì)胞貼壁生長(zhǎng)能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴(lài)氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

培養(yǎng)方法

傳代方法 將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀(guān)察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細(xì)胞剛有脫落時(shí)，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細(xì)胞，后可分3~6皿培養(yǎng)???

生長(zhǎng)條件 37℃，5%CO2，CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。

存儲(chǔ)條件 凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過(guò)夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

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培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無(wú)菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個(gè)平皿可放置2-3片）； 

3．在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí)； 

4．將經(jīng)過(guò)計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當(dāng)貼壁細(xì)胞生長(zhǎng)至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí)，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測(cè)。 

細(xì)胞培養(yǎng)方法：

1、細(xì)胞傳代：細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞，若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；若細(xì)胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集，細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時(shí)間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存：待細(xì)胞生長(zhǎng)狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀(guān)察細(xì)胞，大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落，輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細(xì)胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲(chǔ)存。

產(chǎn)品介紹 PCDHGC5 (protocadherin gamma-C5) is a 944 amino acid single-pass type I membrane protein that contains six cadherin domains and exists as two alternatively spliced isoforms. As a potential calcium-dependent cell-adhesion protein, PCDHGC5 may be involved in the establishment and maintenance of specific neuronal connections in the brain. The gene that encodes PCDHGC5 consists of approximately 23,739 bases and maps to human chromosome 5q31.3.

Function : Potential calcium-dependent cell-adhesion protein. May be involved in the establishment and maintenance of specific neuronal connections in the brain.

Subcellular Location : Cell membrane; Single-pass type I membrane protein

Similarity : Contains 6 cadherin domains.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: Q9Y5F6.1

英文名稱(chēng)  Anti-Pecanex

中文名稱(chēng)  山核桃素樣蛋白1抗體

別    名  PCNXL1; Pecanex homolog; Pecanex like protein 1; PCX1_HUMAN.

濃    度  1mg/1ml

規(guī) 格  0.2ml/200μg

抗體來(lái)源  Rabbit  

克隆類(lèi)型  polyclonal

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Sheep

產(chǎn)品類(lèi)型  一抗    

研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué)  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 259kDa

性    狀  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human Pecanex
H1細(xì)胞專(zhuān)用因子Y27632（相關(guān)3）膜聯(lián)蛋白-A7檢測(cè)試劑盒2,5-二氯吡啶-4-酸 95%卡鉑 98%

胃蛋白酶檢測(cè)試劑盒2,6-二酸 98%反式-1.2-環(huán)己二四乙酸 98%

O-6-甲基鳥(niǎo)嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)試劑盒2,4-二甲氧基嘧啶-5-酸 90%順鉑 Pt, 65%

O-6-甲基鳥(niǎo)嘌呤DNA甲基轉(zhuǎn)移酶檢測(cè)試劑盒2,4-二芐氧基嘧啶-5-酸 95% 2,6-二氯-4-三氟 98%

DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶1檢測(cè)試劑盒3-二甲氨基苯酸鹽酸鹽 98% 2-氨基-5-氯三氟甲苯 97%

DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶2檢測(cè)試劑盒3-乙氧羰基苯酸 97%3-氨基-4-氯三氟甲苯 97%

DNA甲基化轉(zhuǎn)移酶3A檢測(cè)試劑盒2-乙氧基-1-萘酸 98%3-氯三氟甲苯 98%