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產(chǎn)品資料

小鼠前胃癌細(xì)胞

小鼠前胃癌細(xì)胞
  • 如果您對該產(chǎn)品感興趣的話,可以
  • 產(chǎn)品名稱:小鼠前胃癌細(xì)胞
  • 產(chǎn)品型號:BH-X019679
  • 產(chǎn)品展商:博湖
  • 產(chǎn)品文檔:無相關(guān)文檔
簡單介紹
收到小鼠前胃癌細(xì)胞后首先觀察細(xì)胞瓶是否完好,培養(yǎng)液是否有漏液、渾濁等現(xiàn)象,若有上述現(xiàn)象發(fā)生請及時(shí)和我們聯(lián)系。
產(chǎn)品描述

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產(chǎn)品名稱

規(guī)格

貨號

小鼠前胃癌細(xì)胞

1×106

BH-X019679

培養(yǎng)方法

傳代方法 將舊培養(yǎng)液吸除,PBS清洗兩遍后,加入6mL(/100mm皿)胰酶,在顯微鏡下觀察,期間禁止搖晃培養(yǎng)皿,細(xì)胞剛有脫落時(shí),則吸除大部分胰酶,留約0.5mL,移至培養(yǎng)箱消化,約2min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化,輕輕吹打均勻細(xì)胞,后可分3~6皿培養(yǎng);

生長條件 37℃,5%CO2,CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液:90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H:DMEM高糖培養(yǎng)液,含谷氨酰胺,含丙酮酸鈉。

存儲條件 凍存則用6mL凍存液(90%FBS+10%DMSO)終止消化,吹打均勻,分為6支凍存管,用程序降溫盒于-80℃凍存,過夜轉(zhuǎn)移至液氮中保存。

培養(yǎng)操作步驟

1.用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出,用無菌絲綢布擦拭干凈,不要用紗布; 

2.將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板(每孔一片)或培養(yǎng)皿中(每個(gè)平皿可放置2-3片); 

3.在距離紫外燈直射范圍內(nèi)20-30 厘米處照射2-3小時(shí); 

4.將經(jīng)過計(jì)數(shù)的細(xì)胞懸浮液移入培養(yǎng)板中,使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中; 

5.將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天,當(dāng)貼壁細(xì)胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時(shí),將培養(yǎng)板取出,用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片,用蒸餾水漂洗后即可進(jìn)行快速固定以及細(xì)胞化學(xué)檢測。 


實(shí)驗(yàn)要點(diǎn)及說明:

1.本方法適用于貼壁細(xì)胞培養(yǎng),而不適用于懸浮細(xì)胞培養(yǎng),懸浮細(xì)胞可使用滴片法; 

2.所使用的蓋玻片應(yīng)該為玻璃**,并經(jīng)過鉻酸洗液處理; 

3.蓋玻片非常薄,易碎,取放蓋玻片時(shí)動作要輕; 

4.如果需要更多生長狀態(tài)一致的細(xì)胞,可以使用較大的培養(yǎng)皿,但不宜過大,以避免培養(yǎng)液的浪費(fèi)和增加污染機(jī)率; 

5.如果細(xì)胞貼壁生長能力較差,可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細(xì)胞培養(yǎng)方法:

1、細(xì)胞傳代:細(xì)胞密度達(dá)到80-90%時(shí)即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次;

②加入2ml0.25%胰酶(T25瓶),使胰酶覆蓋整個(gè)瓶或皿,蓋好放入培養(yǎng)箱消化;

③1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,若大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;若細(xì)胞還是貼壁,放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止;

④將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清;

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中,T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基;

⑥懸浮細(xì)胞直接離心收集,細(xì)胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細(xì)胞復(fù)蘇:

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化,時(shí)間1min左右,加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻,將細(xì)胞懸液加入培養(yǎng)瓶中,補(bǔ)加適量培養(yǎng)基。

3、細(xì)胞凍存:待細(xì)胞生長狀態(tài)良好時(shí)進(jìn)行細(xì)胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清,用PBS或生理鹽水清洗1-2次,加入1mL 0.25%胰蛋白酶(T25瓶)

②1-2min后,顯微鏡下觀察細(xì)胞,大部分細(xì)胞回縮且有少量細(xì)胞脫落,輕輕吹打下確認(rèn)消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化;

③將細(xì)胞懸液1000RPM左右條件下離心4min,棄上清,加1ml凍存液重懸細(xì)胞;

④將凍存管放入程序降溫盒,放入-80℃冰箱,4小時(shí)后將凍存管轉(zhuǎn)入液氮罐儲存。

交叉反應(yīng)  Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse

產(chǎn)品類型  一抗    

研究領(lǐng)域  細(xì)胞生物 神經(jīng)生物學(xué) 通道蛋白 細(xì)胞粘附分子  

蛋白分子量  predicted molecular weight: 186kDa

     Lyophilized or Liquid

 KLH conjugated synthetic peptide derived from human SHANK3

     IgG

純化方法  affinity purified by Protein A

 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

產(chǎn)品應(yīng)用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500

(石蠟切片需做抗原修復(fù))

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

產(chǎn)品介紹 SH3 and multiple ankyrin repeat domains 1-3 (Shank1-3) of the Shank/ProSAP family are molecular scaffolds in the postsynaptic density (PSD). The PSD is an electron-dense structure underneath the postsynaptic plasma membrane of excitatory synapses that anchors and clusters glutamate receptors opposite to the presynaptic neurotransmitter release site. Shank proteins contain PDZ modular domains that coordinate the synaptic localization of ion channels, receptors, signaling enzymes, and cell adhesion molecules. The PDZ domain mediates protein-protein interactions via the recognition of a conserved sequence motif at the C-terminus of their target protein(s). Shank recruits betaPIX and PAK to spines to regulate postsynaptic structure and interacts with NMDA receptor and metabotropic glutamate receptor complexes. Transcript splice variation in the Shank family influences the spectrum of Shank-interacting proteins in the PSDs of ***** and developing brain to ensure normal development.

Function : Seems to be an adapter protein in the postsynaptic density (PSD) of excitatory synapses that interconnects receptors of the postsynaptic membrane including NMDA-type and metabotropic glutamate receptors via complexes with GKAP/PSD-95 and Homer, respectively, and the actin-based cytoskeleton. May play a role in the structural and functional organization of the dendritic spine and synaptic junction.

Subunit : May homomultimerize via its SAM domain (By similarity). Interacts with DLGAP1/GKAP, MGLUR1A, MGLUR5 C-termini via its PDZ domain (By similarity). Interacts with HOMER1, HOMER2, HOMER3 and CTTN/cortactin SH3 domain (By similarity). Is part of a complex with DLG4/PSD-95 and DLGAP1/GKAP. Interacts with DBNL. Interacts (via PDZ domain) with PROSAPIP1 (via C-terminus) (By similarity). Interacts with BAIAP2.
小鼠前胃癌細(xì)胞金黃色葡萄球菌蛋白A檢測試劑盒乙縮 Standard for GC,>99%(GC)鄰甲氨基苯甲酸甲酯 ≥98%, FCC, Kosher

金葡菌腸素檢測試劑盒乙縮 98%正癸 98%

金屬硫蛋白檢測試劑盒乙縮 ≥98%, FG1,4-二甲氧基苯 99%

金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1檢測試劑盒茴香烯 99%一縮二 99%

金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白5檢測試劑盒乙溶液 35 wt. % in H2O一縮二 98%

緊密連接蛋白檢測試劑盒甲位戊基桂 97%癸 97%

緊密連接蛋白1檢測試劑盒楊梅 98%2,5-二甲基吡 98%


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