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培養(yǎng)方法

傳代方法 將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入6mL（/100mm皿）胰酶，在顯微鏡下觀察，期間禁止搖晃培養(yǎng)皿，細胞剛有脫落時，則吸除大部分胰酶，留約0.5mL，移至培養(yǎng)箱消化，約2min取出。傳代用12mL CM1-1培養(yǎng)液終止消化，輕輕吹打均勻細胞，后可分3~6皿培養(yǎng)；

生長條件 37℃，5%CO2，CM1-1培養(yǎng)液。CM1-1培養(yǎng)液：90%DMEM-H+10%FBS。DMEM-H：DMEM高糖培養(yǎng)液，含谷氨酰胺，含丙酮酸鈉。

存儲條件 凍存則用6mL凍存液（90%FBS+10%DMSO）終止消化，吹打均勻，分為6支凍存管，用程序降溫盒于-80℃凍存，過夜轉移至液氮中保存。

培養(yǎng)操作步驟 ：

1．用蓋片鑷將蓋玻片自75%乙醇中取出，用無菌絲綢布擦拭干凈，不要用紗布； 

2．將蓋玻片輕輕放入6孔培養(yǎng)板（每孔一片）或培養(yǎng)皿中（每個平皿可放置2-3片）； 

3．在距離紫外燈直射范圍內20-30 厘米處照射2-3小時； 

4．將經過計數的細胞懸浮液移入培養(yǎng)板中，使蓋玻片完全浸在培養(yǎng)液中； 

5．將培養(yǎng)板在5% CO2水浴孵箱中37℃孵育2-3天，當貼壁細胞生長至覆蓋培養(yǎng)板底部2/3面積時，將培養(yǎng)板取出，用蓋片鑷輕輕取出蓋玻片，用蒸餾水漂洗后即可進行快速固定以及細胞化學檢測。 

實驗要點及說明：

1．本方法適用于貼壁細胞培養(yǎng)，而不適用于懸浮細胞培養(yǎng)，懸浮細胞可使用滴片法； 

2．所使用的蓋玻片應該為玻璃**，并經過鉻酸洗液處理； 

3．蓋玻片非常薄，易碎，取放蓋玻片時動作要輕； 

4．如果需要更多生長狀態(tài)一致的細胞，可以使用較大的培養(yǎng)皿，但不宜過大，以避免培養(yǎng)液的浪費和增加污染機率； 

5．如果細胞貼壁生長能力較差，可將蓋玻片在0.5%多聚賴氨酸溶液中浸泡5-10分鐘并自然晾干。

細胞培養(yǎng)方法：

1、細胞傳代：細胞密度達到80-90%時即可傳代

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次；

②加入2ml0.25%胰酶（T25瓶），使胰酶覆蓋整個瓶或皿，蓋好放入培養(yǎng)箱消化；

③1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，若大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；若細胞還是貼壁，放回培養(yǎng)箱繼續(xù)消化至可以輕輕吹打下為止；

④將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清；

⑤用新鮮培養(yǎng)基重懸后加入培養(yǎng)瓶或皿中，T25培養(yǎng)瓶加6-8ml培養(yǎng)基；

⑥懸浮細胞直接離心收集，細胞沉淀重懸后分到新培養(yǎng)瓶中。

2、細胞復蘇：

①將凍存管在37℃溫水中快速搖晃融化，時間1min左右，加入4-5ml培養(yǎng)基混勻。

②在1000RPM左右條件下離心4min，棄上清,加1-2ml培養(yǎng)基吹勻，將細胞懸液加入培養(yǎng)瓶中，補加適量培養(yǎng)基。

3、細胞凍存：待細胞生長狀態(tài)良好時進行細胞凍存保種

①棄去培養(yǎng)上清，用PBS或生理鹽水清洗1-2次，加入1mL 0.25%胰蛋白酶（T25瓶）

②1-2min后，顯微鏡下觀察細胞，大部分細胞回縮且有少量細胞脫落，輕輕吹打下確認消化情況后加入完全培養(yǎng)基終止消化；

③將細胞懸液1000RPM左右條件下離心4min，棄上清，加1ml凍存液重懸細胞；

④將凍存管放入程序降溫盒，放入-80℃冰箱，4小時后將凍存管轉入液氮罐儲存。

亞    型  IgG

純化方法  affinity purified by Protein A

儲 存 液  0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide

產品應用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IP=1:20-100  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  IF=1:100-500

（石蠟切片需做抗原修復）

 not yet tested in other applications.

 optimal dilutions/concentrations should be determined by the end user.  

保存條件  Store at -20 °C for one year. Avoid repeated freeze/thaw cycles. The lyophilized antibody is stable at room temperature for at least one month and for greater than a year when kept at -20°C. When reconstituted in sterile pH 7.4 0.01M PBS or diluent of antibody the antibody is stable for at least two weeks at 2-4 °C.

Important Note  This product as supplied is intended for research use only, not for use in human, therapeutic or diagnostic applications.

產品介紹 Ornithine Decarboxylase (ODC) is the initial and rate limiting enzyme in the biosynthetic pathway of polyamines and is involved in the conversion of ornithine to putrescine. The biological activity of ODC is rapidly induced in response to virtually all agents known to promote cell proliferation including hormones, drugs, growth factors, mitogens, and tumor promoters. Reportedly, ODC mRNA levels are elevated in lung carcinomas as well as in colon adenomas and carcinomas. ODC activity in colorectal carcinomas is greater than those in adenomas and normal mucosa.

Subunit : Homodimer.

Post-translational modifications : S-Nitrosylation inhibits the enzyme. S-Nitrosylated in vitro on 4 cysteine residues.

Similarity : Belongs to the Orn/Lys/Arg decarboxylase class-II family.

Database links : UniProtKB/Swiss-Prot: P11926.2

鳥氨酸脫羧酶為多胺生物合成途徑中的**個限速酶 (催化合成多胺的**步反應 ,即催化L -鳥氨酸脫羧**腐胺 ) ,具有超常轉變率和對于刺激的迅速反應性。

多胺廣泛存在于生物體的各種細胞和組織中 ,是一種重要的代謝調控物質 ,它可直接與DNA相互作用 ,調節(jié)DNA構象 ,并參與RNA及蛋白質的合成 ,與細胞增殖、分化密切相關。經研究表明 ,哺乳動物細胞增殖體現出完全的多胺依賴性。ODC主要存在于胞漿中。

英文名稱  Anti-Os05g0477200 protein

中文名稱  水稻白葉枯病菌Os05g0477200蛋白抗體
小鼠乳腺癌高轉移細胞低密度脂蛋白受體檢測試劑盒1,2,4,5-四 95%4-乙基-2,3-二氧-1-哌甲酰氯  95%

集落激因子檢測試劑盒二硫化二苯并噻唑 98%六甲基二硅氧烷 99%

幾丁質酶3樣蛋白1檢測試劑盒2-巰基苯并噻唑 98%六甲基二硅烷 AR，98%

己糖激酶檢測試劑盒二硫化四乙基秋蘭姆 97%N,O-雙(基硅烷基)乙酰 95%

己糖激酶II檢測試劑盒氯鉑酸銨 AR基硅咪唑 97%

喋呤檢測試劑盒氯亞鉑酸銨 鉑含量：52.0%1,3,5-苯酰氯 98%

甲基二酸檢測試劑盒氯鈀酸銨 Pd ≥29.5% 1,2,4-苯三酸酐 97%