保存方法:
傳代保存法:培養(yǎng)基的濃度不宜過高,營養(yǎng)成分不宜過于豐富,尤其是碳水化合物的濃度應(yīng)在可能的范圍內(nèi)盡量降低。培養(yǎng)溫度通常以稍低于適生長溫度為好。若為產(chǎn)酸菌種,則應(yīng)在培養(yǎng)基中添加少量碳酸鈣。
液體石蠟覆蓋保存法:該法較前一種方法保存菌種的時間更長,適用于霉菌、酵母菌、放線菌及需氧等的保存。
懸液保存法:
① 蒸餾水保存法:適用于霉菌、酵母菌及絕大部分放線菌,將其菌體懸浮于蒸餾水中即可在室溫下保存數(shù)年。本法應(yīng)注意避免水分的蒸發(fā)。
② 糖液保存法:適用于酵母菌,如將其菌體懸浮于10%的蔗糖溶液中,然后于冷暗處保存,可長達10年。除此之外,也可使用緩沖液或食鹽水等進行保存。
載體保存法:①土壤保存法;②砂土保存法;③硅膠保存法;④磁珠保存法;⑤麩皮保存法;⑥紙片(濾紙)保存法。
常用的冷凍保存法:
① 低溫冰箱保存法(-20℃、-50℃或-85℃):低溫冷凍保存時使用螺旋口試管較為方便,也可在棉塞試管外包裹塑料薄膜。保存時菌液加量不宜過多,有些可添加保護劑。此外,也可用φ5mm的玻璃珠來吸附菌液,然后把玻璃珠置于塑料容器內(nèi),再放入低溫冰箱內(nèi)進行保存的。
② 干冰保存法(-70℃左右):即將菌種管插入干冰內(nèi),再置于冰箱內(nèi)進行冷凍保存。
③ 液氮保存法(-196℃):是適用范圍廣的微生物保存法。
產(chǎn)品名稱：青霉菌
拉丁文: Penicillium expansum Link
分離基物: 桃幼成熟果實
提供形式: 斜面培養(yǎng)物/凍干物
**等級: 1
模式菌株: no
應(yīng)用領(lǐng)域: 研究；教學(xué)
培養(yǎng)基: 綜合PDA：馬鈴薯煮汁1000mL，磷酸二氫鉀 3g，硫酸鎂 1.5g，葡萄糖 20g，維生素B1 10mg，瓊脂 20g，pH自然。
生長條件: 26℃，好氧
生長特性: 菌落在查氏酵母膏瓊脂(CYA)上生長較快，25℃7天直徑35-45mm，較厚，平坦；質(zhì)地絨狀兼有孢梗束而成顆粒狀；分生孢子結(jié)構(gòu)大量，灰黃綠色，近于暗?砂綠色(Dark Cinnabar Green Ridgway Pl. XIX)或鎳綠色(Nickel Green Ridgway Pl. XXXIII)；菌絲白色；滲出液較多，無色至橙褐色；可溶性色素?zé)o至較多，褐色；反面黃褐色至棕色。分生孢子梗發(fā)生于基質(zhì)菌絲和孢梗束，孢梗莖120-500×3.0-4.0цm，壁平滑；帚狀枝三輪生，偶有雙輪生，彼此較緊密
存儲條件: 定期移植法，2-8℃。
微生物培養(yǎng)方法:
1、平板劃線分離法:把混雜在一起的微生物或同一微生物群體中的不同細胞用接種環(huán)圈在平板培養(yǎng)基表面,通過分區(qū)劃線稀釋而得到較多獨立分布的單個細胞,經(jīng)培養(yǎng)后生長繁殖成單菌落。
2、稀釋涂布平板法將菌液進行一系列的梯度稀釋,然后將不同稀釋度的菌液分別涂布到瓊脂固體培養(yǎng)基的表面進行培養(yǎng),在稀釋度足夠高的菌液里,聚集在一起的微生物將被分散成單個細胞,從而能在培養(yǎng)基表面形成單個菌落。
上述兩種方法雖然都可以實現(xiàn)觀察菌落特征的目的,但平板劃線分離法不能對菌落計數(shù),而稀釋涂布平板法培養(yǎng)過程復(fù)雜,對平板的要求比較高,可參照以下步驟:
a、制備平板培養(yǎng)基將氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基加熱溶化并冷卻至65℃,向氯化鈉蔗糖瓊脂培養(yǎng)基中加入克林霉素溶液3~5ml并混合均勻,然后取20ml混合均勻的培養(yǎng)基溶液倒入培養(yǎng)皿,輕輕搖動培養(yǎng)皿,使培養(yǎng)基溶液均勻分布在培養(yǎng)皿底部,待培養(yǎng)基溶液凝固后即得平板培養(yǎng)基。
b、制備活性污泥混合液稱取活性污泥土樣15g,放入盛100ml無菌水并帶有玻璃珠的三角燒瓶中,振搖15~20min混合均勻,用一支1ml無菌吸管從中吸取1ml土壤懸液加入盛有9ml無菌水的大試管中充分混勻,制成活性污泥混合液。
c、培養(yǎng)基涂布從活性污泥混合液中吸取0.2ml,滴在平板培養(yǎng)基表面的中央位置,用無菌玻璃涂棒將活性污泥混合液沿同心圓方向輕輕地向外擴展,使之分布均勻。
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青霉菌應(yīng)用領(lǐng)域: AOC分析。
培養(yǎng)基: 營養(yǎng)肉汁瓊脂：牛肉膏 3.0g，蛋白胨 10.0g，NaCl 5.0g，瓊脂 15.0g，蒸餾水 1.0L，pH7.0。[注] 培養(yǎng)芽孢桿時加入5mg MnSO4·H2O，則有利于產(chǎn)生芽孢。pH7.0。121℃，15min。
生長條件: 20-25℃，好氧，2-3天，斜面或平板培養(yǎng)。
存儲條件: 真空冷凍干燥法
產(chǎn)品名：馬克斯克魯維酵母
拉丁文: Kluyveromyces marxianus
分離基物: 酸牛奶
提供形式: 凍干粉
**等級: 1
模式株: no
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