公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
|
產(chǎn)品名稱
|
磷酸化酪氨酸激酶2試劑盒
|
|
規(guī)格
|
48T/96T
|
|
貨號(hào)
|
BH-8010632
|
保存條件:2-8℃(長(zhǎng)期不使用時(shí),部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個(gè)月
存儲(chǔ)運(yùn)輸:低溫避光,請(qǐng)勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時(shí)間到貨。)
Elisa試劑盒可測(cè)種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚(yú)等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實(shí)驗(yàn),禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實(shí)驗(yàn)。若不能馬上進(jìn)行試驗(yàn),可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測(cè)含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過(guò)氧化物酶的(HRP)活性。
|
2400 ng/L
|
5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
1200ng/L
|
4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 5 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
600ng/L
|
3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 4 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
300ng/L
|
2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 3 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
|
150ng/L
|
1 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品
|
150μl 的 2 號(hào)標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
|
組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動(dòng)以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測(cè)稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測(cè)稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測(cè)溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計(jì)算好的每次實(shí)驗(yàn)所需的總量配制(100ul/孔),實(shí)際配制時(shí)應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測(cè)溶液A加990ul檢測(cè)稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制。
7. 檢測(cè)溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測(cè)稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測(cè)溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時(shí)每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲(chǔ)存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無(wú)菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),保存過(guò)程中如有沉淀,請(qǐng)?jiān)俅坞x心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實(shí)際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時(shí)內(nèi)檢測(cè)可放入 2-8℃儲(chǔ)存),避免反復(fù)凍融。
大鼠精氨酸酶(Arg)試劑盒Human CFL1(Cofilin-1) ELISA Kit磷酸化巨噬集落激因子受體抗體
大鼠精氨酸加壓素受體(Av pr1a)試劑盒Human LGALS3BP(Galectin-3-binding protein) ELISA Kit微管結(jié)合蛋白CYLD抗體
大鼠芳香烴受體(AhR)試劑盒Human CFLAR(CASP8 and FADD-like apoptosis regulator) ELISA Kit磷酸化微管結(jié)合蛋白CYLD抗體
大鼠芳香烴受體相互作用蛋白酶(AIP)試劑盒Human ADCYAP1R1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide type I receptor) ELISA Kit磷酸化CBX5抗體
大鼠芳香烴受體核轉(zhuǎn)位子2(ARNT2)試劑盒Human PPA1(Inorganic pyrophosphatase) ELISA Kit氯霉素抗體
大鼠唾液酸受體1(ASGR1)試劑盒Human RET(Proto-oncogene tyrosine-protein kinase receptor Ret) ELISA Kit磷酸化非受體酪氨酸激酶c-Abl抗體
大鼠天冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶(AST)試劑盒Human CASR(Extracellular calcium-sensing receptor) ELISA Kit磷酸化質(zhì)膜微囊蛋白-1抗體
大鼠肺表面活性物質(zhì)相關(guān)蛋白B(SP-B)試劑盒Human VIPR2(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 2) ELISA Kit磷酸化周期素依賴激酶2抗體
大鼠T-框蛋白2(TBX2)試劑盒Human MCFD2(Multiple coagulation factor deficiency protein 2) ELISA Kit磷酸化分裂周期蛋白25C抗體
大鼠擴(kuò)張性共濟(jì)失調(diào)癥突變蛋白(ATM)試劑盒Human VIPR1(Vasoactive intestinal polypeptide receptor 1) ELISA Kit磷酸化周期素依賴性激酶2抗體
大鼠失調(diào)癥蛋白1(ATXN1)試劑盒Human WTAP(Pre-mRNA-splicing regulator WTAP) ELISA Kit質(zhì)膜微囊蛋白-3抗體
大鼠失調(diào)癥蛋白2(ATXN2)試劑盒Human LGALS3BP(Galectin-3-binding protein) ELISA Kit3號(hào)染色體開(kāi)放閱讀框34抗體
大鼠三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體A1(ABCA 1)試劑盒Human SNX1(Sorting nexin-1) ELISA KitCD134抗體
大鼠三磷酸腺苷結(jié)合盒轉(zhuǎn)運(yùn)體G1(ABC G1)試劑盒Human CFLAR(CASP8 and FADD-like apoptosis regulator) ELISA Kit單核趨化蛋白5抗體
大鼠轉(zhuǎn)化生長(zhǎng)因子β1 (TGF-β1) 試劑盒Human ADCYAP1R1(Pituitary adenylate cyclase-activating polypeptide type I receptor) ELISA Kit髓鞘相關(guān)糖蛋白CD57抗體
磷酸化酪氨酸激酶2試劑盒維多利亞藍(lán)B Biological stain聚乙二單甲 均分子量750 Anti-KLF13/RFLAT-1 /FITC 熒光素標(biāo)記腸道內(nèi)富含的Kruppel樣因子13抗體IgG
二甲酚橙四鈉鹽 AR聚乙二單甲 平均分子量500Anti-KLK1/FITC 熒光素標(biāo)記激肽釋放酶1抗體IgG
鋅試劑 AR聚乙二單甲 平均分子量5000Anti-KLK3/FITC 熒光素標(biāo)記激肽釋放酶3/舒血管素3抗體IgG
鋅試劑 ≥85%(HPLC)聚乙二單甲 平均分子量1000Anti-KLK4/FITC 熒光素標(biāo)記激肽釋放酶4抗體IgG
3,3'4,4'-二苯甲酮四羧酸二酐 96%酸酐 98%Anti-KLK7/FITC 熒光素標(biāo)記激肽釋放酶7抗體IgG
1,4,5,8-萘四甲酸酐 96%1,3- 98%Anti-KLK9/FITC 熒光素標(biāo)記激肽釋放酶9抗體IgG
六氟鋯酸 45%水溶液氫氧化 AR,90%Anti-KLK10/FITC 熒光素標(biāo)記激肽釋放酶10抗體IgG
堿式碳酸鋯(IV) ≥40% ZrO2 basis結(jié)晶碳酸 CP,98%Anti-KLK14/FITC 熒光素標(biāo)記激肽釋放酶14抗體IgG
操作步驟:
實(shí)驗(yàn)開(kāi)始前,請(qǐng)?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時(shí),均需混勻,混勻時(shí)盡量避免起泡。每次檢測(cè)都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過(guò)高時(shí),用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測(cè)范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測(cè)樣品孔。空白孔加樣品稀釋液100μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測(cè)樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動(dòng)混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果有效性,每次實(shí)驗(yàn)請(qǐng)使???新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時(shí)內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過(guò)氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時(shí)肉眼可見(jiàn)標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時(shí)藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實(shí)驗(yàn)結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時(shí)間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長(zhǎng)依序測(cè)量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測(cè)。