樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
	
	
		
			
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						產(chǎn)品名稱
					 
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						環(huán)磷酰胺試劑盒
					 
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						規(guī)格
					 
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						48T/96T
					 
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						貨號
					 
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						BH-0012207
					 
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		保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
	
	
		
			
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						2400 ng/L
					 
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						5 號標準品
					 
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						150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液
					 
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						1200ng/L
					 
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						4 號標準品
					 
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						150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
					 
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						600ng/L 
					 
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						3 號標準品
					 
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						150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
					 
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						300ng/L
					 
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						2 號標準品
					 
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						150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
					 
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						150ng/L
					 
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						1 號標準品
					 
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						150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
					 
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		組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭?,試劑或樣品稀釋時,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
鈉-葡萄糖共轉(zhuǎn)運載體1sodium-glucose cotransporter 1
	
	
		N-乙?;?絲氨酰-天門冬酰-賴氨酰-脯氨酸N-Acetyl-Ser-Asp-Lys-Pro
	
	
		糖原glycogen
	
	
		皮質(zhì)酮;腎上腺酮Corticosterone
	
	
		N末端C型利鈉肽前體NT-proCNP
	
	
		細胞色素P450單加氧酶Cytochrome P450 Monooxygenase
	
	
		腺苷三磷酸結(jié)合轉(zhuǎn)運蛋白ATP binding cassette transport proteion
	
	
		乙酰輔酶A羧化酶Acetyl CoA carboxylase
	
	
		血小板特異性抗原platelet antigens
	
	
		蛋白磷酸脂酶PP2A
	
	
		抗胰蛋白酶Anti trypsin 
	
	
		白細胞介素18Interleukin 18
	
	
		雌二醇Estradiol
	
	
		誘導型NO合酶inducible nitric oxide synthase
	
	
		α平滑肌肌動蛋白抗體α-Smooth muscle actin antibody
環(huán)磷酰胺試劑盒DL-高苯氨酸 98%鹽酸藥根堿 分析標準品,≥98%Anti-MASP2  甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶2抗體
	
	
		DL-異亮氨酸 98%醉椒素 分析標準品,≥99%Anti-Matriptase  蛋白裂解酶(一種新的癌基因)抗體
	
	
		D-異亮氨酸 98%石松靈堿 分析標準品,≥98%Anti-MBP  髓鞘堿性蛋白抗體
	
	
		D-別異亮氨酸 98%蓮心堿 分析標準品,≥98%Anti-CMV/HCMV PP65/HHV5 PP65  巨病PP65/CMV低基質(zhì)磷脂蛋白抗體
	
	
		DL-亮氨酸 98%羽扇豆 分析標準品,≥98%Anti-HCMV  人巨病
	
	
		L-叔亮氨酸 99%石蒜裂堿 分析標準品,≥98% Anti-HCMV UL23  人巨病UL23抗體
	
	
		DL-賴氨酸 99%羥基積雪草苷 分析標準品,98%Anti-HCMV UL49  人巨病UL49蛋白抗體
	
	
		D-亮氨酸 99%羥基積雪草苷 98%Anti-MCP-1/CCL2  單核趨化蛋白1抗體(大、小鼠)