公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
	
	
		
			
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						產(chǎn)品名稱
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						鈣調(diào)素試劑盒
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						規(guī)格
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						48T/96T
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						貨號
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						BH-0012112
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		保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應(yīng)放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運(yùn)輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應(yīng),一般為快遞運(yùn)輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠(yuǎn)地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
樣本要求:
1.標(biāo)本采集后盡早進(jìn)行提取,提取按相關(guān)文獻(xiàn)進(jìn)行,提取后應(yīng)盡快進(jìn)行實驗。若不能馬上進(jìn)行試驗,可將標(biāo)本放于-20℃保存,但應(yīng)避免反復(fù)凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
	
	
		
			
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						2400 ng/L
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						5 號標(biāo)準(zhǔn)品
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						150μl 的原倍標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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						1200ng/L
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						4 號標(biāo)準(zhǔn)品
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						150μl 的 5 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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						600ng/L 
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						3 號標(biāo)準(zhǔn)品
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						150μl 的 4 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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						300ng/L
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						2 號標(biāo)準(zhǔn)品
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						150μl 的 3 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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						150ng/L
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						1 號標(biāo)準(zhǔn)品
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						150μl 的 2 號標(biāo)準(zhǔn)品加入 150μl 標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液
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		組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔) 
2. 標(biāo)準(zhǔn)品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復(fù)顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進(jìn)行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標(biāo)準(zhǔn)濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標(biāo)準(zhǔn)品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標(biāo)準(zhǔn)品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預(yù)先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應(yīng)多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。 
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。 
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細(xì)胞培養(yǎng)上清:
將細(xì)胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復(fù)凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標(biāo)本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復(fù)凍融。
副流感病人黃體**素釋放Parainfluenzavirus
	
	
		谷胱甘肽過氧化物酶8大鼠活化素AGlutathione peroxidase 8
	
	
		骨髓源性生長因子人8異前列腺素MYDGF
	
	
		P物質(zhì)大鼠血管緊張素ⅡSubstance P
	
	
		總膽汁酸人腎素Total bile acide
	
	
		腫瘤壞死因子受體超家族成員4大鼠血管緊張素轉(zhuǎn)化酶Tumor necrosis factor receptor superfamily member 4
	
	
		EB病早期抗原人腎上腺素Epstein-Barr Virus early antigen 
	
	
		EB病核心抗原人雌二受體EBNA
	
	
		α溶血素大鼠穿孔素hemolysin/haemolysin α
	
	
		白細(xì)胞素大鼠神經(jīng)肽Apanto-valentine
	
	
		肝細(xì)胞生長因子大鼠Slit2hepatocyte growth factor
	
	
		賴氨酸特異性脫甲基酶5A大鼠神經(jīng)肽BLysine-specific demethylase 5A
	
	
		β-葡萄糖苷酸酶豬廣譜角蛋白β–glucuronidase
	
	
		血清粘蛋白人甲狀旁腺相關(guān)蛋白seromucoid
	
	
		活性氧簇人血管緊張素原reactive oxygen species
鈣調(diào)素試劑盒甲氧基鹽酸鹽 98%四氯鄰苯二甲酸酐 98%Anti-FOXJ1/HFH-4  叉頭蛋白J1抗體
	
	
		甜菜堿,無水 98%乙酰溴 97%Anti-FoxP1  叉頭蛋白P1抗體
	
	
		甜菜堿,一水 99%溴代炔 99%Anti-FOXM1/HFH 11  叉頭蛋白M1抗體
	
	
		甜菜堿鹽酸鹽 分析標(biāo)準(zhǔn)品,99.5%三溴化磷 ≥99.99% metals basisAnti-FoxP3  叉頭蛋白P3抗體
	
	
		乙酰酮鈹 97%三溴化磷 99%Anti-FOXO1  叉頭蛋白O1抗體
	
	
		乙酰酮鈷(II) 97%三溴化磷 CP,98.0% Anti-Phospho-FoxO1 (Thr24)/FoxO3a (Thr32)  磷酸化叉頭蛋白家族抗體
	
	
		乙酰酮銅 97%三溴 AR,98%Anti-Phospho-FoxO1 (Ser319)  磷酸化叉頭蛋白家族1抗體
	
	
		乙酰酮鎘 98%二甲 98%Anti-Phospho-FoxO1 (Ser256)  磷酸化叉頭蛋白家族1抗體
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應(yīng)該做標(biāo)準(zhǔn)曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進(jìn)行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1.         加樣:分別設(shè)空白孔、標(biāo)準(zhǔn)孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標(biāo)準(zhǔn)品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標(biāo)板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標(biāo)板加上蓋或覆膜,37℃反應(yīng)120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標(biāo)準(zhǔn)品溶液。
2.         棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標(biāo)記抗體工作液100μl(取1μl生物素標(biāo)記抗體加99μl生物素標(biāo)記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4.         每孔加辣根過氧化物酶標(biāo)記親和素工作液(同生物素標(biāo)記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5.         溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6.         依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標(biāo)準(zhǔn)品的前3-4孔有明顯的梯度藍(lán)色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7.         依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(yīng)(此時藍(lán)色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應(yīng)盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準(zhǔn)確性,底物反應(yīng)時間到后應(yīng)盡快加入終止液。
8.         用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進(jìn)行檢測。