公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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鈣非依賴型磷脂酶A2試劑盒
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規(guī)格
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48T/96T
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貨號
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BH-0012106
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保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
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2400 ng/L
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5 號標準品
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150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀???液
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1200ng/L
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4 號標準品
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150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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600ng/L
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3 號標準品
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150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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300ng/L
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2 號標準品
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150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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150ng/L
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1 號標準品
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150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
N鈣粘著蛋白;上皮性鈣黏附蛋白大鼠C肽N-Cadherin
溶酶體關聯(lián)膜蛋白1人去氨加壓素/1-去氨基-8-右旋-精氨酸加壓素Lysosomal Associated Membrane Protein 1
3甲基組氨酸大鼠絨毛膜促性腺3-methylhistidine
卵磷脂人蕈堿型乙酰膽堿受體亞型M3Lecithin
血小板內(nèi)皮細胞粘附分子6大鼠促黃體Platelet;Endothelial Cell Adhesion Molecule 6
蛋白質(zhì)二硫鍵異構酶大鼠抗心肌抗體protein disulfide isomerase
可溶性細胞活化基因-3人睪酮受體soluble 1ymphocyte activation gene3
含NLR家族CARD域蛋白4大鼠抗中性粒/中心體抗體NLR family CARD domain-containing protein 4
N(ε)羧乙基賴氨酸人蕈堿型乙酰膽堿受體N(epsilon)(carboxyethyl)lysine
可溶性淀粉酶前體蛋白β大鼠磷脂酰肌抗體IgG/IgMsoluble amyloid precursor protein β
可溶性鳥苷酸環(huán)化酶人糖蛋白49Asoluble guanylate cyclase
環(huán)磷酰胺人抑制素β-BCyclophosphamide
心臟特異性同源盒轉錄因子NKX2.5大鼠復合前列腺特異性抗原Homeobox protein Nkx-2.5
線粒體呼吸鏈復合物Ⅴ大鼠胰蛋白酶complex Ⅴ
胼胝質(zhì)合成酶人食欲素受體glucan synthase-Like 5;
鈣非依賴型磷脂酶A2試劑盒曙紅Y,溶 AR碳酸鈉,十水 AR,99%Anti-APOA1 載脂蛋白A1抗體
曙紅Y(水溶) ACS氟酸 AR,40.0%Anti-FASN 脂肪酸合成酶抗體
熒光素 AR,90%二甲苯 GCS,≥99.9%(GC)(二甲苯異構體+乙基苯)Anti-Apo B 載脂蛋白B抗體
熒光素 IND二甲苯 AR,99%(二甲苯異構體+乙基苯Anti-FAST kinase Fas活化的絲/蘇氨酸激酶抗體
熒光素鈉 AR二甲苯 CP,98%(二甲苯異構體+乙基苯)Anti-FasL 兔抗FasL抗體。
吉氏色素 BS二甲苯 HPLCAnti-fatty acid elongase 脂肪酸延長酶抗體
鉻酸鉛 AR,98.0%二甲苯 ACS, 98.5% (isomers plus ethylbenzene)Anti-Fc gamma RII a/CD32a 球蛋白G Fc段受體Ⅱ抗體
甲基藍 ARACS, 98.5+% (isomers plus ethylbenzene)Anti-FBN1 原纖維蛋白1抗體
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。