樣本要求:
1.標本采集后盡早進行提取,提取按相關(guān)文獻進行,提取后應盡快進行實驗。若不能馬上進行試驗,可將標本放于-20℃保存,但應避免反復凍融。
2.不能檢測含 NaN3 的樣品,因 NaN3 抑制辣根過氧化物酶的(HRP)活性。
公司產(chǎn)品僅供體外研究使用,不用于臨床診斷!
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產(chǎn)品名稱
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α1酸性糖蛋白試劑盒
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規(guī)格
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48T/96T
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貨號
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BH-0011813
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保存條件:2-8℃(長期不使用時,部分試劑應放在-20℃條件下)。
有效期:6個月
存儲運輸:低溫避光,請勿重壓,輕拿輕放(現(xiàn)貨供應,一般為快遞運輸,江浙滬隔天到,外地及偏遠地方三至五天時間到貨。)
Elisa試劑盒可測種屬:人、大鼠、小鼠、兔子、豬、犬、猴、馬、牛、羊、雞、鴨、魚等。
Elisa試劑盒適用范圍:此試劑盒僅用于科研實驗,禁用于臨床。
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2400 ng/L
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5 號標準品
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150μl 的原倍標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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1200ng/L
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4 號標準品
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150μl 的 5 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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600ng/L
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3 號標準品
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150μl 的 4 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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300ng/L
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2 號標準品
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150μl 的 3 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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150ng/L
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1 號標準品
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150μl 的 2 號標準品加入 150μl 標準品稀釋液
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組成及試劑配制 :
1. 酶聯(lián)板:一塊(96孔)
2. 標準品(凍干品):2瓶,每瓶臨用前以樣品稀釋液稀釋至1ml,蓋好后靜置10分鐘以上,然后反復顛倒/搓動以助溶解,其濃度為100 ng/ml,做系列倍比稀釋(注:不要直接在板中進行倍比稀釋)后,分別稀釋成100 ng/ml,50 ng/ml,25 ng/ml,12.5 ng/ml,6.25 ng/ml,3.12 ng/ml,1.56 ng/ml,樣品稀釋液直接作為標準濃度0 ng/ml,臨用前15分鐘內(nèi)配制。
如配制50 ng/ml標準品:取0.5ml (不要少于0.5ml ) 100 ng/ml的上述標準品加入含有0.5ml樣品稀釋液的Eppendorf管中,混勻即可,其余濃度以此類推。
3. 樣品稀釋液:1×20ml/瓶。
4. 檢測稀釋液A:1×10ml/瓶。
5. 檢測稀釋液B:1×10ml/瓶。
6. 檢測溶液A:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液A 1:100稀釋,稀釋前根據(jù)預先計算好的每次實驗所需的總量配制(100ul/孔),實際配制時應多配制0.1-0.2ml。如10ul檢測溶液A加990ul檢測稀釋液A的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制。
7. 檢測溶液B:1×120ul/瓶(1:100)臨用前以檢測稀釋液B 1:100稀釋。稀釋方法同檢測溶液A。
8. 底物溶液:1×10ml/瓶。
9. 濃洗滌液:1×30ml/瓶,使用時每瓶用蒸餾水稀釋25倍。
10. 終止液:1×10ml/瓶(2N H2SO4)。

樣本收集及儲存:
1. 細胞培養(yǎng)上清:
將細胞培養(yǎng)基移至無菌離心管,在 4℃條件下 1000 ×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
2. 血清樣本:
室溫血液自然凝固 20 min 后,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24 小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),保存過程中如有沉淀,請再次離心,避免反復凍融。
3. 血漿樣本:
將全血收集到含抗血凝劑的管中,根據(jù)標本的實際要求選擇 EDTA,檸檬酸鈉或肝素作為抗凝劑,混合 20 min,在 4℃條件下 1000×g 離心 10 min,然后將上清等量分裝于小 EP 管并于-20℃下保存(24小時內(nèi)檢測可放入 2-8℃儲存),避免反復凍融。
操作步驟:
實驗開始前,請?zhí)崆芭渲煤盟性噭噭┗驑悠废♂寱r,均需混勻,混勻時盡量避免起泡。每次檢測都應該做標準曲線。如樣品濃度過高時,用樣品稀釋液進行稀釋,以使樣品符合試劑盒的檢測范圍。
1. 加樣:分別設(shè)空白孔、標準孔、待測樣品孔??瞻卓准訕悠废♂屢?00μl,余孔分別加標準品或待測樣品100μl,注意不要有氣泡,加樣將樣品加于酶標板孔底部,盡量不觸及孔壁,輕輕晃動混勻,酶標板加上蓋或覆膜,37℃反應120分鐘。
為保證實驗結(jié)果有效性,每次實驗請使用新的標準品溶液。
2. 棄去液體,甩干,不用洗滌。每孔加生物素標記抗體工作液100μl(取1μl生物素標記抗體加99μl生物素標記抗體稀釋液的比例配制,輕輕混勻,在使用前一小時內(nèi)配制),37℃,60分鐘。
3. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
4. 每孔加辣根過氧化物酶標記親和素工作液(同生物素標記抗體工作液)100μl,37℃,60分鐘。
5. 溫育60分鐘后,棄去孔內(nèi)液體,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分鐘,350μl/每孔,甩干。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,37℃避光顯色(30分鐘內(nèi),此時肉眼可見標準品的前3-4孔有明顯的梯度藍色,后3-4孔梯度不明顯,即可終止)。
7. 依序每孔加終止溶液50μl,終止反應(此時藍色立轉(zhuǎn)黃色)。終止液的加入順序應盡量與底物液的加入順序相同。為了保證實驗結(jié)果的準確性,底物反應時間到后應盡快加入終止液。
8. 用酶聯(lián)儀在450nm波長依序測量各孔的光密度(OD值)。 在加終止液后15分鐘以內(nèi)進行檢測。
新孢子蟲病抗體PE-Cy3標記的羊抗人IgMNeosporosis antibody
骨成型蛋白1PE-CY5標記的羊抗人IgMBone morphogenetic protein 1
脯氨酸羥化酶APC標記的羊抗人IgMpmlyl-4-hygroxylase
甲型肝炎病毒IgG抗體Alexa Fluor 350標記的羊抗人IgMHepatitis A virus IgG Antibody
半胱氨酸蛋白酶3Alexa Fluor 488標記的羊抗人IgMCaspase 3
半胱氨酸蛋白酶6Alexa Fluor 555標記的羊抗人IgMCaspase 6
半胱氨酸蛋白酶8Alexa Fluor 647標記的羊抗人IgMCaspase 8
半胱氨酸蛋白酶9PE-Cy5.5標記的羊抗人IgMCaspase 9
半胱氨酸蛋白酶7PE-Cy7標記的羊抗人IgMCaspase 7
脂氧合酶Cy3標記的羊抗人IgMLipoxygenase
顆粒酶K堿性磷酸酶(AP)標記的羊抗人IgMGzms-K
顆粒酶K辣根過氧化物酶標記的羊抗人IgMGzms-K
膜攻擊復合物辣根過氧化物酶標記的小鼠抗人IgGmembrane attack complex
人類嗜T細胞Ⅰ型病毒IgG抗體堿性磷酸酶(AP)標記的小鼠抗人IgGHuman T-lymphotropicvirusⅠ IgG
干擾素誘導蛋白44羅丹明標記的小鼠抗人IgGinterferon-inducible protein 44
α1酸性糖蛋白試劑盒Saccharomyces cerevisiae胰島素樣生長因子結(jié)合蛋白4檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae酪氨酸檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae周期素依賴性激酶抑制劑P16INK4a檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae腎母過度表達基因檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae糖原合酶激酶3α檢測??劑盒
Saccharomyces cerevisiae磷酸化糖原合成酶激酶3α檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae抗酸性磷酸酶2b檢測試劑盒
Saccharomyces cerevisiae衰老相關(guān)β-半乳糖苷酶檢測試劑盒