使用及效果:
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產品參數(shù):
產品名稱: 轉基因植物Bar基因檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64507
公司產品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
堀越氏芽孢桿菌26S蛋白酶調節(jié)亞型p55抗體Anti-Cd59 Antibody6-羥多巴(6-OHDA)ELISA試劑盒
類芽孢桿菌過氧化物酶肌氨酸氧化酶抗體Anti-CD58 Antibody60S核糖體蛋白L36a-樣(RPL36AL)ELISA試劑盒
白色短單胞菌prox-1抗體Anti-CD55 Antibody(PB0508)60S核糖體蛋白L17(RPL17)ELISA試劑盒
荷葉離褶傘(都不提供)周圍神經髓鞘蛋白2抗體Anti-CD59 Antibody5脂加氧酶(5-LO/LOX)ELISA試劑盒
芽孢桿菌蛋白激酶R抗體Anti-Cd63 Antibody5羥吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒
黃曲霉胰脂肪酶抗體Anti-CD63 Antibody(PB0236)5-羥色受體6(HTR6)ELISA試劑盒
粉質棒束孢前列腺素E2受體2抗體Anti-CD68 Antibody5羥色(5-HT)ELISA試劑盒
豇豆慢生根瘤菌蛋白酶體激活因子PA28γ抗體Anti-CD68 Antibody5羥基吲哚乙酸(5-HIAA)ELISA試劑盒
釀酒酵母受磷蛋白/心臟磷蛋白抗體Anti-CD68 Antibody5羥二十碳四烯酸(5-HETE)ELISA試劑盒
粘質沙雷氏菌肽聚糖識別蛋白1抗體Anti-CD7 Antibody5核苷酸酶(5-NT)ELISA試劑盒
芽孢桿菌屬前脹亡受體誘導膜損傷蛋白抗體Anti-CD7 Antibody5'-AMP活化蛋白激酶α-2催化亞基(PRKAA2)ELISA試劑盒
白地霉多腺苷二磷酸多聚酶3抗體/多聚ADP-核糖聚合酶3Anti-CD69 Antibody4-羥基壬烯酸(HNE)ELISA試劑盒
短小芽孢桿菌多腺苷二磷酸多聚酶4抗體/多聚ADP-核糖聚合酶4Anti-CD7 Antibody40S核糖體蛋白S19(RPS19)ELISA試劑盒
膠孢聚腺苷酸養(yǎng)結合蛋白4抗體Anti-CD72 Antibody3氧代5α類固4脫氫酶2(SRD5A2)ELISA試劑盒
富士山紅酵母肝再生磷酸酯酶2抗體Anti-CD71(TFRC) Antibody3型1-磷酸鞘氨受體(S1P3)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌蛋白Z抗體Anti-CD72 Antibody3-硝基酪氨酸(3-NT)ELISA試劑盒
轉基因植物Bar基因檢測試劑盒(熒光-PCR法)人抗甲狀腺球蛋白抗體(ATGA/TGAB)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒Human MAGEB1 ELISA Kit血管**素3/血管**素4抗體
人抗甲狀腺過氧化物酶抗體(TPO-Ab)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒 Human MAGEB18 ELISA Kit膜粘連蛋白 I抗體
人胰島素樣生長因子2-mRNA結合蛋白3(IGF2BP3)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒 Human MAGEB4 ELISA Kit膜粘連蛋白 Ⅱ抗體
人肌聯(lián)蛋白(TTN)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒 Human LZTS2 ELISA Kit活化轉錄因子1抗體
人胰島素樣生長因子2受體(IGF2R)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒Human LZTS2 ELISA Kit水通道蛋白4抗體
人胰島素樣生長因子酸不穩(wěn)定亞基(IGFALS)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒 Human MAB21L2 ELISA Kit活化復制因子2抗體
人胰島素樣生長因子結合蛋白1(IGFBP-1)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒Human MAGEB4 ELISA Kit腺苷單磷酸活化蛋白激酶β1抗體
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現(xiàn)二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
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