使用及效果:
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產品參數:
產品名稱: 轉基因水稻LLRICE601檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64504
公司產品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結合是關鍵。引物與模板的結合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結合(復性)可以在較高的溫度下進行,結合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產物的**量是以指數方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術概論。

PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關鍵,PCR 產物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
灰樹花磷酸化血小板源性生長因子受體αAnti-CD209 AntibodyAgouti相關蛋白(AGRP)ELISA試劑盒
果蠅克魯維酵母兒茶酚氧化酶PPO抗體Anti-CD24 AntibodyAFG3樣蛋白2(AFG3L2)ELISA試劑盒
云芝蛋白激酶C抗體Anti-CD244 AntibodyAdropin(ENHO)ELISA試劑盒
白囊耙齒菌脂滴包被蛋白Perilipin-A抗體Anti-CD244 AntibodyADP-核糖基化因子5(ARF5)ELISA試劑盒
王氏薄孔菌多聚腺苷酸結合蛋白抗體Anti-CD274 AntibodyADP-核糖基化因子4(ARF4)ELISA試劑盒
焦瑞身氏溶桿菌核纖層蛋白A相關結構蛋白1抗體Anti-CD274 AntibodyADAM金屬肽酶含血小板反應蛋白1基元4(ADAMTS4)ELISA試劑盒
冷彎曲菌PCID2蛋白抗體Anti-CD2AP AntibodyⅣ型前膠原肽(PⅣNP)ELISA試劑盒
三葉草根瘤菌腺苷酸硫酸激酶1抗體Anti-CD27 Antibody(PB0974)Ⅳ型前膠原氨基末端肽(PⅣNP)ELISA試劑盒
謝瓦散囊菌腺苷酸硫酸激酶2抗體Anti-CD2AP AntibodyⅣ型膠原(Col Ⅳ)ELISA試劑盒
Winogradskyella multivorans 蛋白酶激活受體3抗體Anti-CD274 AntibodyⅣ型膠原(Ⅳ-C)ELISA試劑盒
黑曲霉MAWD結合蛋白抗體Anti-CD274 AntibodyⅢ型前膠原肽(PⅢP)ELISA試劑盒
蠟樣芽孢桿菌PCID1蛋白抗體Anti-CD2AP AntibodyⅢ型前膠原肽(PⅢNP)ELISA試劑盒
黑姬菇PDZ結構域PDZK6蛋白抗體Anti-CD30/TNFRSF8 AntibodyⅢ型前膠原氨基末端肽(PⅢNP)ELISA試劑盒
白橙蓋鵝膏菌吡哆激酶抗體Anti-CD33 AntibodyⅢ型前膠原氨基端肽(PⅢNT)ELISA試劑盒
黃溶鏈霉菌PDZ結構域PDZK1蛋白抗體Anti-CD34 AntibodyⅢ型前膠原C端肽(PⅢCP)ELISA試劑盒
Sphingomonas yunnanensis前列腺癌激活蛋白抗體Anti-CD33 Antibody(PB0975)Ⅲ型前膠原(HPCⅢ)ELISA試劑盒
轉基因水稻LLRICE601檢測試劑盒(熒光-PCR法)人血紅蛋白(HB)酶聯(lián)免吸附測定試劑盒Human MARK4 ELISA Kit錨定蛋白樣蛋白1抗體
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人鈣/鈣調蛋白依賴性蛋白激酶IIα(CAMK2α)酶聯(lián)免吸附測定試劑盒Human MBIP ELISA Kit頂體前體蛋白抗體
人Bcl2關聯(lián)永生基因3(BAG3)酶聯(lián)免吸附測定試劑盒Human MARS ELISA Kit黑色素瘤缺失樣蛋白1抗體
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人硫酸乙酰肝素蛋白多糖(HSPG)酶聯(lián)免吸附測定試劑盒Human MARVELD3 ELISA Kit抑癌基因ras同源家族1抗體
設計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內部出現二級結構,避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數據庫的其它序列無明顯同源性。
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