使用及效果：
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系：
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱： 轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格： 50T
貨號：BH-P64503
公司產(chǎn)品僅用于科研分類：熒光定量PCR試劑盒
儲存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞；在病毒的檢測中，PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位)；在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
PCR反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
桔青霉磷酸葡萄糖酸內(nèi)酯酶抗體Anti-CD19 Antibody(PB0404)B-趨化因子1(BLC-1/CXCL13)ELISA試劑盒
多食鞘氨桿菌蛋白磷酸酶2C亞型α抗體Anti-CD1D AntibodyB抗原(CD20)ELISA試劑盒
天牛微桿菌蛋白激酶C nu型抗體Anti-CD1A AntibodyBH3結(jié)構(gòu)域凋亡誘導(dǎo)蛋白(Bid)ELISA試劑盒
寡單胞菌磷酸化蛋白激酶C nu型抗體Anti-CD1C AntibodyBcl-2樣蛋白1(BCL2L1)ELISA試劑盒
熱吸水鏈霉菌磷酸化磷脂酰肌激酶3催化亞單位3抗體Anti-CD1A AntibodyBcl-2相關(guān)X蛋白(BAX)ELISA試劑盒
釀酒酵母磷酸甘油酸脫氫酶抗體Anti-CD19 AntibodyA組鏈球菌菌壁多糖抗體(ASP)ELISA試劑盒
長谷川赤擔(dān)孢酵母磷酸化泌乳素抗體Anti-CD1D AntibodyA組鏈球菌多糖抗原(ASP Ag)ELISA試劑盒
莫哈韋芽孢桿菌半胱天冬酶-3酶原抗體Anti-CD2 AntibodyA激酶PRKA錨定蛋白12(Akap12)ELISA試劑盒
釀酒酵母質(zhì)磷酸酶1抗體Anti-CD2 AntibodyAT豐富結(jié)合域1A(ARID1A)ELISA試劑盒
嗜熱液化芽孢桿菌維生素D低磷性佝僂病蛋白Anti-Cd2 AntibodyATP酶(ATP)ELISA試劑盒
山崗單胞菌多通道膜蛋白PTCHD2抗體Anti-CD22 AntibodyApelin12(AP12)ELISA試劑盒
薄褐孔菌修補(bǔ)相關(guān)蛋白PTCHD3抗體Anti-CD209 AntibodyApelin 36(AP36)ELISA試劑盒
蠟樣芽孢桿菌髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體Anti-CD200 Antibodyapelin 13(AP13)ELISA試劑盒
芽胞桿菌磷酸化髓鞘轉(zhuǎn)錄因子1激酶抗體Anti-CD22 Antibody(PB0731)apelin 12(AP12)ELISA試劑盒
釀酒酵母磷酸化血小板源性生長因子受體αAnti-CD209 AntibodyAP-5復(fù)合物β亞基(PP1030)ELISA試劑盒
石狀青霉磷酸化血小板源性生長因子受體αAnti-CD22 AntibodyAlpha-D 酚/維生素E(Alpha-D TPL)ELISA試劑盒
轉(zhuǎn)基因水稻LLRICE62檢測試劑盒(熒光-PCR法)人胰島素樣蛋白3(INSL3)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒Human MAGEF1 ELISA Kit載脂蛋白J抗體
人胰島素樣蛋白5(INSL5)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒Human MAGED4 ELISA Kit載脂蛋白H抗體
人鈣非依賴性磷脂酶A2(iPLA2)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒Human MAGEH1 ELISA Kit二磷酸腺苷核糖基轉(zhuǎn)移酶4抗體
人鳥苷酸環(huán)化酶激活因子2B(GUCA2B)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒 Human MBD2 ELISA KitAKIRIN2蛋白抗體
人顆粒酶K(GZMK)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒 Human MC3R(Melanocortin receptor 3) ELISA KitADP核糖基化樣因子8B抗體
人花生四烯酸脂加氧酶3(ALOXE3)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒 Human MBD3(Methyl-CpG-binding domain protein 3) ELISA Kit三磷酸腺苷酶家族蛋白2抗體
人色素P450家族成員26A1(CYP26A1)酶聯(lián)疫吸附測定試劑盒 Human MBD4 ELISA KitAKIRIN1蛋白抗體
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布，避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)個堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對，以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn)，這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
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