使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 鼠源性成分(Mouse)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64487
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則???
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
謝氏酸桿菌磷酸化蛋白激酶C抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgG(β2-GP1 Ab IgG)ELISA試劑盒
蛹蟲草(北冬蟲夏草,北蟲草)磷酸化蛋白激酶C抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgA/G/M(β2-GP1 IgA/G/M)ELISA試劑盒
嗜鹽棲鹽水芽孢桿菌磷酸化腫瘤抑制基因PTEN抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白1抗體IgA(β2-GP1 Ab IgA)ELISA試劑盒
腸道致病性大腸埃希氏菌磷酸化磷脂酰肌激酶催化亞單位A抗體Anti-BIRC5 Antibodyβ2糖蛋白(β2-GP)ELISA試劑盒
虎掌菌1號*磷酸化磷脂酰肌激酶抗體Anti-BIRC7 Antibodyβ1,4-N-乙酰氨基半乳糖轉(zhuǎn)移酶2(B4GALNT2)ELISA試劑盒
德里腐霉磷酸化磷脂酰肌激酶抗體Anti-BMI1 Antibodyα烯化酶(αENOL)ELISA試劑盒
林芝假絲酵母磷酸化蛋白激酶C抗體Anti-BMI1 Antibodyα烯化酶(ENO1/ENO1L1/MBPB1/MPB1)ELISA試劑盒
褐孢大禿馬勃磷酸化蛋白激酶C抗體Anti-BIRC7 Antibodyα突觸核蛋白(α-SYN)ELISA試劑盒
微小桿菌磷酸化腺苷單磷酸活化蛋白激酶α2抗體Anti-BMP15 Antibodyα酮戊二酸脫氫酶(α-KGDHC)ELISA試劑盒
香菇蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗體Anti-BMP2 Antibodyα乳清蛋白(α-La)ELISA試劑盒
鏈霉菌磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗體Anti-BMP4 Antibodyα葡萄糖苷酶(α-glucosidase)ELISA試劑盒
矮小傘枝霉磷酸化蛋白酪氨酸磷酸酶1C抗體Anti-BMP2 Antibody(PB0727)α葡萄糖苷酶(α-Glu)ELISA試劑盒
大腸埃希菌磷脂酰肌激酶3催化亞單位3抗體Anti-BMP15 Antibodyα平滑肌肌動蛋白(α-SMA)ELISA試劑盒
單梗頭孢霉屬磷酸化磷脂酰肌激酶3催化亞單位3抗體Anti-BMP4 Antibodyα-內(nèi)肽(α-EP)ELISA試劑盒
毛尖蘑磷酸化磷脂酰肌激酶3催化亞單位3抗體Anti-BMP4 Antibodyα肌動蛋白(α Actin)ELISA試劑盒
Virgibacillus磷酸化蛋白激酶C theta抗體Anti-BMP5 Antibodyα橫紋肌肌動蛋白(α-SCA)ELISA試劑盒
鼠源性成分(Mouse)檢測試劑盒(熒光-PCR法)人抗****(ADH)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human LCK ELISA Kit溶血磷脂?;D(zhuǎn)移酶抗體
人脂聯(lián)素受體1(ADIPOR1)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒 Human LCA5 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)及SAM結(jié)構(gòu)域蛋白3抗體
人脂聯(lián)素受體2(ADIPOR2)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒 Human LBR ELISA Kit磷酸化間變型**瘤激酶抗體
人腎上腺髓質(zhì)素(ADM)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒 Human LCE1B ELISA Kit?;o酶A脫氫酶很長鏈抗體
人腎上腺素能α1A受體(ADRA1A)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human LARS ELISA Kit信號轉(zhuǎn)導(dǎo)銜接結(jié)合蛋白抗體
人脂肪分化相關(guān)蛋白(ADRP)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒 Human LARS2 ELISA Kit錨蛋白重復(fù)序列-因子信號抑制物盒蛋白家族3抗體
人白介素20(IL-20)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human LARS ELISA Kit有絲分裂激酶B抗體
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。