使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 雞源性成分(Chicken)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號(hào):BH-P64477
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對(duì)原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過(guò)選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬(wàn)個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測(cè)中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無(wú)放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
水稻節(jié)桿菌磷酸化磷脂酰肌激酶抗體Anti-AQP6 Antibody白球蛋白樣受體亞家族B成員4(LILRB4)ELISA試劑盒
彎孢菌磷酸化蛋白激酶C α/β2抗體Anti-AQP7 Antibody白抗原DR(HLA-DR)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌蛋白激酶C α抗體Anti-AQP8 Antibody白抗原B27(HLA-B27)ELISA試劑盒
琉球曲霉磷酸化酮酸激酶M2抗體Anti-AQP9 Antibody白活化黏附因子(ALCAM)ELISA試劑盒
近綠曲霉磷酸化蛋白激酶R抗體Anti-AQP9 Antibody白共同抗原(LCA/CD45)ELISA試劑盒
綠垂曲霉磷酸化蛋白激酶R抗體Anti-AQP9 Antibody白彈性蛋白酶(HLE)ELISA試劑盒
球毛殼磷酸化蛋白激酶R抗體Anti-AR Antibody白色***(C.albicans)ELISA試劑盒
直絲淡藍(lán)褐鏈霉菌磷酸化磷酯酶Cγ2抗體Anti-ARAF Antibody白三烯E4(LTE4)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌磷酸化磷酯酶Cγ2抗體Anti-ARC Antibody白三烯D4(LTD4)ELISA試劑盒
單孢蟲(chóng)道酵母磷酯酶Cγ1抗體Anti-ARG1 Antibody白三烯C4(LTC4)ELISA試劑盒
橘色硬皮馬勃磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體α/β抗體Anti-AREG Antibody白三烯B4(LTB4)ELISA試劑盒
蛛網(wǎng)不顯枝霉中華變種磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體Anti-ARG1 Antibody白介素增強(qiáng)子結(jié)合因子2(ILF2/NF45/PRO3063)ELISA試劑盒
需土節(jié)桿菌磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體Anti-ARFGAP1 Antibody白介素受體相關(guān)激酶(IRAK)ELISA試劑盒
葡萄球菌屬磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體Anti-ARF6 Antibody白介素9(IL-9)ELISA試劑盒
草假單胞菌磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體Anti-ARG2 Antibody白介素8(IL-8/CXCL8)ELISA試劑盒
豌豆根瘤菌磷酸化血小板源性生長(zhǎng)因子受體-B抗體Anti-ARHGEF1 Antibody(PB1099)白介素8(IL-8)ELISA試劑盒
雞源性成分(Chicken)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)人纖維連接蛋白(FN)酶聯(lián)**吸附測(cè)定試劑盒Human LRDD ELISA Kit5-氨基乙酰酸合酶1抗體
人白介素9(IL-9)酶聯(lián)**吸附測(cè)定試劑盒Human LRPAP1 ELISA Kitp53凋亡激蛋白1抗體
人I型前膠原(PCI)酶聯(lián)**吸附測(cè)定試劑盒Human LRR 1(Leucine-rich repeat protein 1) ELISA KitP53凋亡激蛋白2抗體
人III型前膠原(PCIII)酶聯(lián)**吸附測(cè)定試劑盒Human LRRC1 ELISA Kit激活素受體2B抗體
人III型前膠原氨基端原肽(PIIINP)酶聯(lián)**吸附測(cè)定試劑盒Human LPIN2 ELISA KitAIMP2抗體
人基質(zhì)金屬蛋白酶組織抑制因子1(TIMP-1)酶聯(lián)**吸附測(cè)定試劑盒Human LPHN3 ELISA Kit乙酰膽堿酶抗體
人I型前膠原氨基端原肽(PINP)酶聯(lián)**吸附測(cè)定試劑盒Human LPPR2 ELISA Kit5-氨基乙酰酸合酶1抗體
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長(zhǎng)度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過(guò)多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì),以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫(kù)的其它序列無(wú)明顯同源性。