使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 羊源性成分(Ovine)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64476
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)??及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
蘇云金芽胞桿菌印第安那亞種鈣粘蛋白21抗體Anti-APRT Antibody胞外超氧化物歧化酶(SOD3)ELISA試劑盒
解脂亞羅酵母鈣粘蛋白β12抗體Anti-AQP10 Antibody胞漿型磷脂酶A2-α(cPLA2-α)ELISA試劑盒
脆泊氏孔菌磷酸化磷脂酰肌激酶調(diào)節(jié)亞單位gamma抗體Anti-APRT Antibody胞漿型磷脂酶A2(cPLA2)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌甲狀旁腺相關(guān)蛋白抗體Anti-AQP1 Antibody胞漿球蛋白(CIg)ELISA試劑盒
粉紅擲孢酵母蛋白酪氨酸磷酸酶-1B抗體Anti-AQP1 Antibody(PB0498)伴侶蛋白10(CPN10)ELISA試劑盒
短乳桿菌*Cyclin A1相互作用蛋白抗體Anti-AQP11 Antibody半乳糖凝集素7(Gal-7)ELISA試劑盒
芳香鐮孢野生型P53誘導(dǎo)基因1單克隆抗體Anti-AQP3 Antibody半乳糖凝集素3(Galectin3)ELISA試劑盒
清酒假絲酵母多囊腎蛋白1抗體Anti-AQP2 Antibody(PB0499)半乳糖(Galactose)ELISA試劑盒
大腸埃希氏菌○抗原微量凝集定型血清診斷液 ○7多囊腎蛋白2抗體Anti-AQP3 Antibody半胱氨酰白三烯(CysLTs)ELISA試劑盒
Marisediminicola凋亡相關(guān)蛋白4抗體Anti-AQP2 Antibody半胱氨酸蛋白酶抑制劑/胱抑素C(Cys-C)ELISA試劑盒
硬結(jié)節(jié)桿菌磷脂酰肌激酶催化亞單位D抗體Anti-AQP4 Antibody板層素相關(guān)多肽2亞型α(TMPO)ELISA試劑盒
栗疫菌血小板源性生長因子受體β樣蛋白抗體Anti-AQP5 Antibody瘢痕性天皰瘡抗體(CP)ELISA試劑盒
運動節(jié)桿菌磷酸化磷酯酶Cβ3抗體Anti-AQP4 Antibody白血病抑制因子受體(LIFR)ELISA試劑盒
肉色香蘑磷酸化蛋白激酶樣內(nèi)質(zhì)網(wǎng)激酶抗體Anti-AQP4 Antibody(PB0500)白血病抑制因子(LIF)ELISA試劑盒
黑曲霉變種6磷酸果糖激酶2抗體Anti-AQP5 Antibody白酯酶(LE)ELISA試劑盒
釀酒酵母磷酸化6磷酸果糖激酶2抗體Anti-AQP6 Antibody白調(diào)節(jié)素(LR)ELISA試劑盒
羊源性成分(Ovine)檢測試劑盒(熒光-PCR法)人**球蛋白G(IgG)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human LRRC52 ELISA Kit腎上腺髓質(zhì)素抗體
人血清轉(zhuǎn)鐵蛋白(TF)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human LRRC20 ELISA Kit腺苷受體A3抗體
人卵泡抑素樣蛋白1(FSTL1)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human LRCH3 ELISA KitADRA2腎上腺素能受體2抗體
人賴氨酰氧化酶(LOX)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒 Human LRCH2 ELISA Kit腎上腺素能受體β1抗體
人絨毛膜促性腺**(CG)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human LRPPRC ELISA Kit腎上腺素能受體β2/β2-AR抗體
人生長**(GH)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human LRP2BP ELISA Kit晚期糖基化終末產(chǎn)物抗體
人IV型膠原(COL4)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human LRMP ELISA Kit軟骨蛋白聚糖抗體
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。