使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 寨卡(zika)病毒檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64465
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
球孢白僵菌原鈣粘蛋白γA3抗體Anti-AGER Antibody(PB0530)蛋白 DJ-1(PARK7)ELISA試劑盒
杏鮑菇血小板源性生長因子BB抗體Anti-AGFG1 Antibody彈性蛋白酶(Elastase)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌枯草亞種胰島素促進(jìn)因子抗體(胰十二指腸同源異型盒蛋白)Anti-AGO1 Antibody彈性蛋白(ELN)ELISA試劑盒
枝彎孢乙?;?/span>P53(Lys382)抗體Anti-AGO2 Antibody膽酸(Cholic acid)ELISA試劑盒
圓酵母屬磷酸化過氧化酶活化增生受體γ抗體Anti-AGO4 Antibody膽酸(CA)ELISA試劑盒
蘋果輪紋病磷酸化腫瘤抑制基因P53抗體Anti-AGRP Antibody膽囊收縮素/縮膽囊素八肽(CCK-8)ELISA試劑盒
小單孢菌腺苷酸環(huán)化酶激活肽受體1抗體Anti-AGRN Antibody膽囊收縮素/腸促胰酶肽(CCK)ELISA試劑盒
鼠傷寒沙門氏菌關(guān)節(jié)炎相關(guān)基因抗體Anti-AGR2 Antibody膽囊收縮素(CCK)ELISA試劑盒
栗疫菌血小板活化因子抗體Anti-AGT Antibody膽堿轉(zhuǎn)運(yùn)體樣蛋白4(SLC44A4)ELISA試劑盒
假單胞菌蛋白酶激活受體-1抗體Anti-AHR Antibody膽堿乙酰轉(zhuǎn)移酶(ChAT)ELISA試劑盒
利古里亞游動放線菌蛋白酶激活受體-2抗體Anti-AGT Antibody膽堿乙酰化酶(CHAc)ELISA試劑盒
釀酒酵母蛋白酶活化受體4抗體Anti-AHR Antibody膽堿磷酸甘油酯(PC/CPG)ELISA試劑盒
豬布魯氏菌多腺苷二磷酸多聚酶抗體/多聚ADP-核糖聚合酶1Anti-AGTR1 Antibody膽固酯轉(zhuǎn)移蛋白(CETP)ELISA試劑盒
蠟狀芽孢桿菌配對盒基因3抗體Anti-AHR Antibody膽固7α-羥化酶(CYP7A)ELISA試劑盒
釀酒酵母配對盒基因8抗體Anti-AGTR1 Antibody膽固(CH)ELISA試劑盒
貝萊斯芽胞桿菌配對盒基因9抗體Anti-AHR Antibody單絲氨酸蛋白激酶1(LIMK1)ELISA試劑盒
寨卡(zika)病毒檢測試劑盒(熒光-PCR法)人生長停滯特異性蛋白6(Gas6)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human MBD2 ELISA Kit分裂周期蛋白5抗體
人粒集落激因子(G-CSF)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human MC3R(Melanocortin receptor 3) ELISA Kitβ淀粉樣肽/Aβ42抗體
人生長分化因子15(GDF15)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human MBD3(Methyl-CpG-binding domain protein 3) ELISA KitADCK4蛋白抗體
人粒巨噬集落激因子(GM-CSF)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒 Human MBD4 ELISA Kit抑癌蛋白AIMP3抗體
人可溶性糖蛋白130(sgp130)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human MBD5(Methyl-CpG-binding domain protein 5) ELISA Kit相關(guān)蛋白AKAP抗體
人肝生長因子(HGF)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒 Human MBIP ELISA Kit蛋白激酶A錨定蛋白6抗體
人β干擾素(IFN-β)酶聯(lián)**吸附測定試劑盒Human MARK4 ELISA Kit肺α/β水解酶蛋白1抗體
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。