PCR反應(yīng)五要素：
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物： 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵，PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上，只要知道任何一段模板DNA序列，就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物，利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
產(chǎn)品參數(shù)：
產(chǎn)品名稱： 人星狀病毒(HastV)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格： 50T
貨號(hào)：BH-P64454
公司產(chǎn)品僅用于科研分類：熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件：-20℃避光保存，避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸：低溫、避光，快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果：
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系：
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10～100pmol
模板DNA 0.1～2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為：
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合；
②堿基配對(duì)原則；
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性；
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對(duì)原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性，使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行，結(jié)合的特異性大大增加，被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū)，其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的，能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測(cè)模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞；在病毒的檢測(cè)中，PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位)；在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡(jiǎn)便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶，一次性地將反應(yīng)液加好后，即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng)，一般在2～4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析，不一定要用同位素，無放射性污染、易推廣。
(4) 對(duì)標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞，DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則：
①引物長(zhǎng)度： 15-30bp，常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度： 以200-500bp為宜，特定條件下可擴(kuò)增長(zhǎng)至10kb的片段。
③引物堿基：G+C含量以40-60%為宜，G+C太少擴(kuò)增效果不佳，G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布，避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu)，避免兩條引物間互補(bǔ)，特別是3’端的互補(bǔ)，否則會(huì)形成引物二聚體，產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基，特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基，應(yīng)嚴(yán)格要求配對(duì)，以避免因末端堿基不配對(duì)而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn)，被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn)，這對(duì)酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性：引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
魯氏接合酵母NADH氧化還原酶輔酶10抗體Human ADAM12(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 12) ELISA Kit鈣調(diào)磷酸酶(CaN)ELISA試劑盒
乳酸乳球菌膜相關(guān)的蛋白質(zhì)HEM2抗體Human CD200(OX-2 membrane glycoprotein) ELISA Kit鈣調(diào)結(jié)合蛋白(CALD)ELISA試劑盒
木伏革菌=佐佐木薄膜革菌跨膜受體蛋白Notch-2抗體Human CCL8(C-C motif chemokine 8) ELISA Kit鈣腔蛋白(CALU)ELISA試劑盒
黃桿菌磷酸化KB抑制蛋白β抗體Human MME(Neprilysin) ELISA Kit鈣聯(lián)蛋白(CNX)ELISA試劑盒
變黑梨花歐文氏菌磷酸化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human ENG(Endoglin) ELISA Kit鈣聯(lián)蛋白(calnexin)ELISA試劑盒
球形節(jié)桿菌泛素樣蛋白NEDD8抗體Human CD147(Extracellular Matrix Metalloproteinase Inducer) ELISA Kit鈣離子通道抗體(VGCC)ELISA試劑盒
擬莖點(diǎn)霉核因子1C型抗體Human CD13(Aminopeptidase N) ELISA Kit鈣結(jié)合蛋白(CR)ELISA試劑盒
釀酒酵母磷酸化神經(jīng)正五聚體1抗體Human sCD163(Soluble Cluster of Differentiation 163) ELISA Kit鈣激活中性蛋白酶6(CAPN6)ELISA試劑盒
黑曲霉RNA結(jié)合蛋白NOB1抗體Human ApoB100(Apolipoprotein B100) ELISA Kit鈣激活中性蛋白酶1(CAPN1)ELISA試劑盒
簡(jiǎn)青霉磷酸化T激活核轉(zhuǎn)錄因子4抗體Human CCL17(C-C motif chemokine 17) ELISA Kit鈣蛋白酶抑制蛋白(CAST)ELISA試劑盒
釀酒酵母膽汁酸受體抗體Human ADAM9(Disintegrin and metalloproteinase domain-containing protein 9) ELISA Kit鈣蛋白酶抑素抗體(ACAST-DⅣ)ELISA試劑盒
蠟樣芽胞桿菌 (蠟狀芽胞桿菌)NFKB激活蛋白抗體Human CCL18(C-C motif chemokine 18) ELISA Kit鈣蛋白酶2(M/II)大亞基(CAPN2)(CAPN2)ELISA試劑盒
根瘤菌NLE1蛋白抗體Human ADAMTS1(A disintegrin and metalloproteinase with thrombospondin motifs 1) ELISA Kit鈣/鈣調(diào)素依賴性蛋白激酶2(CAMK 2)ELISA試劑盒
季也蒙假絲酵母磷酸化一氧化氮合成酶3（內(nèi)皮型）抗體Human MIF(Macrophage migRation inhibitory factor) ELISA Kit富組蛋白(HTN5)ELISA試劑盒
傳染性法氏囊病病磷酸化一氧化氮合成酶3（內(nèi)皮型）抗體Human MICA(MHC class I polypeptide-related sequence A) ELISA Kit富組蛋白(histatin-5)ELISA試劑盒
芽孢桿菌屬磷酸化一氧化氮合成酶3（內(nèi)皮型）抗體Human MIP-3β(Macrophage Inflammatory Protein 3β) ELISA Kit富組氨酸糖蛋白(HRG)ELISA試劑盒
人星狀病毒(HastV)檢測(cè)試劑盒(熒光-PCR法)人α1酸性糖蛋白(α1-AGP)酶聯(lián)疫吸附測(cè)定試劑盒Human Fcγ(Fc Fragment of IgG) ELISA Kit乙脫氫酶家族3成員A1抗體
人血管緊張素轉(zhuǎn)化酶 (ACE)酶聯(lián)疫吸附測(cè)定試劑盒Human miRNA-210 ELISA Kit磷酸化熱休克蛋白β5/αb晶體蛋白質(zhì)/α-晶體蛋白b鏈抗體
人激活素A(ACVA)酶聯(lián)疫吸附測(cè)定試劑盒Human anti-SARS-CoV2(N) IgG ELISA Kitγ2肌動(dòng)蛋白抗體
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人促血管**素1(ANG1)酶聯(lián)疫吸附測(cè)定試劑盒Human anti-SARS-CoV2(N) IgM ELISA Kit激活素受體2A抗體
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