使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 心病毒(SAFV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號(hào):BH-P64453
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲(chǔ)存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。

PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級(jí)的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板。可直接用臨床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
金龜子綠僵菌神經(jīng)調(diào)節(jié)肽S抗體Human ANGPTL4(Angiopoietin-related protein 4) ELISA Kit甘油二酯(DAG)ELISA試劑盒
硫化物氧化假諾卡氏菌分子生物鐘調(diào)控蛋白NOC抗體Human PRB3(Basic Salivary Proline Rich Protein 3) ELISA Kit甘露糖受體(MR)ELISA試劑盒
金黃色葡萄球菌神經(jīng)粘附蛋白NGN抗體Human BTC(Betacellulin) ELISA Kit甘露糖凝集素受體(MBLR)ELISA試劑盒
擬莖點(diǎn)霉神經(jīng)**蛋白Nav1抗體Human BDNF(Brain Derived Neurotrophic Factor) ELISA Kit甘露糖結(jié)合蛋白/甘露糖結(jié)合凝集素(MBP/MBL)ELISA試劑盒
墨汁鬼傘軸索過度生長抑制因子B受體抗體Human BAFF(B-Cell Activating Factor) ELISA Kit甘露糖(MN)ELISA試劑盒
高加索鏈霉菌核受體0相關(guān)蛋白B家族2抗體Human AZU1(Azurocidin) ELISA Kit甘露糖(Mannose)ELISA試劑盒
微膠鐮孢磷酸化DNA修復(fù)蛋白NBS1抗體Human BMP-2(Bone Morphogenetic Protein 2) ELISA Kit甘露聚糖結(jié)合凝集素相關(guān)絲氨酸蛋白酶(MASP)ELISA試劑盒
香菇天冬氨酸蛋白酶ASP4抗體Human PECAM-1(Plaet/Endothelial Cell Adhesion Molecule 1) ELISA Kit甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽1(C4/C2 RA反應(yīng)因子的激活因子)(MASP1)ELISA試劑盒
大腸埃希菌肉豆蔻?;D(zhuǎn)移酶2-N端肽抗體Human ANG2(Angiopoietin-2) ELISA Kit甘膽酸(CG)ELISA試劑盒
芽枝狀枝孢核因子活化T胞漿蛋白2抗體Human TSP-2(Thrombospondin-2) ELISA Kit甘肽/甘素(GAL)ELISA試劑盒
桃干枯殼蕉孢菌突觸粘附分子1抗體Human VEGFR1(Vascular Endothelial Growth Factor Receptor 1) ELISA Kit鈣轉(zhuǎn)運(yùn)ATP酶2C型成員1(ATP2C1)ELISA試劑盒
懷槐多年臥孔菌核孔糖蛋白P62抗體Human PLGF(Placental Growth Factor) ELISA Kit鈣粘蛋白相關(guān)的神經(jīng)受體1(CNR-1)ELISA試劑盒
固氮野野村氏菌神經(jīng)營養(yǎng)因子3抗體Human A2M(Alpha-2-macroglobulin) ELISA Kit鈣依賴性胞漿型磷脂酶A2(iPLA2)ELISA試劑盒
美澳型核果褐腐病菌NEEP21蛋白抗體Human ACE2(Angiotensin-converting enzyme 2) ELISA Kit鈣網(wǎng)蛋白(CRT)ELISA試劑盒
小炭球菌磷酸化谷氨酸受體2B抗體Human Activin A ELISA Kit鈣調(diào)素特異抗體(CAM-ab)ELISA試劑盒
淺多色鏈霉菌磷酸化谷氨酸受體2B抗體Human ACE(Angiotensin I Converting Enzyme) ELISA Kit鈣調(diào)素(CAM)ELISA試劑盒
心病毒(SAFV)檢測試劑盒(熒光-PCR法)性磷酶(AP)標(biāo)記的羊抗小鼠IgM3-溴三氟苯 3-Bromobenzotrifluoride >99.0%(GC)Human, Mouse, Rat
辣根過氧化物酶標(biāo)記的兔抗豬IgG3-溴三氟苯 3-Bromobenzotrifluoride >99.0%(GC)Human
膠體金標(biāo)記的兔抗豬IgG2-溴三氟苯 2-Bromobenzotrifluoride >97.0%(GC)Human, Mouse, Rat
PE標(biāo)記的兔抗豬IgG2-溴三氟苯 2-Bromobenzotrifluoride >97.0%(GC)Human
PE-CY5標(biāo)記的兔抗豬IgG三溴 Bromotrichloromethane >98.0%(GC)Human, Mouse
PE-Cy7標(biāo)記的兔抗豬IgG三溴 Bromotrichloromethane >98.0%(GC)Human, Mouse, Rat
生物素標(biāo)記的兔抗豬IgG4-溴苯 4-Bromotoluene >99.0%(GC)Human, Mouse, Rat
生物素標(biāo)記的兔抗大鼠IgG4-溴苯 4-Bromotoluene >99.0%(GC)Human, Mouse, Rat
辣根過氧化物酶標(biāo)記的小鼠抗兔IgM3-溴苯 3-Bromotoluene >98.0%(GC)Human, Mouse
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級(jí)結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。