使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 異尖線蟲(Ani)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64446
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細(xì)胞中檢出一個靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
釀酒酵母腫瘤轉(zhuǎn)移抑制基因H4抗體Human FSTL3(Follistatin-related protein 3) ELISA Kit胱抑素F(CST7)ELISA試劑盒
白側(cè)耳神經(jīng)元衍生孤兒受體1抗體Human GDF15(Growth Differentiation Factor 15) ELISA Kit胱抑素B(CSTB/CST6/STFB)ELISA試劑盒
平菇軸突生長誘向因子4抗體Human FCN2(Ficolin-2) ELISA Kit胱抑素A(CSTA/STF1/STFA)ELISA試劑盒
灰黃青霉脊髓灰質(zhì)炎病受體相關(guān)蛋白4抗體Human PDGF-AB(Plaet-Derived Growth Factor AB) ELISA Kit胱天蛋白酶激活的脫氧核糖核酸酶(CAD)ELISA試劑盒
胎兒別樣希瓦氏菌核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體Human FOLR1(Folate receptor alpha) ELISA Kit胱天蛋白酶9(Caspase-9)ELISA試劑盒
釀酒酵母線粒體復(fù)合物NDUFS7蛋白抗體Human FCN3(Ficolin-3) ELISA Kit胱天蛋白酶9(Casp-9)ELISA試劑盒
干酪乳桿菌尼曼匹克C2前體蛋白抗體Human Fractalkine(Chemokine C-X3-C-Motif Ligand 1) ELISA Kit胱天蛋白酶8(Caspase-8)ELISA試劑盒
黃褐曲霉煙酰腺嘌呤二核苷酸酶1抗體Human FSTL1(Follistatin-related protein 1) ELISA Kit胱天蛋白酶8(Casp-8)ELISA試劑盒
梭菌一氧化氮合成酶-1抗體(神經(jīng)型)Human IL-16(Interleukin 16) ELISA Kit胱天蛋白酶-5(CASP5)ELISA試劑盒
褐球固氮菌轉(zhuǎn)錄因子相關(guān)蛋白NKX6.1抗體Human IL-12(Interleukin 12) ELISA Kit胱天蛋白酶3(Caspase-3)ELISA試劑盒
根瘤菌造血蛋白1抗體Human IL-15(Interleukin 15) ELISA Kit胱天蛋白酶3(Casp-3)ELISA試劑盒
頂孢霉骨巢蛋白抗體Human ACTα1(Actin Alpha 1, Skeletal Muscle) ELISA Kit胱天蛋白酶12(Casp-12)ELISA試劑盒
釀酒酵母NUP54抗體Human IGF-2(Insulin-like growth factor II) ELISA Kit胱天蛋白酶10(CASP10)ELISA試劑盒
寡養(yǎng)單胞菌屬親核素β1抗體Human IGF-1(Insulin-Like Growth Factor 1) ELISA Kit胱天蛋白酶1(Casp-1)ELISA試劑盒
柯奈尼亞小單孢菌谷氨酸受體NMDAζ1抗體Human IFNγ(Interferon gamma) ELISA Kit胱硫β-合酶(CBS)ELISA試劑盒
炭疽芽孢桿菌谷氨酸受體NMDAζ2抗體Human GDNF(Glial cell line-derived neurotrophic factor) ELISA Kit胍基丁脲水解酶/凝集酶(AGMAT)ELISA試劑盒
異尖線蟲(Ani)檢測試劑盒(熒光-PCR法)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5b抗體洋地黃甙 DIGITOXIN(P)Human, Mouse
磷化信號轉(zhuǎn)導(dǎo)和轉(zhuǎn)錄激活因子5b抗體洋地黃甙 DIGITOXIN(P)Human, Mouse
血管內(nèi)皮生長因子受體相關(guān)蛋白抗體毛地黃素 DIGITOXIGENIN(RG)Human, Mouse
鈉氫通道蛋白9家族A9抗體毛地黃素 DIGITOXIGENIN(RG)Human, Mouse, Rat
類泛素蛋白3抗體毛地黃素 DIGITOXIGENIN(P)(PLEASE CALL)Human
神經(jīng)遷移蛋白Slit2/3抗體毛地黃素 DIGITOXIGENIN(P)(PLEASE CALL)Human
跨膜蛋白Smoothened抗體洋地黃皂苷 DIGITONIN(RG)Human
斯鈣素抗體洋地黃皂苷 DIGITONIN(RG)Human, Mouse, Rat
信號誘導(dǎo)增殖相關(guān)蛋白1抗體(-)-二氫香芹 DIHYDROCARVEOL, (-)-(RG)Human, Mouse
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。