產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 產(chǎn)氣莢膜梭菌(CP)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64432
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復(fù)凍融。
運(yùn)輸:低溫、避光,快遞免費(fèi)送貨上門。
使用及效果:
標(biāo)準(zhǔn)的PCR反應(yīng)體系:
10×擴(kuò)增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
PCR反應(yīng)特點(diǎn)
(1) 特異性強(qiáng)
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實(shí)性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復(fù)性)可以在較高的溫度下進(jìn)行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴(kuò)增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴(kuò)增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個(gè)細(xì)胞中檢出一個(gè)靶細(xì)胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達(dá)3個(gè)RFU(空斑形成單位);在學(xué)中zui小檢出率為3個(gè)。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴(kuò)增液和水浴鍋上進(jìn)行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時(shí)完成擴(kuò)增反應(yīng)。擴(kuò)增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標(biāo)本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細(xì)胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴(kuò)增模板??芍苯佑门R床標(biāo)本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細(xì)胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補(bǔ)的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計(jì)互補(bǔ)的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴(kuò)增。
設(shè)計(jì)引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴(kuò)增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴(kuò)增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴(kuò)增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機(jī)分布,避免5個(gè)以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補(bǔ),特別是3’端的互補(bǔ),否則會(huì)形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴(kuò)增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個(gè)堿基,應(yīng)嚴(yán)格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導(dǎo)致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點(diǎn),被擴(kuò)增的靶序列zui有適宜的酶切位點(diǎn),這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。
細(xì)枝孢磷酸化中心粒蛋白Nudel抗體Human CASP3(Caspase-3) ELISA Kit晶體蛋白β(Cryβ)ELISA試劑盒
嗜中溫寒冷桿菌類固脫氫酶樣蛋白NSDHL抗體Human CYCS(Cytochrome c) ELISA Kit晶體蛋白α(Cryα)ELISA試劑盒
弓形蟲(NT株)磷酸化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human APOA1(Apolipoprotein A-I) ELISA Kit緊密連接蛋白1(ZO1)ELISA試劑盒
運(yùn)動(dòng)節(jié)桿菌磷酸化1型神經(jīng)纖維瘤抗體Human NOS1/nNOS(Nitric oxide synthase, brain) ELISA Kit金屬肽酶含血小板反應(yīng)蛋白1(ADAMTS1)ELISA試劑盒
短短芽孢桿菌磷酸化谷氨酸受體2B抗體Human APOC1(Apolipoprotein C-I) ELISA Kit金屬硫蛋白2(MT-2)ELISA試劑盒
根瘤菌磷酸化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human PDGFB(Plaet-derived growth factor subunit B) ELISA Kit金屬硫蛋白2(MT2)ELISA試劑盒
漢遜德巴利酵母磷酸化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human APCS(Serum amyloid P-component) ELISA Kit金屬硫蛋白(MT)ELISA試劑盒
根瘤菌磷酸化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human CASP1(Caspase-1) ELISA Kit金葡菌腸素(SE)ELISA試劑盒
銀灰口蘑磷酸化核因子p50/k基因結(jié)合核因子抗體Human CDH5(Cadherin-5) ELISA Kit解整合素樣金屬蛋白酶9(ADAM9)ELISA試劑盒
亮白曲霉磷酸化IKB α抗體Human IFNW1(Interferon omega-1) ELISA Kit解整合素樣金屬蛋白酶8(ADAM8)ELISA試劑盒
磷酸化IKB alpha抗體Human DLK-1(Protein delta homolog 1) ELISA Kit解整合素樣金屬蛋白酶33(ADAM33)ELISA試劑盒
毛頭鬼傘(雞腿菇)磷酸化核因子活化T胞漿蛋白2抗體Human SOST(Sclerostin) ELISA Kit解整合素樣金屬蛋白酶19(ADAM19)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌還原型輔酶Ⅱ氧化酶5/煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸抗體Human PYY(Peptide YY) ELISA Kit解整合素樣金屬蛋白酶15(ADAM15)ELISA試劑盒
楊葉點(diǎn)霉增殖相關(guān)蛋白NANOS2抗體Human ANGPTL3(Angiopoietin-related protein 3) ELISA Kit解整合素樣金屬蛋白酶12(ADAM12)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌核因子/k基因結(jié)合核因子 p52/p100抗體Human ACO1(Aconitase 1) ELISA Kit解整合素樣金屬蛋白酶10(ADAM10)ELISA試劑盒
露濕漆斑菌磷酸化核因子/k基因結(jié)合核因子p100抗體Human AOC3(Membrane primary amine oxidase) ELISA Kit解脲脲原體抗體(UU-Ab)ELISA試劑盒
產(chǎn)氣莢膜梭菌(CP)檢測試劑盒(熒光-PCR法)鋅指蛋白772抗體3-(3',4'-二羥苯)乳鈉 DANSHENSU SODIUM (RG)Human
鋅指蛋白740抗體DAMNACANTHAL(RG)Human
鋅指蛋白843抗體瑞香素 DAPHNETIN(RG)Human, Mouse
鋅指蛋白619抗體瑞香素 DAPHNETIN(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse
鋅指蛋白131抗體β-大馬 DAMASCONE, B-(RG)Human
鋅指蛋白131抗體β-大馬 DAMASCONE, B-(RG)Human, Mouse
鋅指蛋白449抗體β-大馬 DAMASCONE, B-(RG)Human, Mouse
鋅指蛋白346抗體6-羥-7-氧-4-苯(黃檀素) DALBERGIN(RG)Human, Mouse, Rat
鋅指蛋白532抗體6-羥-7-氧-4-苯(黃檀素) DALBERGIN(RG)Human, Mouse, Rat