使用及效果:
標準的PCR反應體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 空腸彎曲菌(CJ)檢測試劑盒(熒光-PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64399
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應特點
(1) 特異性強
PCR反應的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應,一般在2~4 小時完成擴增反應。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應五要素:
參加PCR反應的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
假單胞菌氨酸蛋白激酶C底物Marcks抗體Human HK1(Hexokinase-1) ELISA Kit葡萄糖激酶(GCK)ELISA試劑盒
卷枝毛霉卷枝變型腸道分化干MATH-1蛋白抗體Human NCOA6 ELISA Kit葡萄糖6磷酸異構(gòu)酶(GPI)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體Human NCOA7 ELISA Kit葡萄糖6磷酸脫氫酶(G6PD)ELISA試劑盒
枯草芽胞桿菌磷酸化絲裂原活化蛋白激酶MKK6抗體Human ND1 ELISA Kit葡萄糖-6-磷酸酶/葡萄糖-6-磷酸酯酶(G-6-Pase)ELISA試劑盒
香魚假單胞菌磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶4抗體Human NCS1 ELISA Kit葡萄球菌蛋白A(SPA)ELISA試劑盒
球色單隔孢屬單克隆抗體Human ND2 ELISA Kit脯氨酸肽酶(PEPD)ELISA試劑盒
玫瑰色庫克菌線粒體鐵轉(zhuǎn)運蛋白1抗體Human NARF ELISA Kit脯氨酸羥化酶(PHD)ELISA試劑盒
地圓形菌磷酸化原癌基因c-Met抗體Human NAT10 ELISA Kit脯氨酸/谷氨酰富含性剪接因子(SFPQ)ELISA試劑盒
黃褐環(huán)銹傘磷酸化絲裂原活化蛋白激酶激酶1抗體Human NDC80 ELISA Kit破傷風抗體(Tetanus Ab)ELISA試劑盒
隱球酵母屬甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶1抗體Human NBL1 ELISA Kit破骨分化因子(ODF)ELISA試劑盒
匍枝根霉(黑根霉)胃動素受體抗體Human LIPC(Hepatic triacylglycerol lipase) ELISA Kit潑尼松龍(PS)ELISA試劑盒
熒光假單胞菌特異性MLT5蛋白抗體Human PODXL(Podocalyxin) ELISA Kit蘋果酸脫氫酶1(MDH1)ELISA試劑盒
滑菇軟骨基質(zhì)蛋白抗體Human NCOA3 ELISA Kit平滑肌肌球蛋白(SMM)ELISA試劑盒
植物乳桿菌植物亞種絲裂原活化蛋白激酶MKK7抗體Human NCOA5 ELISA Kit平滑肌肌動蛋白(SMA)ELISA試劑盒
立枯絲核菌甘露聚糖結(jié)合凝集素絲氨酸肽酶2抗體Human NCOA6 ELISA Kit嘌呤核苷酸磷酸化酶(PNP)ELISA試劑盒
大腸埃希菌微小染色體維持缺陷蛋白2抗體Human NCOA7 ELISA Kit脾臟酪氨酸激酶(Syk)ELISA試劑盒
空腸彎曲菌(CJ)檢測試劑盒(熒光-PCR法)小鼠凝血因子Ⅸ桃仁(山桃)(標準品)Human, Mouse, Rat
人角蛋白13桃葉干浸膏(標準品)Human, Mouse
大鼠N端前腦鈉素桃葉珊瑚苷(標準品)Human, Mouse
小鼠凝血因子Ⅹ桃枝(標準品)Human, Mouse, Rat
人角蛋白17特女貞苷(標準品)Human, Mouse, Rat
大鼠糖皮質(zhì)類固受體藤合歡(南蛇藤果)(標準品)Human, Mouse
大鼠黃體**素釋放**藤黃(標準品)Human
人制瘤素M受體藤黃(標準品)Human
小鼠血管性血友病因子/瑞斯托霉素輔因子替寧(標準品)Human
設(shè)計引物應遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。