使用及效果:
標準的PCR反應(yīng)體系:
10×擴增緩沖液 10ul
4種dNTP混合物 各200umol/L
引物 各10~100pmol
模板DNA 0.1~2ug
Taq DNA聚合酶 2.5u
Mg2+ 1.5mmol/L
加雙或三蒸水至 100ul
產(chǎn)品參數(shù):
產(chǎn)品名稱: 中華鱉虹彩病毒(STIV)檢測試劑盒 (熒光PCR法)
規(guī)格: 50T
貨號:BH-P64355
公司產(chǎn)品僅用于科研分類:熒光定量PCR試劑盒
儲存條件:-20℃避光保存,避免反復凍融。
運輸:低溫、避光,快遞免費送貨上門。

PCR反應(yīng)特點
(1) 特異性強
PCR反應(yīng)的特異性決定因素為:
①引物與模板DNA特異正確的結(jié)合;
②堿基配對原則;
③Taq DNA聚合酶合成反應(yīng)的忠實性;
④靶基因的特異性與保守性。
其中引物與模板的正確結(jié)合是關(guān)鍵。引物與模板的結(jié)合及引物鏈的延伸是遵循堿基配對原則的。聚合酶合成反應(yīng)的忠實性及Taq DNA聚合酶耐高溫性,使反應(yīng)中模板與引物的結(jié)合(復性)可以在較高的溫度下進行,結(jié)合的特異性大大增加,被擴增的靶基因片段也就能保持很高的正確度。再通過選擇特異性和保守性高的靶基因區(qū),其特異性程度就更高。
(2) 靈敏度高
PCR產(chǎn)物的**量是以指數(shù)方式增加的,能將皮克(pg=10-12g)量級的起始待測模板擴增到微克(ug=10-6g)水平。能從100萬個細胞中檢出一個靶細胞;在病毒的檢測中,PCR的靈敏度可達3個RFU(空斑形成單位);在學中zui小檢出率為3個。
(3) 簡便、快速
PCR反應(yīng)用耐高溫的Taq DNA聚合酶,一次性地將反應(yīng)液加好后,即在DNA擴增液和水浴鍋上進行變性-退火-延伸反應(yīng),一般在2~4 小時完成擴增反應(yīng)。擴增產(chǎn)物一般用電泳分析,不一定要用同位素,無放射性污染、易推廣。
(4) 對標本的純度要求低
不需要分離病毒或及培養(yǎng)細胞,DNA 粗制品及總RNA均可作為擴增模板??芍苯佑门R床標本如血液、體腔液、洗嗽液、毛發(fā)、細胞、活PCR技術(shù)概論。

PCR反應(yīng)五要素:
參加PCR反應(yīng)的物質(zhì)主要有五種即引物、酶、dNTP、模板和Mg2+
引物: 引物是PCR特異性反應(yīng)的關(guān)鍵,PCR 產(chǎn)物的特異性取決于引物與模板DNA互補的程度。理論上,只要知道任何一段模板DNA序列,就能按其設(shè)計互補的寡核苷酸鏈做引物,利用PCR就可將模板DNA在體外大量擴增。
根瘤菌腦蛋白9抗體Human PAEP(Glycodelin) ELISA Kit一氧化氮(NO)ELISA試劑盒
馬腺疫鏈球菌獸疫亞種絲裂原誘導蛋白2抗體Human PROX1 ELISA Kit葉酸受體α(FOLR1)ELISA試劑盒
解淀粉芽孢桿菌鋅指蛋白393抗體Human PRPF19 ELISA Kit葉酸受體(FOLR)ELISA試劑盒
枯草芽孢桿菌組蛋白賴氨酸特異性脫甲基酶1抗體Human PROSC ELISA Kit葉酸(FA)ELISA試劑盒
扣囊復膜孢酵母驅(qū)動蛋白樣蛋白1抗體(甲狀腺受體相互作用蛋白5)Human PRPF3 ELISA Kit氧化型谷胱甘肽(GSSG)ELISA試劑盒
宇佐美曲霉組蛋白甲基化KMT3B抗體(雄受體激活蛋白)Human ZNF335(Zinc finger protein 335) ELISA Kit氧化型低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒
黑曲霉離子通道蛋白Kv4.3抗體Human PRPF40A ELISA Kit氧化高密度脂蛋白(Ox-HDL)ELISA試劑盒
枯草芽胞桿菌Killin-p53調(diào)節(jié)復制抑制蛋白抗體Human PRKX ELISA Kit氧化低密度脂蛋白抗體(OLAb)ELISA試劑盒
盔狀畢赤酵母賴氨酸tRNA的連接酶抗體Human PRMT1 ELISA Kit氧化低密度脂蛋白(OxLDL)ELISA試劑盒
大腸埃希菌220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體Human PRPF40B ELISA Kit氧還原蛋白過氧化物酶4(PRDX4)ELISA試劑盒
嗜冷生孢八疊球菌磷酸化220kDa蛋白激酶D相互作用蛋白抗體Human PRPF6 ELISA Kit延伸蛋白A(EloA)ELISA試劑盒
發(fā)根土壤桿菌(發(fā)根植物單胞菌)(現(xiàn)1)基爾曼氏細小病VP1/VP2抗體(大鼠潛在病KRV)C端Human PRMT5(Protein arginine N-methyltransferase 5) ELISA Kit煙酰腺嘌呤二核苷酸磷酸(NADPH)ELISA試劑盒
灰毛青霉離子通道蛋白家族KCNQ1抗體Human PRMT8 ELISA Kit煙酰腺嘌呤二核苷酸(NAD)ELISA試劑盒
褐黃木耳(琥珀木耳)組蛋白H3 K9甲基轉(zhuǎn)移酶抗體Human PRMT3 ELISA Kit牙骨質(zhì)蛋白1(CEMP-1)ELISA試劑盒
Paenibacillus thailandensis生物鐘KAT13D蛋白抗體Human PRMT6 ELISA Kit牙本質(zhì)基質(zhì)蛋白1(DMP1)ELISA試劑盒
柄籃狀菌Kelch樣蛋白36抗體Human PRPF40A ELISA Kit循環(huán)復合物(CIC)ELISA試劑盒
中華鱉虹彩病毒(STIV)檢測試劑盒 (熒光PCR法)線粒體硫氧還蛋白2抗體樺木/樺木腦 BETULIN(RG)Human, Mouse, Rat
腫瘤壞死因子受體超家族成員5抗體樺木/樺木腦 BETULIN(SH)Human, Mouse, Rat
瞬時表達軸索糖蛋白1抗體樺木/樺木腦 BETULIN(SH)Human, Mouse
非受體酪氨蛋白激酶2抗體樺木/樺木腦 BETULIN(P)Human
腫瘤壞死因子α誘導蛋白5樺木/樺木腦 BETULIN(P)Human
腫瘤壞死因子C白果內(nèi)酯 BILOBALIDE(AS)Human
轉(zhuǎn)化生長因子β4抗體白果內(nèi)酯 BILOBALIDE(AS)Human
轉(zhuǎn)化生長因子β活化激酶結(jié)合蛋白1抗體7-去銀杏雙黃 BILOBETIN(P)(PLEASE CALL)Human, Mouse, Rat
硫氧還蛋白結(jié)合蛋白2抗體(+)-荷包牡丹 BICUCULLINE, (+)-(P)Human, Mouse, Rat
設(shè)計引物應(yīng)遵循以下原則:
①引物長度: 15-30bp,常用為20bp左右。
②引物擴增跨度: 以200-500bp為宜,特定條件下可擴增長至10kb的片段。
③引物堿基:G+C含量以40-60%為宜,G+C太少擴增效果不佳,G+C過多易出現(xiàn)非特異條帶。ATGC好隨機分布,避免5個以上的嘌呤或嘧啶核苷酸的成串排列。
④避免引物內(nèi)部出現(xiàn)二級結(jié)構(gòu),避免兩條引物間互補,特別是3’端的互補,否則會形成引物二聚體,產(chǎn)生非特異的擴增條帶。
⑤引物3’端的堿基,特別是zui末及倒數(shù)個堿基,應(yīng)嚴格要求配對,以避免因末端堿基不配對而導致PCR失敗。
⑥引物中有或能加上合適的酶切位點,被擴增的靶序列zui有適宜的酶切位點,這對酶切分析或分子克隆很有好處。
⑦引物的特異性:引物應(yīng)與核酸序列數(shù)據(jù)庫的其它序列無明顯同源性。